口蹄疫疫苗免疫效果跟踪试验报告

田召芳，张文娟，陈 蕾，李春蕾

（烟台市动物疫病预防与控制中心，山东 烟台 264003）

为检验山东省疫苗中标企业的疫苗质量，省动物疫病预防与控制中心联合11个地市的动物疫控中心开展中标企业疫苗免疫跟踪试验，我中心负责中农威特生物科技有限公司的猪O型口蹄疫灭活苗与O型-亚Ⅰ型口蹄疫二价灭活苗，现将结果报告如下。

1 材料

1.1 实验对象 选择管理相对规范的牟平区两个猪场（沙子猪场与新和猪场）的35日龄健康仔猪各20头；两个奶牛场（亿达奶牛场与长生奶牛场）的2～5岁健康后备牛各20头。

1.2 疫苗 中农威特生物科技有限公司生产的猪O型口蹄疫灭活苗（批次为1005043J）与口蹄疫O型-亚Ⅰ型二价灭活苗（批次为1001005J）。

1.3 试剂 O型口蹄疫液相阻断ELISA试剂盒（批号为2010051001），兰州兽医研究所生产；亚Ⅰ型口蹄疫液相阻断ELISA试剂盒（批号为 2010100802），兰州兽医研究所生产。

1.4 仪器 酶标仪（RT-6000），恒温水浴锅（PYX—DHS），微量单道、多道加样器（芬兰雷勃）。

2 方法

2.1 免疫及采血 所有试验场均在免疫前一天采血一次，免疫后21 d、36 d、51 d分别采血。

2.2 抗体监测 供试动物静脉采血，用1.5mL样品管采血0.5～1mL，10min左右，析出血清，按照试剂盒的说明书操作并判定结果。

3 结果

3.1 猪O型口蹄疫抗体监测结果（表1）

表1 猪O型口蹄疫抗体监测结果

沙子猪场仔猪的母源抗体水平比较高，平均值为5.5 log2，注射O型口蹄疫灭活苗后21 d检测抗体水平没有升高反而稍微下降，平均值均为5.4 log2，免疫后36 d、51 d抗体水平下降更多，平均值分别为3.7 log2、3.4 log2。

新和猪场仔猪的母源抗体水平相对较低，平均值为3.3 log2，注射口蹄疫灭活苗后21 d抗体水平略有上升，平均值为3.75 log2，免疫后36 d、51 d抗体水平持续上升且幅度较大，平均值分别为7.75log2、8.25log2。

3.2 牛O型口蹄疫抗体监测结果（表2）

表2 牛O型口蹄疫抗体监测结果

亿达奶牛场奶牛免疫前的抗体平均水平为5.3 log2，注射疫苗后21 d抗体水平明显上升，平均值为8.7 log2，免疫后36 d平均抗体水平上升到9.55 log2，免疫后51 d抗体水平降到8.7 log2，但仍在免疫抗体保护线以上。

长生奶牛场奶牛免疫前的抗体水平比较高，平均为7.85 log2，注射疫苗后21 d、36 d、51 d检测到的抗体水平变化趋势为先下降，后略上升，后继续下降，其平均为分别为 6.3 log2、6.7 log2、6 log2。

3.3 牛亚Ⅰ型口蹄疫抗体监测结果（表3）

表3 牛亚I型口蹄疫抗体监测结果

亿达奶牛场奶牛免疫前的抗体平均水为5.65 log2，注射疫苗后21 d、36 d抗体水平明显上升，平均值分别达到7.65 log2、9.25 log2，免疫后51 d抗体水平有所下降，平均值为8.2 log2。

长生奶牛场奶牛免疫前的抗体水平比较高，平均值达到6.35 log2，注射疫苗21 d、36 d后抗体水平先下降后略有上升，但均低于免疫前抗体水平，平均值分别为6.05 log2、6.25 log，免疫后51 d抗体水平下降幅度比较大，平均值为3.05 log2，低于抗体保护线。

4 分析与讨论

4.1 本次试验一个疫苗批次免疫两个畜场，但是由于客观条件限制，4个试验场中只有2个试验场的基础免疫抗体符合实验要求，正好为一个猪场、一个牛场，这两个场的检测结果显示试验动物抗体水平出现明显的上升趋势，说明中农威特生物科技有限公司生产的猪O型口蹄疫灭活苗（批次为1005043J）与口蹄疫O型-亚Ⅰ型二价灭活苗（批次为1001005J）质量良好。

4.2 试验动物基础免疫抗体水平高会影响疫苗免疫效果，抗体水平或者降低后缓慢回升，或者缓慢持续性降低，因此建议疫苗免疫时间要选择抗体水平相对较低的时候。

4.3 本次试验结果表明，注射口蹄疫O型-亚Ⅰ型二价灭活苗后，O型口蹄疫抗体水平明显高于亚Ⅰ型口蹄疫。

4.4 试验的局限性

柯飞[1]等用不同剂量的口蹄疫Asia I-O二价灭活疫苗免疫牛发现，加大剂量免疫效果更好；占松鹤[2]等用高效灭活苗免疫猪发现，加强免疫能够有效增强免疫力和延长疫苗免疫期。本试验因条件限制未能进行不同剂量与加强免疫对免疫效果影响的研究，在下一年的疫苗跟踪试验中应该考虑到这两个因素，以便更好的指导当地的口蹄疫防疫工作。另外，两篇文献中都提到了免疫应激的问题，这也是值得关注的，对今后的疫苗跟踪试验有很好的指导意义。

[1]柯飞，比力克孜，杨齐.口蹄疫Asia I-O二价灭活疫苗不同剂量注射牛免疫效果的探索 [J].中国动物检疫，2010,27（4）:56-57.

[2]占松鹤，朱良强，刘华，等.猪O型口蹄疫合成肽疫苗及猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫效果对比试验 [J].中国动物检疫，2008,25（10）:22-24.