补气药延缓衰老抗氧化机制的文献再评价

张恩户 张琪 胡锐

中医认为，元气、宗气、肾气等是维持机体生命活动的主要物质，气虚可导致机体的脏腑功能减退。补气药具有补五脏，安精神，长肌肉，耐寒暑，久服轻身延年之功效。现代研究表明，抗氧化剂能清除自由基而延缓衰老。为此，笔者以补气药为对象，通过文献查阅、归纳、整理，参考卫生部《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》，拟定了中药抗氧化作用的评定标准，对其延缓衰老之抗氧化机制进行文献再评价，以明确其作用的可靠性。

1 延缓衰老之抗氧化机制及其评价方法

衰老即生命周期中随时间进展而表现出功能不断恶化，直到死亡的过程。目前有很多关于衰老机制的学说[1]。其中，受到人们普遍关注的自由基学说认为，引起人类衰老的主要原因是：细胞在代谢过程中不断产生自由基(free radical，FR)。自由基是单独存在的、具有不配对电子的离子、原子、分子基团[2]。该物质具有两面性，适量自由基能介导正常细胞分化增殖，但当氧和体内某些物质发生化学反应，生成过多的氧自由基，则会引起生物膜的脂类过氧化，导致膜结构损伤和功能失活，出现衰老症状。自由基反应诱发脂质过氧化，生成过氧化脂质(LPO)，继而分解产生丙二醛(MDA)与脂褐素(LF)，存在于脑、心、肝、表皮组织中[3]。体内自由基生成量与年龄呈正相关，即脂质过氧化随年龄增加而增高，而清除自由基系统的功能则逐渐减弱。

为避免自由基产生过多，人体内存在着清除酶系，如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)等。SOD广泛存在于血液和组织中，能促使超氧阴离子自由基(O2·)变为过氧化氢(H2O2)和氧分子，进而被清除，使机体和细胞免受损害。GSH-Px主要分布在肝脏、胃肠、睾丸等组织，以肝中含量最高，是一种含硒的清除自由基并抑制自由基反应的酶系，可清除O2·，H2O2和羟自由基(·OH)。自由基清除酶随着机体衰老而减少，是衰老和生命活力降低的定量指标。

因此，以药物清除自由基、抗氧化是延缓衰老的重要途径之一，评价的实验方法是观察药物对老龄鼠、快速老化小鼠或D-半乳糖、臭氧(O3)、去胸腺等衰老动物模型的组织或血中的抗氧化酶如SOD、GSH-Px、CAT等和过氧化代谢产物如LPO、MDA、LF等的影响，评价其延缓衰老之抗氧化机制。

2 再评价方法

2.1 文献收集与整理

以新世纪全国高等中医院校规划教材《中药学》[4]记载的补气药(人参、黄芪、绞股蓝、红景天、沙棘、刺五加、白术、甘草、山药、太子参、大枣、党参)为对象，查阅1979～2009年间有关实验性研究文献，以中国学术期刊网络出版总库(www.cnki.net)数据库为主，其他数据库为辅进行检索、查阅。研读文献，摘录相关信息并归纳入《文献再评价信息表》，信息表内容包括供试药制备、给药途径与剂量、动物品系、实验方法、阳性药结果、实验结果与结论、作者及工作单位，刊物与发表年代等信息。

2.2 中药抗氧化机制的评定标准

参考《保健食品检验与评价技术规范》规定的抗氧化功能检验方法，以及中药药理作用研究应符合综合评价和重复性等原则，制订中药抗氧化机制的评定标准为：应选用老龄鼠、D-半乳糖模型、辐照模型等，测定血、脑、肝、心等组织(不少于2种)的上述抗自由基相关酶和老化代谢产物如SOD、GSH-Px、MDA、LF等指标中的3项以上(包括3项)；每种衰老模型及观察指标应由不同实验人员进行2次以上(包括2次)重复性实验，结果均有效。凡符合上述标准者，即可判定为具有抗氧化作用。

3 结果

验证补气药抗氧化作用，使用老龄鼠、D-半乳糖模型以及辐照、氢化可的松、氟哌啶醇、去卵巢等模型。相关文献统计结果见表1。文献以测定学和组织中SOD、GSH-Px等自由基相关酶及MDA、LF、LPO等过氧化代谢产物等手段来验证补气药的抗氧化作用。相关文献统计结果见表2～6。

表1 验证抗氧化作用使用了不同动物模型的文献篇数

表2 测定血和组织中SOD来验证抗氧化作用的文献篇数

表3 测定血和组织中GSH-Px来验证抗氧化作用的文献篇数

表4 测定血和组织中MDA来验证抗氧化作用的文献篇数

表5 测定血和组织中LF来验证抗氧化作用的文献篇数

表6 测定血和组织中LPO来验证抗氧化作用的文献篇数

4 小结

结果表明，人参、黄芪、绞股蓝、红景天抗氧化作用的研究文献均超过10篇[5-12]，各项指标测定次数较多，且结果有效，说明上述4味中药研究较为充分，抗氧化作用较为肯定；沙棘、刺五加文献数虽少，但也符合本文所定之标准，故认为其具有抗氧化作用[13,14]；白术、甘草、山药、太子参、大枣、党参文献资料较少，动物模型或实验指标不符合再评价标准[15-20]，尚需进一步研究，以证实其有无抗氧化作用。机体氧化是多因素综合作用的结果，机体中的血可以代表全身状态，脑为最早衰老的器官，肝则是最晚衰老的器官，在上述的实验研究中，对血的相关测定约占32%，主要组织中，脑组织的测定约占27%，肝组织的测定约占20%。

总体来看，各实验研究对自由基相关酶和老化代谢产物测定部位的选择是可行的，并且兼顾其它，有力地说明了药物对实验动物作用的整体效果。文献中所测定的各项指标也符合评价要求。不足在于有些文献选取指标过少，只凭借一、两种检测指标而得出结论，不够全面，缺乏重复性和氧化机制的深入研究；有些文献之间的实验结果存在不同之处，可能与动物模型标准不尽相同，药物剂量相差过多，无统一规范所致。故有必要规范中药抗氧化作用的评价方法，如实验方法、供试药制备、给药途径、重复次数等等。因此，本文归纳、整合了各文献的实验数据，明确具有抗氧化作用的药物均为：不同实验人员对3项以上(含)检测指标，进行2次以上(含)的重复实验，结果可靠。

从已有81篇文献来看，补气药抗氧化作用机理的研究还比较孤立和分散，缺乏系统的综合研究。在本文研究中，制定的抗氧化评定标准可行，可操作性强。此外，通过对既往实验的归纳、整理，本文发现了科研实验项目中的空白之处，对今后的实验选题具有指导意义。

随着人类生活水平的提高，人们对于如何延长生命更加关注。自1956年，Harman提出自由基学说以来，抗氧化已成为延缓衰老的一个重要部分。作为中医药工作者，利用现有资源，研究传统中药的药理作用，开发廉价、有效的抗氧化新药是研究的主要方向。中药品种繁多，单品成分复杂，复方组成多样，有着非常广泛的研究领域和深远的发展前景。运用现代科学技术，结合中医传统理论，挖掘中药新功用，在严格的实验检测标准下，进行中药抗氧化机制的研究，以期获得国际认可，使中药真正走向世界。

[1] 童坦君，张宗玉.医学老年学[M].2版.北京：人民卫生出版社，2006：1-11.

[2] 海春旭.自由基医学[M].西安：第四军医大学出版社，2006：1-3.

[3] 李仪奎，金若敏，王钦茂.中药药理实验方法学[M].2版.上海：上海科学技术出版社，2006：966-972.

[4] 高学敏.中药学[M].2版.北京：中国中医药出版社,2007：423-436.

[5] 程俊霖，周黎明，朱玲，等.人参茎叶总皂苷对衰老小鼠的作用研究[J].四川生理科学杂志，2004，36(3)：97-99.

[6] 王红丽，吴铁，吴志华，等.人参皂苷、丹参酮和川芎嗪抗小鼠皮肤衰老作用研究[J].第二军医大学学报，2006，27(5)：525-527.

[7] 陈琦，孙云，邓杨梅，等.毛花黄芪总甙对小鼠抗衰老作用的研究[J].实用老年医学，2001，15(4)：189-191.

[8] 雷红，王斌，李卫平，等.黄芪总提取物抗衰老作用的实验研究[J].中国临床药理学与治疗学，2000，5(4)：298-301.

[9] 王彩霞.灌胃绞股蓝提取液对自然衰老小鼠皮肤组织中SOD活性、MDA含量影响的实验研究[J].实用中医内科杂志，2008，22(12)：44-45.

[10] 蔡太生，张善锋，王明臣.绞股蓝对衰老大鼠的抗氧化作用[J].中国临床康复，2005，9(35)：106-107.

[11] 苗艳波，师海波，孙英莲，等.高山红景天总甙的抗衰老作用[J].中药药理与临床，2004，20(5)：20-21.

[12] 关骏良，吴钊华.西藏红景天提取物抗衰老作用的实验研究[J].中药材，2004，27(5)：365-367.

[13] 陈正爱，金香子.沙棘对阿尔茨海默病模型大鼠的影响[J].时珍国医国药，2009，20(12)：3145-3146.

[14] 杨平，孟宪军，梁睛睛.刺五加苷延缓衰老的机理[J].食品研究与开发，2009，30(8)：167-169.

[15] 马庆华，张鹏霞，郭红艳，等.白术多糖对D-半乳糖致衰大鼠神经细胞抗氧化作用研究[J].中国老年学杂志，2006，26(12)：1658-1660.

[16] 王超，包玉双，白大芳，等.甘草对老年大鼠SOD、LPO、MAO-B影响的实验研究[J].中国老年学杂志，1998，18(6)：371-372.

[17] 詹彤，陶靖，王淑如.水溶性山药多糖对小鼠的抗衰老作用[J].药学进展，1999，23(6)：356-360.

[18] 袁逸铭，高湘，许爱霞，等.太子参醇提物的抗脂质过氧化作用[J].中国临床药理学与治疗学，2005，10(1)：83-86.

[19] 周运峰，苗明三，李根林.大枣多糖抗氧化作用研究[J].中国中西医结合杂志，1997，17(基础理论研究特集)：197-198.

[20] 许爱霞，张振明，葛斌，等.党参多糖抗衰老作用机制的实验研究[J].中国现代应用药学杂志，2006，23(8)：729-731.