正交试验法优选血府逐瘀滴丸的提取工艺*

朱晓晶 ， 杨欣莹 ， 李凤阁

(天津宏仁堂药业有限公司，天津 300122)

血府逐瘀滴丸是由《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第5册和第16册中“血府逐瘀胶囊”改进剂型和工艺而制成。处方由桃仁、当归、枳壳、川芎等11味药组成，具有活血祛瘀，行气止痛之功效，主治瘀血内阻，胸痛或头痛，内热瞀闷，失眠多梦，心悸怔忡，急躁善怒。方中所有药味拟采用渗漉提取法，以乙醇为提取溶剂。其中当归、川芎两味药中主要活性成分阿魏酸(sodium ferulate)对心肌缺血有很好的保护作用，具有明显抗缺血心肌再灌注损伤作用[1]。本试验采用正交设计法，以阿魏酸的提取效果和转移率为评价指标，对血府逐瘀滴丸的乙醇渗漉提取工艺条件进行研究，确定最佳工艺条件。

1 仪器与试药

岛津LC-2010A高效液相色谱仪；色谱柱: Diamonsil-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；阿魏酸对照品 (中国药品生物制品检定所，批号110773-9910)；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1渗漉提取工艺的正交试验设计 选用正交试验法，采用 L9(34)正交设计表，分别以干膏中阿魏酸的含量、转移率和干膏得率为指标，对乙醇浓度、乙醇用量、浸泡时间、流速4个因素进行考查，每个因素选取3水平。正交试验因素水平表见表 1。其中，阿魏酸的含量测定参考2005年版《中国药典》中当归药材对阿魏酸的含量测定方法进行；转移率(%)=浸膏中阿魏酸的含量(mg/g)×浸膏重量(g)/当归川芎中阿魏酸的总量(mg)×100%

2.2正交试验结果及方差分析 按处方比例，称取桃仁、当归、枳壳、川芎等药材共9份，每份625 g，分别按照L9(34)正交设计表进行试验，渗漉液分别浓缩得浸膏，测定阿魏酸的含量，并计算转移率，结果见表2。

用 SPSS软件对正交试验结果进行方差分析，得统计学结果，方差分析结果见表3和表4。

表1 渗漉提取工艺因素水平表

表2 正交设计方差及直观分析结果

表3 阿魏酸含量方差分析结果

表4 阿魏酸转移率方差分析结果

2.3结果分析 分别以阿魏酸含量和转移率为评价指标，直观分析结果表明，各因素作用主次为A>B>D>C，最佳工艺条件为A2B2C2D2。方差分析结果表明，因素A乙醇浓度对两个指标具有显著意义，应选取A2水平；其他三个因素即乙醇用量、浸泡时间、流速均无显著性意义。综合分析上述结果，确定最佳工艺条件为A2B2C2D2，即药材加入13倍量65%乙醇，静置浸泡24 h，以10 ml/min流速渗漉提取。

2.4最佳工艺验证实验 按处方比例称取药材3份，按优选工艺条件进行重复验证试验，结果表明正交试验优选的乙醇渗漉提取工艺条件较好，结果稳定可靠，见表5。

表5 验证试验结果

3 讨论

3.1试验结果表明，所选择的4个因素对乙醇渗漉提取有不同的影响，由方差分析可知，乙醇浓度对两个指标具有显著意义，而其他3个因素即乙醇用量、浸泡时间、流速均无显著性意义，因此试验中要严格控制乙醇浓度。

3.2川芎、当归在处方中属于臣药，均含有阿魏酸[2]，其性质稳定，毒性较低。据报道阿魏酸具有抑制血小板凝聚及血栓形成、抗肿瘤、免疫功能等作用[3，5]，故选定阿魏酸为含量测定标准。

1 齐守罡，吕吉元，张明升，等.阿魏酸对正常及缺血/再灌注损伤大鼠离体心脏功能的影响.中西医结合心脑血管病杂志，2008，6(5)：562-564

2 杨林，罗晓星，王四旺，等。正交设计提取当归川芎中阿魏酸的研究.云南中医学院学报，2007，30(2):14

3 周国兰.阿魏酸钠治疗不稳定型心绞痛50例疗效观察.内科，2010，5(3)：241

4 杨艳霞，赵浩如.阿魏酸磷脂复合物的理化性质及抗肿瘤活性研究.药学与临床研究，2009，17(4)：297

5 高向东，吴梧桐.当归及其成分阿魏酸对小鼠免疫功能的影响.中国生化药物杂志，1994，15(2)：107