云南省部分地区马属动物感染弓形虫血清学调查

张誉方，段博芳，关少君，杨建发，邹丰才，董国栋，翟国莲

(1.云南农业大学动物医学院，云南昆明 650201；2.云南省动物疫病预防控制中心，云南昆明 650201；3.临沧市永德县畜牧兽医局，云南临沧 677600)

云南地区以文山马、乌蒙马、云南矮马、大理马等6种马为固有品种[1]，2009年云南驴被列为云南省畜禽遗传资源保护名录[2]。云南省马属动物存栏60万匹，其中马存栏23万匹，骡存栏17万匹，驴存栏19万匹，弓形虫对马属动物发育、繁衍造成危害[3],对云南地区马属动物养殖造成一定的经济损失，并威胁着人类健康。 刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)属于顶复门原虫，可感染人类，其终末宿主是猫和猫科动物，主要通过猫的粪便等排泄物进行传播[4]。人和动物主要通过食入含有弓形虫包囊的食物或被弓形虫卵囊污染的水源、食物而感染[5]。感染后可出现流产、死胎等症状。由于弓形虫可穿过血脑屏障进入中枢神经系统[6]，症状严重时常表现出脑积水、脑炎和不同程度的神经症状[7]。

弓形虫感染马属动物多为隐性感染，许多国家和地区已有报道[8-11]。国内对于弓形虫病的相关报道多以猫和猪，云南地区已有猪和鸟类感染弓形虫病的报道，但以马属动物为宿主的弓形虫病尚无报道。本调查通过对云南省部分地区马属动物感染弓形虫进行血清流行病学分析，以期为云南省马属动物弓形虫的防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品的采集 2020年5月～11月，采集血液样品，经分离血清处理后分装，获得云南省969份马属动物血清样品，带回实验室后置于4℃冰箱保存待检(表1)。

表1 血清样品信息表

1.1.2 试剂 弓形虫抗体酶联免疫分析试剂盒(批号m 1203346)，上海酶联生物科技有限公司产品。

1.2 方法

1.2.1 夹心ELISA检测抗体及结果判定 按照试剂盒说明书进行操作。试验有效性：阳性对照孔平均值>1.00，阴性对照平均值<0.20；临界值=阴性对照孔平均值+0.15；若样品OD值<临界值，则判定为阴性；若样品OD值≥临界值，则判定为阳性。

1.2.2 数据统计与分析 用统计学软件SPSS20.0进行分析，用χ2检验，若P>0.05，则差异不显著，若P<0.05，则差异显著，若P<0.01，则差异极显著。

2 结果

2.1 弓形虫血清抗体总阳性率

969份样品中79份血清抗体阳性，总阳性率为8.15% (79/969)。不同地区和不同种类马属动物血清抗体阳性率不同。

2.2 不同地区和不同种类马属动物弓形虫抗体

保山地区和德宏地区阳性率均为10.67% ，红河地区弓形虫抗体阳性率为2.63%，不同地区马属动物血清样本弓形虫阳性率差异不显著(P>0.05)(表2)。骡的血清抗体阳性率为11.72%，驴阳性率为8.92%，马弓形虫血清抗体阳性率为3.03%。不同种类的马属动物弓形虫的阳性率差异显著(P<0.01)(表3)。

表2 不同地区马属动物弓形虫感染情况

表3 不同种类马属动物弓形虫感染情况

3 讨论

云南马属动物弓形虫血清抗体阳性率与新疆和青海地区相比较高，而低于吉林、辽宁和内蒙古地区。不同地区间的阳性率不同可能与当地的地理环境、气候和马属动物的养殖方式、种类以及对弓形虫的检测方法有关。云南省相较于新疆和青海地区，差别主要为亚热带季风气候，降水较为丰富，这些因素可能有利于弓形虫卵囊在环境中存活。此外，云南省的马属动物主要以散养户为主，多样的饲养环境所带来的风险或许是其感染率较西北地区更高的原因之一。

试验结果显示，8个地区中，保山和德宏的马属动物弓形虫感染率最高，红河的马属动物弓形虫感染率最低。其原因可能是因为保山和德宏位于云南省西南部地区，山地地形较多，降水更为丰富，具有较高的气温和湿度，有利于弓形虫卵囊在环境中存活；其次，保山和德宏相比红河海拔更高，高海拔地区居民以放牧为主，环境中野生猫科动物相对较多，作为弓形虫的终末宿主，这也会增大马属动物感染弓形虫的风险。

本研究中不同种类马属动物血清样本弓形虫阳性率差异极显著(P<0.01)、骡弓形虫阳性率显著高于马和驴；不同地区的马属动物血清样本弓形虫阳性率差异不显著(P>0.05)，表明品种是影响马属动物弓形虫感染的重要因素。可能是不同种类的马属动物对于弓形虫的易感性不同。骡的阳性率较高，可能是作为马和驴的种间杂种，其自身基因上对于弓形虫的易感性较强；也与骡的养殖方式和重视程度的不同有关。家猫的粪便混在骡的饲料中被其误食也会增大骡感染弓形虫病的风险。

此次对云南部分地区马属动物血清通过ELISA方法调查发现，弓形虫病抗体总阳性率为8.15%(79/969)，8个地区的马属动物普遍存在弓形虫的感染与流行。其中不同种类马属动物弓形虫感染率差异极显著，骡弓形虫阳性率明显高于马和驴；而各个地区均存在弓形虫的感染也说明弓形虫对生存环境具有高度可塑性。

弓形虫作为专性细胞内寄生原虫，其危害严重且分布广泛，目前尚无理想的防治药物[12]。在养殖业和旅游业中，人与马属动物的直接接触会增大弓形虫的感染风险[13]。因此，不仅要在马属动物中加强防控，保障云南地区马属动物养殖业长期稳定发展，更要在人群中采取有效措施防范弓形虫病的发生和流行，从而保障人类健康，有效维护公共卫生安全。