南京晓庄学院生物化工与环境工程学院 戈 千 周业飞* 周梅仙
那西肽是一种含硫多肽类抗生素(Benazet,1980),对革兰氏阳性菌蛋白质的合成有抑制作用,但因水溶性较差,目前尚未应用于临床。由于那西肽具有良好的生长刺激作用,且在动物体内不会残留,现在已被开发成为一种商品化的新型非吸收型饲料添加剂。近年来的研究表明,那西肽可有效促进肉仔鸡增重,并提高饲料转化率(Yang,2010;萨 仁 娜 ,1997;Benazet,1980), 但 对其机制研究报道则较少。本研究以7日龄AA肉仔鸡为试验对象,研究了那西肽对肉仔鸡空肠二糖酶活性的影响,以此揭示那西肽影响肉仔鸡生长机理。为进一步探讨那西肽对肉仔鸡促生长机理及合理利用那西肽提供科学依据。
1.1.1 试验动物 AA肉鸡,由江苏省海安县双效种禽有限责任公司孵禽场提供。
1.1.2 那西肽 0.25%那西肽预混剂,由杭州汇能生物技术有限公司提供。
1.2.1 试验动物分组与管理 选取7日龄AA肉鸡140只,雌雄各半,称重,随机分成4组,分别为对照组和试验1、2、3组,每组30只,进行笼养,每笼10只,自由采食和饮水,持续光照。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮 (日粮组成及营养水平见表1),试验1、2、3组在基础日粮中分别添加0.5‰、1‰、2‰的那西肽预混剂的日粮。试验期为42 d。
1.2.2 肉仔鸡体重的测定 以每个重复为单位分别测定7、42日龄空腹体重,计算7~42日龄肉鸡体增重。
表1 试验基础日粮组成及营养水平
1.2.3 肉仔鸡空肠蔗糖酶和麦芽糖酶活性测定
1.2.3.1 肠黏膜液制备 在试验期第35 d,肉仔鸡禁食12 h后称重,接着鸡颈部放血处死,剖开腹腔,取出一段空肠,用冰冷的生理盐水轻轻冲洗后,肠段纵向切开,平铺于冰冷的培养皿上,用灭菌的手术刀刀背刮取约5 g肠黏膜置于1.5 mL离心管中(内容物为肠道黏膜组织,肠道二糖酶主要存在于肠道黏膜中),-20℃保存备用。参照许梓荣等(2002)方法,取约0.5 g肠黏膜于玻璃匀浆器中,加入4 mL 0.1 mol/L pH 6.8的顺丁烯二酸缓冲液,冰浴匀浆,4℃放置过夜后3000 r/min离心10 min,取上清测定酶活。
1.2.3.2 蔗糖酶和麦芽糖酶活性测定 将上清液稀释一定浓度后依据李勇等(2008)方法测定蔗糖酶和麦芽糖酶活性。酶活单位用每分钟水解的二糖 μmol数表示,即 μmol/min。
1.2.4 数据统计 试验数据采用SPSS统计软件ANOVA过程中的单因素方差分析法进行分析,Duncan’s检验法进行各组间的多重比较,显著水平设为0.05。所有数据均以平均值±标准差表示。
2.1 那西肽对肉仔鸡体重的影响 结果见表2。
由表2可知,试验初期各组肉仔鸡体重无显著差异(P>0.05),试验结束时0.5‰、1‰和2‰肉仔鸡体增重分别比对照组肉仔鸡体增重高8.2%、22.2%和 23.1%,差异均显著(P < 0.05),同时各试验组之间肉仔鸡体增重差异也显著 (P<0.05)。
表2 不同剂量那西肽对肉仔鸡体重的影响 kg
2.2 那西肽对肉仔鸡空肠蔗糖酶和麦芽糖酶活性的影响 结果见表3。
由表3可看出,各那西肽组肉仔鸡空肠黏膜蔗糖酶和麦芽糖酶活性均高于对照组,其中1‰组显著高于其他各组(P<0.05),而2‰组麦芽糖酶活性显著高于对照组(P<0.05)。可见一定剂量的那西肽可增加肉仔鸡空肠黏膜二糖酶活性。
表3 不同剂量那西肽对肉仔鸡空肠蔗糖酶和麦芽糖酶活性的影响
二糖酶是幼龄动物小肠绒毛刷状缘上的主要蛋白质 (Peng等,2010;晁洪雨和李福昌,2008),它不是由消化腺分泌的,而是来自脱落肠黏膜上皮细胞,在细胞崩解后释放出来并附着在微绒毛的肠腔面(Ortega,1995),其活性大小是衡量肠道黏膜上皮细胞发育程度和功能强弱的一个重要指标(Lee 等,2010;陆东海等,2009),没有小肠黏膜二糖酶,二糖不能被小肠直接吸收,就没有糖类物质的彻底分解,更没有单糖的吸收及能量的转化和利用(Chotinsky等,2001;Applegate等,2009)。本试验在肉仔鸡日粮中添加1‰那西肽,结果发现,7~42日龄体增重显著提高,蔗糖酶和麦芽糖酶活性均显著升高,提示那西肽可促进小肠发育,增强糖代谢,进而提高家禽生产性能。
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