母猪日粮添加硒代蛋氨酸对后代乳猪生长的影响

郄彦昭 占秀安 李 星 呼慧娟 王永侠 浙江大学饲料科学研究所，杭州 310029

硒是动物必需的微量元素之一，参与机体谷胱甘肽过氧化物酶的合成，甲状腺激素的代谢，从而保持动物健康，促进机体生长。硒有无机硒和有机硒两种形式。与无机硒相比，有机硒在动物体内具有吸收率高、生物活性强、毒性低、环境污染小等特点。因此，近年来有机硒替代无机硒成为研究热点。贾建英报道，妊娠后期母猪日粮中添加酵母硒与亚硒酸钠相比，极显著地提高了断奶个体重和母猪泌乳力，同时有提高产活仔数、初生窝重、断奶窝重和初生个体重的趋势，而硒代蛋氨酸是酵母硒的主要成分。为此，本试验以高纯度DL-硒代蛋氨酸作为有机硒源，以亚硒酸钠为对照，研究母猪补充不同硒源对后代乳猪组织硒含量、抗氧化功能及代谢的影响，旨在探讨硒代蛋氨酸的母体效应，为DL-硒代蛋氨酸的产业化开发和应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

DL-硒代蛋氨酸（纯度99.5%），亚硒酸钠(纯度98%)，由Sigma公司提供；试验动物为长×大母猪；试验饲粮为参照NRC（1998）妊娠期和泌乳期母猪营养需要配合而成的颗粒状饲料，日粮组成和营养水平见表1。

1.2 试验方法

1.2.1 饲养试验

试验选取妊娠后期、胎次相同的长×大母猪12头，按饲养试验要求分为2组，每组6个重复，每个重复1头猪，两组分别饲喂添加了亚硒酸钠和DL-硒代蛋氨酸的日粮，添加量均为0.3mgSe/kg。试验分妊娠后期（32d）和泌乳期（28d）两阶段，共计60d，分别饲喂妊娠期和泌乳期日粮。试验母猪按时日喂3次，妊娠后期每次每头喂料1.3kg，泌乳期每次每头2kg。乳猪喂乳不喂料直至断奶。自由饮水，保持产房清洁、通风。

1.2.2 样品采集与保存

饲养试验结束后，每个重复选取体重相近的乳猪（母）1头，共12头，耳静脉采血制备血清，屠宰取肝脏、肾脏、胰脏、胸腺、甲状腺和肌肉样品，置于-70℃冰箱保存。

1.2.3 指标测定及方法

乳猪生长性能指标的测定：初生窝重、断奶窝重等生长性能指标按常规方法计算。

乳猪组织硒含量测定：称取0.2 g左右样品于微波消解罐中，加入1mL过氧化氢，拧紧罐盖，于微波消解系统内消解7min左右，消解至无色透明液，冷却后取出用超纯水定容至10mL，取过滤消化液2mL于10mL试管中，加50%（V/V）的盐酸溶液1mL，加入5%硫脲和5%抗坏血酸的混合液1mL，反应15min后用超纯水定容，混匀，于AFS-230a双道原子荧光光度计上机测定，同样方法做试剂空白。

表1 试验日粮组成及营养水平（风干基础 %）

乳猪组织抗氧化指标测定：总抗氧化能力（TAOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）采用试剂盒进行测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

乳猪血清中激素指标测定：三碘甲腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、游离三碘甲腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）、胰岛素（Ins）、胰高血糖素（Glu）和胰岛素样生长因子-I（IGF-I）采用试剂盒方法测定，其中T3、T4、FT3、FT4试剂盒购自南京建成生物工程研究所，Ins和Glu试剂盒购自原子高科股份有限公司，IGF-1试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司。

1.3 数据处理

用SPSS16.0软件进行统计分析，数据以平均数±标准差（X±SD）表示。

2 结果与分析

2.1 母猪生产性能和乳猪生长性能

由表2可知，不同硒源间乳猪初生窝重和初生个体重无显著差异 （P>0.05），但硒代蛋氨酸组断奶窝重、断奶个体重、平均日增重较亚硒酸钠组分别提高了 8.00%（P<0.05）、9.93%（P<0.05）、12.20%（P<0.05）。

表2 母猪补充不同硒源对后代乳猪生长性能的影响（n=6）

2.2 乳猪组织硒含量

由表3可知，与对照组相比，试验组乳猪肝脏、肾脏、胰脏、肌肉、胸腺和甲状腺硒含量分别提高了2.54%（P<0.01）、6.94%（P<0.01）、54.29%（P<0.01）、37.37%（P<0.01）、7.69% （P<0.05）和 12.82% （P<0.05）。

2.3 乳猪组织抗氧化指标

表4显示，与亚硒酸钠组比，硒代蛋氨酸组乳猪肝脏、肾脏、胰脏和肌肉T-AOC分别提高了37.03% （P<0.05）、29.35% （P<0.01）、112.52% （P<0.01）和 14.56%（P<0.05），GSH-Px 活力相应地提高了 13.44%（P<0.05）、5.90%（P<0.05）、22.84%（P<0.01）和 22.75%（P<0.05）；胰脏和肌肉中 SOD 活力分别提高了 24.60%（P<0.01）和 17.39%（P<0.01）；肾脏、胰脏和肌肉中GSH含量分别提高了18.19%（P<0.05）、131.14%（P<0.01）和 21.83%（P<0.05）；肝脏、肾脏、胰脏中MDA含量分别降低了7.76%（P<0.05）、11.02%（P<0.05）和 25.55%（P<0.01）。

表3 母猪补充不同硒源对后代乳猪组织硒含量的影响（n=6）

表4 母猪补充不同硒源对后代乳猪组织抗氧化指标的影响（n=6）

2.4 乳猪血清激素水平

由表5可见，与亚硒酸钠组比，硒代蛋氨酸组乳猪血清 T3浓度提高了13.89%（P<0.05），T4和Glu浓度分别降低了8.43%（P<0.05）和38.51%（P<0.01），T4/T3和 Glu/Ins值分别降低了 19.66%（P<0.01）和 40.61%（P<0.01），而 FT3、FT4、Ins 和 IGF-1浓度差异不显著（P>0.05）。

3 讨论

3.1 母猪补充不同硒源对后代乳猪生长性能的影响

本试验结果表明，妊娠后期（32 d）和泌乳期（28d）母猪饲添同一硒水平（0.3 mg/kg）DL-硒代蛋氨酸和亚硒酸钠对后代乳猪初生窝重、初生个体重影响差异不显著（P>0.05），这与Gunter等对母牛和Yoon等对母猪研究结果基本一致。但硒代蛋氨酸组乳猪断奶窝重、断奶个体重和平均日增重显著高于亚硒酸钠组，说明硒代蛋氨酸改善了乳猪的生长性能。而Mahan等报道，在妊娠母猪产前（6d）补充同一硒水平（0.3mg/kg）酵母硒较亚硒酸钠有提高后代乳猪断奶窝重的趋势，但差异不显著。这可能是日粮补充的硒源及时间不同造成的。

表5 母猪补充不同硒源对后代乳猪血清激素水平的影响（n=6）

3.2 母猪补充不同硒源对后代乳猪组织硒含量的影响

本研究结果表明，母猪补充DL-硒代蛋氨酸较亚硒酸钠显著提高了后代乳猪组织硒含量，这与Mahan和Kim的研究结果基本一致。由于试验期间乳猪喂乳不喂料，因此乳猪组织硒含量的变化是由母体胎盘转移硒水平和乳硒含量不同引起的，可见DL-硒代蛋氨酸较亚硒酸钠能更为有效地将硒通过胎盘和乳汁传递给后代。这主要由硒代蛋氨酸和亚硒酸钠在体内代谢机制不同引起的。亚硒酸钠在动物肠道中被动吸收，而硒代蛋氨酸则以主动运输形式吸收。硒随血液进入组织主要分布在肾、肝、胰和脾中，少量蓄积在肌肉、骨骼中。硒不管以何种形式进入组织，都与蛋白质相结合。由于硒代蛋氨酸类似于蛋氨酸的分子结构，硒代蛋氨酸可替代蛋氨酸参入到蛋白质合成中。因此硒代蛋氨酸组母体组织硒含量较高，通过胎盘和乳汁转移的硒也相应较多。在比较硒沉积的组织差异性时发现，两组硒沉积量高低顺序均为肾脏>肝脏>胰脏>肌肉>胸腺>甲状腺，这与Zhan在肥育猪上的研究结果一致。

3.3 母猪补充不同硒源对乳猪抗氧化功能的影响

总抗氧化能力（T-AOC）是用于衡量机体抗氧化系统功能的综合指标。谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）是体内的抗氧化酶，发挥清除体内自由基和脂质过氧化物的作用，硒半胱氨酸是GSH-Px的活性中心。GSH在GSH-Px的催化作用下与过氧化物反应生成无毒的水和醇类。丙二醛（MDA）含量可反映机体脂质过氧化的程度。本研究结果显示，在母猪饲粮中添加同一硒水平（0.3mg/kg）的DL-硒代蛋氨酸，较亚硒酸钠提高了后代乳猪组织GSH-Px和SOD活力及T-AOC、GSH水平，降低了MDA含量。这与Gunter、Awadeh、Pehrson等在母牛及犊牛上和Mahan（2000）在母猪及乳猪上的报道一致。由此提示，DL-硒代蛋氨酸较亚硒酸钠增强了后代乳猪的抗氧化能力。

3.4 母猪补充不同硒源对乳猪激素分泌的影响

甲状腺激素T4在脱碘酶（DI）的作用下转化为T3，T3的生理效应是T4的5～8倍。硒是脱碘酶的重要组成部分。研究证实，动物缺硒能引起肝、肾DI-I活性下降，造成血清T3明显下降，T4明显升高；缺硒也能引起垂体、脑和褐色脂肪组织的DI-Ⅱ活性下降，造成垂体和大脑中的T3下降。本试验中，硒代蛋氨酸组后代乳猪血清T3水平显著高于亚硒酸钠组，而T4水平显著低于亚硒酸钠组。这与Awadeh在妊娠母牛上的研究报道一致。由此说明，DL-硒代蛋氨酸较亚硒酸钠能提高后代乳猪机体的代谢水平。

硒具有降低血糖和调控胰岛素介导的代谢过程等拟胰岛素作用。硒缺乏可引起大鼠胰岛β细胞分泌功能改变，胰岛分泌储备减少。胰岛素能促进脂肪的沉积、蛋白质和核酸的合成，而胰高血糖素则加快脂解作用。因此Glu/Ins比值往往决定着脂类合成或分解的方向。本研究结果显示，母猪补充DL-硒代蛋氨酸较亚硒酸钠显著提高了后代乳猪血清Ins水平，而降低了Glu水平，从而减小了Glu/Ins值。由此提示，DL-硒代蛋氨酸能有效促进后代乳猪脂肪的沉积、蛋白质和核酸的合成，抑制机体的脂解作用，进而发挥促进乳猪生长的作用。胰岛素样生长因子在动物生长、新陈代谢、繁殖等过程中发挥重要作用。

4 结论

母猪饲粮补充0.3 mg/kg硒水平的DL-硒代蛋氨酸较亚硒酸钠可提高后代乳猪组织硒沉积量，增强其抗氧化能力，有效调节激素分泌，而促进乳猪生长。

（略）