张 知,黄昌艳,张裕芳,钟 春,朱春梅
(江西省赣州市立医院检验科,江西 赣州 341000)
由于人绒毛膜促性腺激素(HCG)浓度的变化幅度很大,对其定量检测经常需要进行稀释[1]。稀释定量的通常做法是先测定一次,然后根据第一次的情况确定稀释倍数再测定第二次,有时甚至要调整稀释倍数测定第三次。为简化操作,降低成本,一年来,赣州市立医院检验科尝试着对血HCG定量检测先做定性检测、再确定稀释倍数,发现是可行的,基本上能一次稀释、定量检测到位。现报告如下。
1.1 标本来源 2011年5月25日至2011年5月17日期间来本院就诊或住院病人240例门诊或住院患者。
1.2 仪器与试剂 HCG定性检测试剂条 (常规检测尿HCG试条)。SIEMENS公司出产的ADVIA Centaur CP全自动化学发光免疫分析仪,具有自动稀释及换算功能。SIEMENS公司出产的ADVIA Centaur HCG检测试剂、辅助试剂、校准品、质控品及其他配套使用耗材等。
1.2 方法
1.2.1 将血样离心分离后,先吸出仪器检测用所需的血清300μl至专用样品管。
1.2.2 将定性检测试剂条插入剩余血清中,5~10s后取出,平放5min左右。
1.2.3 判读定性检测结果,仅对照线显色为阴性,检测线也显色、但比对照线更淡为弱阳性,两处显色基本接近为阳性,检测线颜色比对照线明显更深为强阳性。
1.2.4 根据定性检测结果确定定量检测的稀释倍数(见表1)。
表1 定性检测结果稀释倍数参考
1.2.5 将先前已加入300μl血清的样品管放入化学发光仪,在仪器操作系统中选择点击自动稀释倍数,进行定量检测。
根据表2可知,在这240例中,只有2例强阳性者稀释200倍未能出结果,于是进行了第二次稀释、即2000倍。一次稀释、定量检测到位的238例,比率为99.2%,其中:未稀释的检测结果最低为0 mIU/ml、最高为 679.9mIU/ml; 10 倍、100 倍、200 倍稀释的检测结果范围分别为97.6~2759.9mIU/ml、844.0~82857.4mIU/ml、11888.3~215755.1mIU/ml。
表2 240例HCG稀释定量检测各稀释倍数的检测例数统计表
HCG是由胎盘绒毛膜滋养层细胞合成、分泌的激素,其检测主要是用于早期妊娠的诊断,也常用于妊娠相关疾病、肿瘤等的诊断及鉴别诊断[2,3]。因血中HCG变化较快,能及时反映绒毛的分泌活动,加之检测方法也从酶标免疫法、放射免疫法发展到了现在的荧光免疫法、化学发光法,检测的速度和准确性都大为提高,故血HCG检测正日益受到临床医生和患者的青睐。
SIEMENS公司的ADVIA Centaur HCG检测的检出范围为2.0~1000mIU/ml,其自动稀释倍数有5、10、100、200 四个。 因此,10、100、200 倍稀释的检出范围分别为 20~1 万、200~10 万、400~20 万 mIU/mL;可以进一步看到的是,结果在400~1万mIU/mL的样本,无论稀释10、100、200倍,都能一次检出,依此类推……所以,对判读定性检测结果并不要求很精确。先定性然后一次稀释、定量到位,这是可行的,而且是简易的。
[1]方春元,张建祥.胶体金试纸定性检测与血β-HCG定量检测的相关性[J].实验与检验医学,2011,29(1):79.
[2]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版,南京:东南大学出版社,2006:300-301.
[3] 李筱莉,陈 燕,叶 倩,等.血清总β-HCG在妊娠滋养细胞疾病诊治中的临床应用价值[J].实验与检验医学,2010,28(6):641-642.