液基细胞中p53异常表达在宫颈鳞癌诊断中的应用价值

王 宇,刘君星,王 琳,周丽艳

(1.佳木斯大学附属第一医院检验科,黑龙江 佳木斯154003;2.佳木斯大学基础医学院,黑龙江 佳木斯154007)

宫颈癌的死亡率在全球妇女恶性肿瘤死亡率中居第二位,全球每年50万人宫颈癌新发病例,我国每年约有新发病例13.15万,占世界新发病例的28.8%[1,2]。p53基因作为重要的抑癌基因被发现其异常表达可导致多种肿瘤的发生,有研究发现其与宫颈鳞癌也存在相关性[3]。液基细胞学检查因取材方便和无创可作为筛查宫颈病变的重要手段。液基细胞标本p53在宫颈癌及癌前病变中的应用价值还不确定,本研究对112例宫颈癌及正常的液基细胞标本进行p53免疫细胞学化学检测,从而分析p53异常表达对宫颈鳞癌诊断的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2009—09～2010—07于佳木斯大学附属第一医院就诊的41例宫颈鳞癌患者,年龄20～62(40.8±7.8)岁,35例健康体检者,年龄20～60(41.7±6.2)岁,所有患者均经临床和病理诊断。

1.2 方法

采用免疫细胞化学法和免疫组织化学法检测p53在SCC组和NILM组范围的LCT标本和石蜡组织标本上的表达,并对比LCT、LCT联合p53在宫颈鳞癌的诊断符合率。

1.3 判断标准

p53阳性细胞判断标准[4]:细胞核棕黄色为染色阳性,随机选取10个高倍视野,结合着色范围及强度进行分级。着色范围以阳性细胞百分率判断:10%为0分,11%～25%为1分,26%～50%为2分,51%～75%为3分,＞75%为4分。着色强度根据阳性细胞着色深浅判定:无着色为0分,浅棕黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分,深棕褐色为4分。

1.4 统计学方法

所有数据采用软件SPSS14.0进行分析,组间采用方差分析。采用spearman等级相关分析检验 LCT、LCT中p53免疫细胞染色的关系,P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 LCT中p53异常表达

p53在NILM和SCC各组中的阳性率分别为5.71%(2/35)、58.54%(24/41)。统计学分析,证明p53异常表达在宫颈鳞癌组合宫颈正常组之间存在明显差异(P＜0.05),结果如表1。

表1 p53表达阳性率及平均着色强度

2.2 宫颈鳞癌中单纯LCT与LCT中p53联合检测的意义

单纯LCT和LCT中p53联合检测对宫颈鳞癌有很高的特异性和较好的敏感性,联合两项检测能提高敏感度和准确性。见表2。

表2 宫颈鳞癌中单纯LCT与LCT中p53联合检测的意义

3 讨论

宫颈鳞癌是妇科常见的恶性肿瘤,其发病率仅次于乳腺癌。应用LCT筛查可以明显地降低宫颈癌发病率和死亡率,与传统的筛查方法比较能提高宫颈异常细胞的阳性率,但是由于LCT仅依靠主观的形态学手段,与病理学检查结果之间仍存在一定程度的不符合率。近年来,随着医学分子生物学的发展,肿瘤标志物是肿瘤细胞在癌变过程中由于癌基因的表达而生成的抗原和其它生物活性物质[4],p53基因异常表达与宫颈鳞癌的研究成为热点。国内Wang[5]等研究表明p53基因的阳性表达与宫颈癌密切相关。p53基因在宫颈鳞癌中有高水平表达,而在正常组织(细胞)中阳性表达极低。本研究应用鼠抗人单克隆抗体Do-7对NILM组和SCC组进行p53蛋白的免疫细胞化学检测,结果显示,LCT涂片中,在正常宫颈鳞状上皮细胞少有p53的阳性表达,SCC组的阳性表达为58.54%(24/41),与文献报道一致。LCT中p53检测在宫颈鳞癌组中的检出率显著高于正常宫颈组(P＜0.05),说明p53异常表达与宫颈癌的发生关系比密切。p53蛋白可作为子宫颈癌诊断和预后判断的一项参考指标[6]。单纯LCT和LCT中p53联合检测,把敏感度提高到65.85%,准确性提高到78.95%。因此推测LCT标本中p53检测与病理组织相一致,p53作为客观生物学标记物,可为临床医生评估病情,估计病变进展,预测患者的预后提供有价值的辅助指标。综上所述,p53基因异常表达在宫颈鳞癌的发生中占有重要地位。本实验通过对LCT标本中p53免疫细胞化学筛查,提高了单纯应用细胞学诊断的阳性率,增加了宫颈癌及癌前病变筛查的敏感度和特异性,该方法可减轻患者在病理学诊断中的痛苦,减低对病患部位的损伤,降低采样成本,简化采样程序,这必然被医生和患者乐于接受。LCT联合p53因方法简便、患者痛苦小且较高的敏感性和特异性等优点,可用于宫颈癌的辅助诊断。

[1]Eduardo L.Franco,Duarte-F ranco,Alex Ferenczy.Cervical cancer:epidemiology,prevention and the role of human papillomrirus infection[J].CMAJ,2001,164(7):1017-1025

[2]廖秦平.宫颈癌病因学研究新进展[J].中国妇产科临床杂志,2003,4(4):243-245

[3]Wu Y,Chen Y,Li L,et al.Associations of high-risk HPV types and viral load with cancer in China[J].J Clin Virol,2006,35(3):264-269

[4]王传新,王国礼.现代检验医学技术与质量控制[M].暨南:山东科学技术出版社,2004,282

[5]王修珍,顾永平,邓海珍.表皮生长因子受体和p53在宫颈鳞癌中的表达[J].中国航天医药杂志,2003,5(4):14

[6]王四玲.p53蛋白在子宫颈癌组织中表达的临床意思[J].肿瘤研究与临床,2003,15(1):38-39