口腔唾液幽门螺杆菌测试板的临床筛查价值研究

张 晶，徐樨巍，丁召路，于飞鸿，王国丽

（首都医科大学附属北京儿童医院消化内科，北京 100045）

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）已被证实与儿童一些常见疾病均有密切关系，可引起消化系统疾病如消化性溃疡、胃炎等［1，2］，甚至是成人的胃癌［3］;还与消化系统外疾病，如缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜、生长发育迟缓等密切相关［4］。有报道中国人群感染率为40%～90%，平均59%;而且目前中国儿童感染率为25%～50%，并以平均每年0.5%～1%的速度递增［5］。因此，找到一种使用简便、价格适宜的检测Hp感染的方法对防治Hp感染有很大的社会价值。本研究使用唾液幽门螺杆菌（Helicobacter pylori in Saliva，HpS）测试板技术［6］测定了150例有消化道症状的儿童，并同时与胃镜活检组织快速尿素酶试验（rapid urease test，RUT）检测结果进行比较。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2010年7月至2011年2月底我院消化科门诊及病房因有消化道症状行胃镜检查的患儿150例为对象，其中男性82例，女性68例;年龄4～16岁，平均9.87岁。十二指肠溃疡8例，胃溃疡1例;十二指肠（球）炎56例，下端食道炎52例（其中食道-胃-十二指肠炎12例）;贲门失弛缓2例，慢性胃窦炎（颗粒样改变）13例，慢性浅表性胃炎18例。所有患者同时进行胃镜下RUT和HpS检测。

1.2 HpS检测方法 使用美国美利泰格公司生产的HpS抗原测试板，严格按说明书方法操作:告知患儿准备唾液1～2 mL备检;将唾液吐入塑料杯中;用吸管吸取4滴唾液，滴入取样杯中;滴加2滴缓冲液于取样杯中;更换吸管，充分混匀后，吸取3～4滴混合液滴入唾液板的吸样窗口，5～15 min观察结果。结果判定:指示窗口显示T和C线，说明Hp阳性;只显示C线，说明Hp阴性。（注意:测定前1 h内患儿不能进食水）。

1.3 胃镜下胃窦黏膜活检RUT检测方法 使用福建三强生物化工有限公司生产的胃幽门螺杆菌快速尿素酶诊断试剂盒（pH指示剂法）进行检测，严格按照操作说明书进行常规操作及结果判定。观察5 min颜色变粉色视为阳性。

1.4 统计学方法 应用统计软件SPSS 13.0进行数据处理，胃与口腔Hp感染检测结果的一致性采用Kappa分析。

2 结果

150 例患消化道症状的患儿，HpS检出的阳性率为43.33%（65/150），RUT 检测的阳性率为 27.33%（41/150），而且RUT检测阳性的患儿，85%HpS检测也为阳性，提示胃Hp感染者口腔存在高Hp检出现象。150例患儿中HpS检出阳性65例，胃镜RUT检出阳性41例，阳性符合率（敏感度）为85.37%，阴性符合率（特异度）为72.48%，阳性预测值为53.85%，阴性预测值为92.94%（表1）。对两种检测方法所得出的结果进行Kappa分析（Kappa=0.489，P＜0.01），提示两种方法有很好的一致性。

表1 HpS检测与胃镜RUT检测结果比较

3 讨论

目前诊断Hp感染的方法很多，主要分为侵入性检查和非侵入性检查两大类。前者包括细菌培养、组织学检查、RUT等均需在电子胃镜进行侵入性胃黏膜活检基础上进行;后者主要包括血清学方法、同位素标记的13C或14C呼气试验、粪便抗原及分子生物学（如PCR）检测等。由于侵入性检查存在实验技术要求高、仪器价格昂贵、检测时间长、结果易受取材部位影响及受试者耐受性查等限制，同时还可能存在交叉感染问题，近年来，非侵入性检查成为人们研究的热点。近年研究发现［7］，胃Hp阳性儿童，其中68%可在牙斑检测到Hp，且经PCR测定两者为同一菌株;而胃Hp阴性儿童，24%牙斑有Hp存在，因此作者认为口腔有Hp寄生者，大多数同时患有胃Hp感染。少数人，口腔有Hp，但胃里没有Hp寄生，患者处于疾病的早期，感染仅停留在口腔之中，随着唾液，Hp迟早会流到胃里;另有研究者用PCR技术及ELISA也证实唾液中存在高 Hp 检出率（46.1%～87.5%）［8，9］，提示口腔是Hp除胃以外的另一重要的集聚点。有学者进一步研究发现，在我国Hp有明显的家庭聚集现象［10］:对结婚平均6.5年的150对夫妻研究发现一方Hp（+）者，配偶另一方Hp（+）为78.94%;而一方Hp（－）者其配偶Hp阳性率为20%。另一学者研究发现［11］父母双方都感染Hp，儿童感染的机会是44%;父母一方感染Hp，儿童感染的机会是30%;父母都未感染Hp，儿童感染的机会是21%，提示Hp传染的重要途径可能为口-口方式。因此，口腔唾液中Hp快速、简便的检测对人群中Hp感染的防治均有很重要的意义。2006年美国学者叶国钦研制出HpS检测板并获得专利［6］。其工作原理是利用胶体金标记Hp释放的尿素酶，当结合物移动至固定的抗体区域时，与该处的抗体发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，通过可目测的胶体金标志物得到直观的显示结果，游离标志物则越过检测带，移动至对照带结合，显示对照线。该方法特异、敏感、简便、快速，一般可在5～15 min内出结果，且不需要特殊设备。本研究用HpS测试板检测150例患消化道症状的患儿，阳性检出率为43.33%（65/150），与上述有关报道一致。与RUT方法比较，阳性符合率（敏感度）为85.37%，Kappa分析提示两者有很好的一致性;阳性预测值为 53.85%，阴性预测值为92.94%，提示HpS测试板是一种很好的临床筛查工具。此外，本组有消化系统症状的患儿HpS阳性率（43.33%）较 RUT 阳性率（27.33%）高，其中原因有待进一步探讨。但RUT阳性患儿大部分HpS检测均呈阳性，支持胃Hp感染者唾液中存在高Hp检出现象。根据本研究唾液Hp检出率高于胃Hp检出率现象，推测可能一部分患儿Hp感染尚停留在口中，而未达到胃内定植;以后，随着时间的推移，口腔内Hp随唾液下行至胃并定植引起胃炎或消化性溃疡。此观念有待进一步将本试验组仅HpS阳性而RUT目前阴性的患儿动态监测其胃Hp是否随着时间的推移越来越多转为阳性来进一步得以证实。将口腔Hp菌在胃定植之前即清除将会在很大程度上降低胃病的发生概率，这对降低我国儿童Hp高感染率有重要意义。目前研究还发现口腔Hp感染与复发性口腔溃疡、牙周炎等疾病有关，与龋病、口臭、口腔癌等疾病关系尚在研究中［12］。而且随着胃Hp感染治疗失败研究的深入，发现口腔Hp存在可能是Hp根除失败的原因之一，口腔Hp感染还可能是Hp复发和再感染的重要原因［13］，提醒医生要提高Hp根治率、减少复发率，在进行胃Hp感染治疗的同时还要诊治口腔Hp感染。在此方面还有待临床工作者进行大量相关研究来验证。

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