广州亚运无马疫区病媒动物调查

彭 涛 ，彭 聪 ，沈 丹 ，梁卓粤 ，彭南秀 ，胡永辉 ，张海明 ，张海冰 ，朱光剑 ，原丽红 ，陈金平

（1.广东省昆虫研究所，广东 广州 510260；2.广州市动物卫生监督所，广东 广州 510260）

动物源性疫病感染赛马经常被报道，除了家禽、家畜外，主要还有蝙蝠、啮齿类、鸟类和野猪等动物携带的疫病可以感染赛马。2010年第16届广州亚运会的马术比赛在广州从化市举行。因此，为确保进驻从化赛马场的赛马健康，调查对马属动物健康具有潜在威胁的疫源疫病对这一次马术比赛顺利进行有着重要的意义。本次调查主要针对与马属动物有共患疫病的动物，包括鸟类、蝙蝠和野猪。一方面调查他们的季节分布情况，另一方面检测他们对马疫病原的携带情况。

1 材料与方法

1.1 调查采样点的选择

设置核心区和缓冲区调查 核心区:广州亚运马术比赛场（位于从化市良口镇热水村）为中心周围半径五千米的区域；缓冲区:广州市白云区、萝岗区、花都区、增城市，以及清远市清城区、佛冈县，韶关市新丰县和惠州市龙门县等8个与从化市相邻的县级行政区域。

1.2 调查时间

在核心区，按照春、夏、秋、冬不同的季节进行调查，在不同的季节进行4次调查。在缓冲区，在2009年9月份和2010年1月份进行大面积调查取样。

1.3 采集方法

根据不同的区域类型，如林区、农田灌溉区、城市区和河口水域区，选择样地调查。具体采集方法根据采集动物的不同生活习性进行设计。

1.4 病毒样品的分离与检测

采样内容包括取动物的咽拭子和肛拭子，每只动物每种标本各取2份进行病原检测，取静脉血制备血清检测病毒抗体。用RT-PCR，荧光定量PCR和抗体ELISA方法检测病毒，阳性对照采用相应病毒片断质粒[1-7]。见表1和表2。

2 结果

2.1 鸟类与兽类的采样情況

本次调查采样于2009年1月至2010年1月进行，考虑到调查对象的活动都呈现出季节性变化的规律，在不同时期分别进行采样，具体采样时间为:2009年2月15日至2009年2月25日、2009年4月25日至2009年5月5日、2009年7月23至2009年7月28日、2009年8月25日至2009年9月5日、2009年11月6日至2009年11月12日，2010年1月9日至2010年1月26日。6次采样共收集到蝙蝠样品365份（隶属于14个种，其中果蝠一种，食虫蝙蝠13种）；鸟类样品358份，60种（隶属13目，21科）；野猪1种16头。

2.2 病毒检查

对采集的动物咽拭子和肛拭子进行病毒检查和分析，通过RT-PCR和荧光定量PCR方法对所有样本进行病毒检查，没有检查到对赛马健康具有潜在威胁的病原体。同样，通过抗体ELISA的方法对血清样品病毒检测，也没有检测到阳性结果。

3 讨论

3.1 调查分析

近几年，在世界各国发生了规模不等、强度不一的多起马病疫情，给各国的养马业和赛马的发展带了一定的威胁，如马接触传染子宫炎（美国）、马流感（印度、埃及、日本、澳大利亚、中国、蒙古）、马鼻疽（巴西）、马梨形虫病（美国）、马传染性贫血（法国、德国）、西尼罗病毒病（意大利、奥地利、法国、阿拉伯联合酋长国）、马病毒性动脉炎（以色列、克罗地亚）[1-7]、非洲马瘟（埃塞俄比亚）、马鼻肺炎（以色列）、水泡性口炎（美国）等[8-9]。这些病原导致的疾病给马属动物造成巨大的损失。这些病原大都是通过其他动物作为媒介进行传播，如鸟类、蝙蝠和野猪等。因此，调查对马属动物有潜在威胁的动物携带病原的情况，对马术比赛的顺利进行有很大的帮助。

表1 病毒检测信息

表2 引物信息

广东省昆虫研究所2004—2007年对从化境内的兽类和鸟类曾进行过调查，当时共调查到兽类38种，分属7目18科。其中大部分为啮齿类动物，有17种，几乎占全部种类的50%；蝙蝠4种，分别为犬蝠（Cynopterus sphinx）、 中 华 菊 头 蝠（Rhinolophus sinicus）、灰伏翼 （Hypsugo pulveratus）和东亚伏翼（Pipistrellus abramus）；鸟类164种。而本次在该区域共调查到蝙蝠14种，发现了12个新记录，为以后从化的蝙蝠调查提供了有力的证据，同时也说明本次蝙蝠调查的方法是可行的。本次捕获鸟类47种，占以往调查种类的29%，均为当地常见种类。对于野猪的调查采取捕捉和访问结合，在赛马场周围的山上都有发现野猪的踪迹，根据周边的猎户介绍，他们每隔4～5天能够捉到一头，我们捕到16头用于病毒检测。此次调查取样种类和数量基本能代表本地区动物的基本情况。

3.2 病毒检测分析

我们对赛马有潜在病原影响的鸟类和兽类进行系统的调查，且针对马属动物易携带的病毒种类进行研究。在不同的季节调查所得动物样本中没有发现对赛马产生危害的病原菌。对野猪样品主要检测了日本脑炎、伊氏锥虫病、水泡性口炎和尼帕病毒；对蝙蝠样品主要检测了尼帕和亨德拉病毒；对鸟类样品则主要检测了日本脑炎和西尼罗河热等不同马属易感病原体。这为广州亚运会马术比赛提供了技术支持。

我们调查检测了从化马场周边的动物可能携带对赛马健康有威胁的6种马属动物疫病携带情况，虽然所检测结果都是阴性，但是我们同样要做好防护工作。该区域对赛马健康具有潜在威胁的动物主要是蝙蝠、鸟类和野猪，根据不同动物可以做好不同的防护工作。蝙蝠不会主动攻击赛马，但是赛马有可能会吃到食果蝙蝠吃剩的果子导致病毒感染。蝙蝠都是在傍晚活动，对光照比较敏感，因此我们可以用加强灯光照明的方法驱赶蝙蝠。赛马场周边鸟类较多，尤其是小型鸟类，活动高峰期主要在凌晨和傍晚，可以采用声音驱赶的方法。对于野猪防治，赛马场可以进行围栏防止其进入伤害马匹。

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