卵巢上皮性癌组织中survivin与p53表达的研究

马志松，黄永生，苏 悦

卵巢癌是妇科三大恶性肿瘤之一，因其起病隐匿，恶性程度高，多数患者就诊时已是晚期，故由其导致的病死率居妇科恶性肿瘤首位。如何提高患者生存率一直是妇科肿瘤的研究热点。p53是研究较多的抑癌基因，该基因突变可使受损伤有异常的细胞不发生凋亡。survivin是凋亡抑制基因，具有抑制细胞凋亡和调节细胞增殖的双重功能。笔者对卵巢上皮性癌组织中p53、survivin的表达强度进行研究，探讨它们与临床和病理之间的关系，为卵巢癌的治疗提供新的思路。

1 资料与方法

1.1 病例资料 2003～2006年在笔者所在医院手术治疗的卵巢上皮性癌患者共46例为研究对象，年龄22～68岁，平均52岁。所有46例均经病理检查确诊，其中浆液性囊腺癌38例，黏液性囊腺癌6例，子宫内膜样癌2例。临床分期：Ⅰ期6例，Ⅱ期3例，Ⅲ期33例，Ⅳ期4例。细胞分化程度：高分化10例，中分化11例，低分化25例。有淋巴结转移24例，无淋巴结转移22例。对照组为同期住院手术治疗的卵巢上皮性良性肿瘤患者44例，年龄18～71岁，平均49岁。与卵巢癌组比较无统计学差异，其中浆液性囊腺瘤32例，黏液性囊腺瘤12例。

1.2 方法 将卵巢良恶性肿瘤组织的石蜡切片，应用SP免疫组化法分别测定p53、survivin的表达强度。试剂购自北京中杉金桥公司。操作按说明书进行。结果判断：光镜下观察，细胞浆或细胞核内有无棕黄色颗粒，并根据染色细胞的数目和染色的深度进行评分。染色深度：不着色0分；黄色1分；棕黄色2分；黄褐色3分。染色细胞数目：＜10%0分；10～39%1 分；40～69%2 分；≥70%3 分。将两项评分相加，0～1 分为（－），2 分为（+），3～4 分为（++），5～6 分为（+++）。

1.3 统计学处理 应用SPSS13.0软件包进行统计学分析，组间比较采用χ2检验，采用Spearman进行相关性分析。

2 结 果

2.1 p53在卵巢肿瘤组织的表达 卵巢良性肿瘤组织 44例中39例为 （-），5例为 （+）， 阳性率为11.4%。卵巢恶性肿瘤组织46例中10例为（-），22例为 （+），8 例为 （++），6 例为 （+++），阳性率为78.3%。两组比较有统计学差异（χ2=40.578，P<0.01）。

2.2 survivin在卵巢肿瘤组织中的表达 卵巢良性肿瘤组织 44例中39例为（-），5例为（+），阳性率为11.4%。卵巢恶性肿瘤组织46例中7例为 （-），22例为 （+），13 例为 （++），4 例为 （+++）， 阳性率为88.6%。两组比较有统计学差异（χ2=48.513，P<0.01）。

2.3 卵巢上皮性癌组织中p53、survivin表达强度与临床及病理之间的关系 p53在卵巢浆液性囊腺癌组织中阳性表达率为86.8%（33/38），在其它类型的卵巢上皮性癌中的阳性表达率为37.5%（3/8），两者比较，有统计学差异（χ2=9.457，P<0.01）。p53 表达强度与临床分期以及是否有淋巴结转移存在相关性，晚期肿瘤及有淋巴结转移者表达强度明显高于早期肿瘤及无淋巴结转移者（r=0.523，P<0.05）。p53表达与卵巢恶性肿瘤的细胞分化程度、肿块大小、血清CA125水平无相关性。

survivin表达强度与卵巢癌细胞分化程度以及是否有淋巴结转移存在相关性，癌细胞分化程度越低，survivin表达强度越高，有淋巴结转移者表达强度明显高于无淋巴结转移者（r=0.615，P<0.01）。survivin阳性表达率及表达强度与临床分期、肿瘤类型、肿块大小以及血清CA125水平无明显相关性。

2.4 p53、survivin在卵巢上皮性癌组织中表达的相关性 分析表明：p53与survivin在卵巢癌中的表达存在正相关（r=0.572，P<0.05）。

3 讨 论

p53是研究较多的抑癌基因。野生型p53参与细胞周期的调控，阻止细胞从G1期进入S期，识别并修复损伤的DNA，诱导受损伤的细胞凋亡。p53突变后，失去了对细胞增殖的抑制作用，受损伤有异常的细胞不断增殖，最终导致恶变。野生型p53所表达的蛋白半衰期极短，通常的免疫组化方法检测不出来。应用免疫组化可检测到的p53蛋白反映的是突变型p53，具有癌基因的功能。本文结果显示：p53在卵巢浆液性囊腺癌组织中的表达率显著高于在其它类型卵巢癌中的表达率，并且表达强度与临床分期以及是否有淋巴结转移呈正相关；此外，p53阳性多见于低分化浆液性囊腺癌，因此，p53阳性与卵巢癌恶性程度高有关，是卵巢上皮性癌进展的重要标志[1]。

survivin是凋亡抑制基因，具有抑制细胞凋亡、促进细胞增殖的作用，对肿瘤的发生、发展均起到重要作用。survivin在宫颈癌、子宫内膜癌、肺癌、肾癌等多种恶性肿瘤中均呈高表达，在一般组织中无表达[2]。 Kleinberg 等[3，4]认为，survivin 在肿瘤组织中高表达不仅与肿瘤性质有关，而且提示恶性肿瘤对化疗的抵抗，复发的可能性增加，生存率降低。survivin表达率越高，则预后越差。本文结果显示：survivin表达强度与上皮性卵巢癌细胞分化程度以及是否有淋巴结转移存在相关性，细胞分化程度越低，survivin表达强度越强。因低分化癌更易侵袭其它组织发生转移，因此，survivin高表达是肿瘤恶性程度高的指标，提示预后不良。有研究报道，某些药物可以通过降低细胞内survivin的表达，增加癌细胞对化疗的敏感性，提高治疗效果[5]。

关于癌组织中p53与survivin表达之间的关系，Hoffman等[6]的研究结果显示：野生型p53可与人体多种组织细胞的survivin启动子结合，对survivin表达产生强烈的抑制作用，从而促进异常细胞的凋亡，而突变型p53没有这种功能。Xiaoya等[7]对食管癌中二者表达的研究结果表明：野生型p53癌组织中survivin的表达率显著低于突变型p53癌组织中survivin的表达率，认为野生型p53的缺失是癌组织中survivin基因上调的重要原因。关于卵巢癌组织中p53与survivin表达之间关系的研究报道很少。本文结果显示，卵巢癌组织中p53与survivin的表达之间存在正相关，支持上述观点。Nabilsi等[8]报道子宫内膜癌组织中DNA甲基化能够抑制野生型p53与survivin启动子的结合，导致survivin高表达；而DNA去甲基化则可以抑制p53依赖的survivin的表达，为肿瘤的治疗提供了新的思路。

[1]Landen Jr CN,Birrer MJ,Sood AK.Early eventes in the pathogenesis of epithelial ovarian cancer.[J].J Clin Oncol,2008,26:995-1005.

[2]Duffy MJ,Donovan N,Brennan DJ,et al.Survivin:a promising tumor biomarker[J].Cancer Lett,2007,249(1):49-60.

[3]Kleinberg L,Flarenes VA,Silins I,et al.Nuclear expression of survivin is associated with improved survival in metastatic ovarian carcinoma.Cancer,2007,109(2):228,238.

[4]Yamashita S,Masuda Y,Kurizaki T,et al.Survivin expression predicts early recurrence in early-stage breast cancer.Anticancer Res,2007,27:2803-2808.

[5]Dan HC,Jiang K,Coppola D,et al.Phosphatidylinositol-3-OH kinase/AKT and survivin pathways as critical targets for geranylger-anyltransferaseⅠinhibitor-induced apoptosis[J].Oncogene,2004,23930:706-715.

[6]Hoffman WH,Biade S,Zilffou JT,et al.Transcriptional respression of the anti-apoptotic survivin gene by wild type p53.J Biol Chen,2002,277:3247-3257.

[7]Xiaoya Y,Gang X,Xuedan C,et al.Survivin expression in esophageal cancer:correlation with p53 mutations and promoter polymorphism.Diseases of the Esophagus,2009,22(2):223-230.

[8]Nabilsi NH,Broaddus RR,Loose DS.DNA methylation inhibits p53-mediated survivin expression.Oncogene,2009,28:2046-2050.