复方醋酸地塞米松乳膏含量测定方法的改进

黄 波，姜武民，吉祥波

复方醋酸地塞米松乳膏为肾上腺皮质激素药，是临床常用皮肤科外用制剂，临床用于皮炎、慢性湿疹、银屑病、脱发及白癜风等的治疗［1-2］，收载于《中国药典》2010版二部，其醋酸地塞米松含量测定方法采用的是HPLC内标法，需要内标物质甲睾酮［3-4］，且供试品溶液制备操作繁琐、费时。为简化操作步骤、更有效地控制产品质量，笔者对药典规定方法进行了改进，改进后的外标方法简便、快速、专属性强，适合大批量样品处理。

1 仪器与试剂

岛津LC-20AT高效液相色谱仪;色谱柱:Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm，5 μm)，电子分析天平，恒温水浴锅等。醋酸地塞米松对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号:100122-200805)，甲睾酮对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号:0172-9702)，复方醋酸地塞米松乳膏(湖北恒安药业有限公司提供，批号:100605、100807-100816)，甲醇为色谱纯，其他试剂均为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备 精密称定醋酸地塞米松对照品12.89 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2 供试品溶液的制备 取醋酸地塞米松乳膏约1.8 g(约相当于醋酸地塞米松1.35 mg)，精密称定，置50 mL量瓶中，加甲醇适量，在80℃水浴中，加热使醋酸地塞米松溶解，冷至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，置冰浴中冷却2 h以上，取出后迅速滤过，取续滤液即得。

2.3 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm ×250 mm，5 μm);以甲醇-水(70∶30)为流动相;检测波长为240 nm;流速:1.0 mL/min。理论板数按醋酸地塞米松峰计算应不低于2 000，醋酸地塞米松峰与相邻杂质峰的分离度应大于1.5。进样体积为20 μL。其对照品、供试品的色谱图分别见图1和图2。

图1 对照品色谱图

图2 供试品色谱图

2.4 线性关系考察 精密称定醋酸地塞米松对照品12.89 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为标准储备液。分别精密量取0.2、0.5、0.8、1.0、1.2 和 1.5 mL 标准储备液，置10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。分别取上述溶液20 μL，注入液相色谱仪，记录液相色谱图，以质量浓度(μg/mL)为横坐标(X)、峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归，得回归方程:Y=41 640 364.3 X+15 051.9，r=0.999 9(n=6)，表明醋酸地塞米松在5.16～38.67 μg/mL之间线性关系良好［5］。

2.5 精密度实验 精密吸取“2.1”项下对照品溶液20 μL，连续进样6次，测定结果醋酸地塞米松平均峰面积为1 077 794.75，其RSD为0.18%。

2.6 稳定性实验 精密称定100605批号的样品，照“2.2”项下方法制备供试品溶液，分别在0、2、4、8、12 h进样，测定醋酸地塞米松的平均峰面积为1 121 888.51，RSD为0.23%，表明供试品溶液在12 h 内稳定［6］。

2.7 重复性实验 精密称定同一批号(100605)样品6份，照“2.2”项下方法制备供试品溶液，按上述液相条件测定。结果醋酸地塞米松平均含量为101.55%，其RSD为0.24%(n=6)。

2.8 加样回收率实验［7］精密称定100605批号的样品6份，分别精密加入醋酸地塞米松对照品溶液5 mL(C=0.257 8 mg/mL)，照“2.2”项下供试品溶液制备方法制备及上述色谱条件测定，计算加样回收率，结果见表1。

表1 加样回收率实验结果

2.9 样品含量测定 分别取10个批号的样品，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，按外标法测定;另取同批号样品，按《中国药典》2010版二部方法制备供试品溶液，取甲睾酮加甲醇溶解制备内标溶液，另依法制备对照品溶液［3-4］，精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，按内标法测定。两种方法测定结果见表2。

表2 醋酸地塞米松两种方法测定结果(%，n=6)

3 讨论

有研究者曾随机选取药典中8个内标法测定样品含量，结果发现，内标法均不能提高分析精度［8］。《中国药典》2010版二部和2005版二部收载的复方醋酸地塞米松乳膏含量测定方法均为HPLC内标法，需要内标物质甲睾酮，且供试品溶液制备操作繁琐、费时。笔者在实践过程中摸索了醋酸地塞米松含量测定的外标方法，无需内标物质，其供试品制备也较为简便，通过对改进方法的方法学验证，发现改进后的外标方法可以替代中国药典规定的内标法用于复方醋酸地塞米松乳膏的质量控制。

［1］ 黄巧玲，王维，谢爱丽.高效液相色谱法测定复方醋酸地塞米松搽剂中醋酸地塞米松的含量［J］.医药导报，2008，27(7):848-849.

［2］ 姜辉，徐兴亚.醋酸地塞米松搽剂质量控制及疗效观察［J］.实用药物与临床，2010，13(1):36-38.

［3］ 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典.二部［S］.北京:化学工业出版社，2005:593.

［4］ 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典.二部［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:426.

［5］ 王震红，杨永刚.碳酸利多卡因注射液含量测定方法的改进［J］.中国药品标准，2010，11(1):42-43.

［6］ 顾伟鹰，张和平，黄伟芬，等.复方醋酸地塞米松搽剂的含量测定［J］.药学实践杂志，2005，23(3):167-169.

［7］ 袁建平，李文德.HPLC法测定眼药水中的地塞米松磷酸钠及分解产物［J］.现代应用药学，1995，12(3):35.

［8］ 张哲峰.色谱法在药品研发中的应用及常见问题分析［EB/OL］.http://www.anhuipharm.com.cn/display.asp?id=415［2007-7-28］.