王一凡,柳 茵,刘维军,李 琳
(青海大学1.医学院,2.附属医院心血管内科,青海 西宁 810001)
雪莲是菊科凤毛菊属雪莲亚属的草本植物,有除寒壮阳、调经止血的功效。近年国内有资料[1-2]表明雪莲有抗脂质过氧化和抗炎作用,而血脂异常和动脉炎性反应是动脉粥样硬化形成的始动因素。本研究探讨雪莲对动脉粥样硬化大鼠血脂和C反应蛋白的影响。
1.1实验动物清洁级Wistar大鼠45只,♂,由甘肃中医学院动物中心提供,体质量220~250 g。
1.2主要试剂和仪器雪莲注射液(新疆制药厂,批号:091012),胆固醇、胆酸钠(安徽天启化工科技有限公司),丙基硫氧嘧啶(深圳市中联制药有限公司,批号:100129),维生素D3注射液(上海通用药业股份有限公司,批号:091215),CRP ELISA检测试剂盒(上海亚培科技有限公司),AU-2700全自动生化分析仪(日本奥林巴斯公司),低温离心机(德国Eppendorf公司)。
1.3动物分组和动脉粥样硬化模型的建立实验大鼠随机分成3组:对照组(N组)、动脉粥样硬化模型组(A组)、雪莲组(X组),每组15只。对照组正常喂基础饲料。模型组及雪莲组具体造模方法参照赵娟等[3]。对照组及模型组以等量生理盐水灌胃,雪莲组给予雪莲注射液0.8 ml·kg-1灌胃,连续30 d。
1.4标本处理大鼠灌药30 d后,用乌拉坦麻醉,腹主动脉取血,4℃ 3 000 r·min-1离心 10 min,取血清,-20℃保存,待测。取大鼠胸主动脉1 cm,10%中性甲醛溶液固定。
1.5血脂及C反应蛋白的测定采用全自动生化分析仪测定总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDL-C)浓度。采用ELISA测定C反应蛋白(CRP)浓度。
1.6统计学处理统计学处理用SPSS11.5统计软件进行统计,数据以±s表示,采用单因素方差分析。
2.1对血脂和CRP的影响对照组、雪莲组血清TC、TG、LDL-C水平低于模型组(P<0.05)。对照组、雪莲组HDL-C水平高于模型组(P<0.05),表明雪莲具有调节血脂作用。雪莲组与模型组相比,血清CRP下降(P<0.05),表明雪莲具有抗炎作用。见Tab 1。
2.2主动脉形态学变化各组大鼠胸主动脉经HE染色,显微镜观察发现,对照组内膜完整光滑无损伤,中膜平滑肌细胞排列整齐,少见单核细胞、巨噬细胞黏附和浸润。模型组主动脉管壁内皮细胞明显水肿、脱落,中膜平滑肌细胞排列紊乱,内膜-中膜厚度与对照组比较明显增加,可见大量单核细胞、巨噬细胞聚集。雪莲组主动脉管壁内皮细胞轻度水肿、脱落,内膜-中膜厚度与对照组比较轻度增加,可见少量单核细胞、巨噬细胞聚集,但较模型组动脉内膜病理改变程度明显减轻。说明雪莲对动脉粥样硬化的形成有一定的抑制作用。
Tab 1 Comparsion of blood fat degree and CRP in experimental groups(±s,n=15)
Tab 1 Comparsion of blood fat degree and CRP in experimental groups(±s,n=15)
*P<0.05 vs group N;*△P<0.05 vs group A;N:Control group;A:Atherosclerosis model group;X:Xuelian group
Group TC/mmol·L-1 TG/mmol·L -1 LDL-C/mmol·L -1 HDL-C/mmol·L-1 CRP/mg·L -1 N 1.70 ±0.20 0.42 ±0.10 0.26 ±0.17 0.77 ±0.18 0.88 ±0.44 A 9.00 ±1.90* 1.71 ±0.48* 5.46 ±1.45* 0.28 ±0.22* 2.97 ±0.61*X 4.01 ±1.00*△ 0.87 ±0.17*△ 2.43 ±1.16*△ 0.53 ±0.23*△ 1.78 ±0.55*△
模型组大鼠主动脉病理学结果示内皮细胞明显水肿,中膜平滑肌细胞排列紊乱,可见大量炎性细胞聚集,内膜-中膜厚度明显增加,表明动脉粥样硬化模型复制成功。本实验结果显示雪莲组大鼠血清TC、TG、LDL-C和CRP水平明显低于模型组,说明雪莲具有调节血脂和抗动脉粥样硬化作用。雪莲化学成分中黄酮类化合物是抗氧化和抗炎作用的主要物质基础[2,4],其抗动脉粥样硬化的有效成分可能与黄酮类化合物有关。
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