宣导泻肺饮对心力衰竭大鼠血流动力学及神经内分泌的影响1)

杨祥坤,许国振,潘 茹

心力衰竭(心衰)病人,在一定阶段会出现三焦壅塞、气血水液代谢失常的病理变化,以胸闷喘气、咳痰、脘腹胀满、双下肢水肿、二便艰涩为其临床特征。宣导泻肺饮是我科治疗心衰的临床验方,具有宣导三焦,化痰活血利水的功效,临床应用有较好的疗效。本实验通过采用宣导泻肺饮作用于心衰大鼠,观察其对心衰大鼠血流动力学及神经内分泌的影响,并探讨其作用机制。

1 材料与方法

1.1 药品与仪器 戊巴比妥钠(中国医药集团上海化学试剂公司生产,批号:20041117);肝素、青霉素等均为市售产品;BL-420E+生物机能实验系统、BL-New Century生物信号显示与处理软件(成都泰盟科技有限公司生产)、YX-200型动物呼吸机(成都泰盟科技有限公司生产)、MFV-1200型电磁血流量计(日本光电公司生产);血浆心钠素(ANP)、醛固酮(ALD)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)等放射免疫分析测定盒(北京北方生物技术研究所);Gγ-1200放射免疫计数器(中国科学技术大学科技实业总公司中佳光电仪器分公司)。实验药品:洛汀新(盐酸贝那普利片,每片10mg,北京诺华制药有限公司生产,批号:05032);宣导泻肺饮浓缩液(组成:葶苈子、莱菔子、泽泻、桑白皮、杏仁、川厚朴、猪苓、陈皮、当归、川木通等组成,相当于每毫升含生药3.81 g,武汉中医院制剂室生产)。

1.2 分组与模型制作 SPF级Wistar雄性大鼠60只,体重190 g～210 g。由湖北省医学科学院实验动物中心提供[合格证号:SCXK(鄂)2003-0005]。60只大鼠中随机抽出10只作为假手术组,剩余均复制心衰大鼠模型,成功后再按随机数字表法分为模型组、洛汀新组、中药小剂量组、中药大剂量组、中药+洛汀新组。每组样本数均为10只。造模方法:采用缩窄腹主动脉方法[1]复制大鼠心衰模型,大鼠适应性喂养7 d后,3%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉,无菌操作,剑突下腹正中切口,打开腹腔,在左肾动脉分支以上,钝性分离暴露腹主动脉,用游标卡尺测量其直径,然后采用相应的注射针头与腹主动脉一起平行结扎[2],抽出针头,即可形成腹主动脉狭窄(横截面积减少50%～60%)。术后经腹腔注射青霉素1周(前3 d每只4×105U,后4 d每只2×105U),预防感染。

1.3 处理因素 造模成功随机分组后,开始给予实验药物灌胃。假手术组和造模组予生理盐水3 m L;洛汀新组予洛汀新2 mg/kg;中药小剂量组予宣导泻肺饮浓缩液0.28 g/kg;中药大剂量组予宣导泻肺饮浓缩液0.55 g/kg;中药+洛汀新组予宣导泻肺饮浓缩液0.28 g/kg,洛汀新 2 mg/kg。用法:每日 1次灌胃,连续1个月。

1.4 观察指标的测定 实验观察前禁食12 h。3%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射,麻醉后固定连接BL-420E+生物机能实验系统,记录Ⅱ导心电图及心率,行呼吸机辅助呼吸(频率60/min,潮气量3.5 m L)。分离主动脉约 0.5 cm,安放 2 mm的电磁血流量计探头,测每搏输出量(SV)、心输出量(CO)、每搏量指数(SV I)、心脏指数(CI)指标。分离右颈总动脉行动脉插管,接BL-420E+生物机能实验系统,测动脉收缩压(SAP)、动脉舒张压(DAP)、平均动脉压(MAP)等指标。用心导管于心尖部插入左心室[3],测左室收缩压(LVSP)、左室内压最大上升速率(LV+dp/d tmax)等指标。由左心室导管直接放血,离心后取血浆冰浴保存,送同位素室应用Gγ-1200放射免疫计数器,采用均相竞争放射免疫法测定AngⅡ、ALD、ANP等放免指标。

1.5 统计学处理 选用SPSS13.0统计软件进行分析。数据以均数±标准差(±s)表示。均数间两两比较采用t检验,多个样本均数间每两个均数的比较采用q检验,多个样本均数与一个对照组均数比较用Dunnett’t检验。

2 结 果

2.1 血流动力学指标结果(见表1、表2) 模型组与假手术组相比,SBP 、DBP、M AP 、HR、LVSP、LV+dp/d tmax、SV 、CO 、SV I、CI等指标均有统计学意义(P＜0.05或 P＜0.01),模型组 HR增加明显,其他各指标下降明显,说明造模成功。中药大剂量组、中药小剂量组、洛汀新组、中药+洛汀新组与模型组相比,HR减慢明显,其他各项指标均有提高(P＜0.05或 P＜0.01)。说明各处理因素均能够改善心功能。中药大剂量组、中药小剂量组、洛汀新组与中药+洛汀新组比较,LVSP、LV+dp/dtmax、SV、CO、SV I、CI等均有统计学意义(P＜0.05或 P＜0.01),中药+洛汀新组改善心功能更加明显。中药大剂量组与中药小剂量组相比,DBP 、MAP 、LVSP、LV+dp/dtmax、SV、CO 、SV I、CI等指标有统计学意义,说明随着宣导泻肺饮剂量的增大,其改善心功能的作用也随之增强。

表1 各组 SBP、DBP、M AP、LVSP、LV+dp/d tmax的比较(±s)

组别 SBP(mm Hg) DBP(mmHg) M AP(mmHg) LVSP(mm Hg) LV+dp/dtmax(mmH g/s)假手术组 114.50±21.00 95.00±24.47 101.70±23.23 126.00±12.45 4 666.00±639.61模型组 89.70±18.261) 69.80±23.781) 76.50±21.391) 96.10±15.902) 3 666.90±650.671)中药大剂量组 118.90±18.424) 88.40±11.683)7) 98.50±13.183)7) 122.90±13.644)5)7) 6 202.40±558.014)6)8)中药小剂量组 100.90±25.583)6) 70.00±17.596) 80.30±18.696) 110.30±10.863)6) 4 898.80±663.014)6)洛汀新组 112.90±18.193)5) 78.10±23.585) 89.70±21.105) 123.30±22.104)5) 4 874.00±614.024)6)中药+洛汀新组 128.60±13.684) 95.90±11.004) 105.10±8.684) 144.00±22.154) 6 521.00±550.954)与假手术组比较,1)P＜0.05,2)P＜0.01;与模型组比较,3)P＜0.05,4)P＜0.01;与中药+洛汀新组比较,5)P＜0.05,6)P＜0.01;与中药小剂量组比较,7)P＜0.05,8)P＜0.01

表2 各组 HR、SV 、CO 、SV I、CI的比较(±s)

表2 各组 HR、SV 、CO 、SV I、CI的比较(±s)

组别 HR(/m in) SV(m L/beat) CO(m L/m in) SV I[m L/(beat·m2)] CI[m L/(m in·m2)]假手术组 381.80±32.26 0.228±0.034 86.967±14.512 7.72±1.12 2 942.45±437.78模型组 458.60±30.591) 0.124±0.0181) 56.620±6.7501) 4.35±0.771) 1 980.32±286.521)中药大剂量组 389.10±26.032) 0.276±0.0572)3)5) 106.830±20.2662)3)5) 9.23±1.522)3)4) 3 579.04±552.172)3)4)中药小剂量组 397.90±48.472) 0.207±0.0472)3) 80.849±12.9612)3) 7.57±1.922)3) 2 958.76±603.512)3)洛汀新组 384.40±35.452) 0.260±0.0412)3) 99.866±18.6362)3) 9.34±1.802)3) 3 592.29±801.2622)3)中药+洛汀新组 399.20±27.562) 0.370±0.0592) 147.301±23.0292) 12.48±2.272) 4 970.58±901.352)与假手术组比较,1)P＜0.01;与模型组比较,2)P＜0.01;与中药+洛汀新组比较,3)P＜0.01;与中药小剂量组比较,4)P＜0.05,5)P＜0.01

2.2 放免指标(见表3) 模型组 ANP、ALD、AngⅡ均高于假手术组(P＜0.05或P＜0.01),说明模型组存在神经内分泌过度激活,造模成功。与模型组比较,中药大剂量组、中药小剂量组、洛汀新组、中药+洛汀新组ANP、ALD、AngⅡ水平下降(P＜0.05或P＜0.01)。说明各处理因素均能对抗神经内分泌激活。但中药大剂量组、中药+洛汀新组ALD水平较洛汀新组降低明显(P＜0.01)。

表3 各组ANP、ALD、AngⅡ水平比较(±s)

表3 各组ANP、ALD、AngⅡ水平比较(±s)

组别 ANP(ng/m L) A LD(ng/m L) A ngⅡ(pg/mL)假手术组 2.13±0.37 0.99±0.31 1 543.10±506.25模型组 2.93±0.682) 1.50±0.481) 3 040.11±820.252)中药大剂量组 2.03±0.454) 0.67±0.084)5)1 482.60±639.404)中药小剂量组 2.03±0.524) 0.94±0.443) 1 930.51±479.543)洛汀新组 2.11±0.294) 1.08±0.373) 1 565.82±473.134)中药+洛汀新组 2.19±0.733) 0.72±0.104)5)1 713.25±671.254)与假手术组比较,1)P＜0.05,2)P＜0.01;与模型组比较,3)P＜0.05,4)P＜0.01;与洛汀新组比较,5)P＜0.01

3 讨 论

腹主动脉结扎法[4]是常用的慢性压力超负荷型心衰造模方法,该方法的机制是造成肾缺血,导致肾素增加,激活肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAS),增加外周阻力,同时狭窄腹主动脉也可直接使心脏后负荷增加。此法与临床上的充血性心力衰竭的病理变化过程较为吻合,且简单,易控制,机制明了,模型稳定,心衰程度比较齐同。

本实验结果表明,与模型组相比,各用药组HR减慢明显,其他各项血流动力学指标均有提高,明显改善了心功能。中药大剂量组与中药小剂量组相比,DBP、MAP、LVSP、LV+dp/dtmax、SV、CO、SI、CI等指标有统计学意义,说明随着宣导泻肺饮剂量的增大,其改善心功能的作用也随之增强。现代药理研究表明,葶苈子水提取物可明显增强心肌收缩性即对心肌具有正性肌力作用,能改善心脏的泵血功能对心率无明显影响,不增加心肌耗氧量,对心衰的心脏可增加输出量,降低静脉压[5]。陈皮和当归均可增强心脏收缩力,使心输出量增加,尚可扩张冠状动脉,使冠脉流量增加[6]。莱菔子的提取液静脉注射能明显降压及降肺动脉高压,其中β-谷甾醇,尚有一定的镇咳、祛痰作用[7]。川木通、猪苓、泽泻[8]有利尿作用。杏仁有平喘作用,其含有的苦杏仁苷在人体内分解产生氢氰酸,能镇静呼吸中枢而起止咳平喘作用。所以诸药合用可以明显改善心衰大鼠的血流动力学,从而改善心功能。

现代医学研究证明,心室重塑是充血性心力衰竭发生、发展的重要病理环节,而RAS系统的激活,是心室重塑的主要机制之一。AngⅡ、ALD是RAS系统主要的效应物质,病理情况下,二者均可导致水钠潴留和循环血量增加,增加心脏负荷;促进心肌和平滑肌增生、重构[9,10]。ANP是由心房分泌的一种扩血管物质,它能直接抑制心肌细胞和血管平滑肌肥厚和间质纤维化[11]。本次实验过程中心衰大鼠模型组血浆中的 AngⅡ、ANP、ALD分泌均较假手术组升高。实验结果表明宣导泻肺饮能抑制 RAS系统的过度激活,降低血浆中的 AngⅡ、ANP、ALD水平,宣导泻肺饮和洛汀新具有协同作用,然而,中药+洛汀新组及中药大、小剂量组在抑制ANP、ALD、AngⅡ等神经内分泌过度激活中,未见明显差异。

综上所述,宣导泻肺饮治疗心衰的作用,其机制可能与强心、利尿、降低心脏负荷以及抑制神经内分泌过度激活有关,其他作用机制有待进一步研究。

[1] 张善堂,王钦茂,陈礼明,等.参麦注射液对实验性心力衰竭大鼠左室舒缩性能及血浆Ang、ET和ANP的影响[J].中国中西医结合急救杂志,2001,8(1):21-24.

[2] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,1989:854.

[3] 朱明娟,黄琪.中药脑肺康对实验性犬心力衰竭的影响[J].中国心血管杂志,2000,5(2):70.

[4] 白民刚.狭窄腹主动脉致大鼠心衰模型方法的探讨[J].实用中西医结合杂志,1997,10(2):116-117.

[5] 吴晓玲,杨裕忠.葶苈子水取物对狗左心室功能的作用[J].中药材,1998,21(5):244.

[6] 王浴生,邓文龙,薛春生.中药药理与应用[M].北京:人民卫生出版社,2000:4.

[7] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海:上海科学技术出版社,1998:713.

[8] 田代华.实用中药辞典[M].北京:人民卫生出版社,2002:914.

[9] 中华医学会心血管病学分会,中华心血管病杂志编辑委员会.慢性收缩性心力衰竭治疗建议[J].中国循环杂志,2002,17(4):248-263.

[10] Eugene Braunw ald.心脏病学[M].北京:人民卫生出版社,2000:379-380.

[11] 汤新之,崔乃杰.临床生物化学[M].天津:天津科学技术出版社,1999:340.