CD44v6与子宫颈癌转移的相关性研究

杜建层 王秋菊 冯艳萍

子宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤之一，近年来发病率有上升及年轻化趋势。其浸润及转移是导致患者死亡的重要原因。CD44v6是细胞表面黏附分子CD44的变异型之一。CD44v6的主要功能是与细胞骨架连接蛋白结合，参与细胞与基质、细胞与细胞间的黏附，参与细胞伪足的形成及细胞的迁徙运动;有利于肿瘤细胞的转移和扩散［1］。本研究通过检测CD44v6在宫颈癌组织中的表达，进一步探讨CD44v6在子宫颈癌转移中的作用，以期为肿瘤的生物靶向性治疗、预测和改善子宫颈癌患者的预后提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2005至2010年河北医科大学第一医院、河北医科大学第三医院手术切除并经病理组织学检查证实的宫颈组织标本95例，其中宫颈癌组织35例(有淋巴转移者25例;无淋巴转移者10例);宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)组织30例;正常宫颈组织或者伴有慢性宫颈炎组织30例，所有标本术前均未经过放疗及化疗。

1.2 方法 标本均用10%甲醛固定，石蜡包埋，采用免疫组化法检测CD44v6蛋白阳性表达水平。

1.3 结果判定 CD44v6蛋白阳性染色定位于细胞膜或者细胞质中，呈棕黄色颗粒，按照显色有无和阳性细胞数的多少将其分为三个等级:－:无阳性细胞;+:阳性细胞＜50%且颜色浅;++:阳性细胞≥50%且颜色深，其中强阳性(++)为阳性。

1.4 统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，计数资料采用χ2检验及连续校正χ2检验，两类别四格表阳性率的比较采用Fisher精确概率法，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CD44v6的阳性分布 CD44v6在细胞膜中呈线性分布，并在细胞膜或细胞质中呈棕黄色颗粒。CD44v6的阳性信号定位于宫颈癌细胞、宫颈上皮内瘤变细胞或者正常宫颈组织细胞的细胞质或胞膜中，呈棕黄色颗粒。

2.2 CD44v6的阳性表达 CD44v6在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中的表达率分别为82.9%(29/35)、46.7%(14/30)、10.0%(3/10)，3组比较差异有统计学意义(P＜0.05);3组两两比较，差异亦有统计学意义(P＜0.05)，宫颈癌有淋巴转移组阳性表达率为96.0%(24/25)显著高于无淋巴转移组50.0%(5/10)，差异有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

3.1 CD44v6的分子结构 白细胞分化抗原44(cluster of differentiation 44;CD44)是细胞黏附分子家族，是一种细胞表面跨膜糖蛋白。CD44基因有19～20个高度保守的外显子，被长短不一的内含子所分隔，定位于11号染色体的短臂上(11p13)。CD44基因根据其外显子表达方式的不同，可分为两种类型:一种是V区变异性剪接外显子，称为变异型CD44(CD44v);另一种是由仅含组成型外显子的CD44转录体编码的蛋白质，称标准型CD44(CD44s)。10种不同的CD44拼接变异体CD44v，可在CD44s中按不同的顺序插入10个变异型外显子来产生。研究表明CD44v主要分布在上皮细胞中，CD44v与肿瘤分化类型及转移密切相关，且在许多类型的恶性肿瘤中均有不同程度的表达［2］。CD44v主要包括三种亚型:CD44v3、CD44v5、CD44v6。CD44V6与CD44s的结构基本相似，但在细胞膜外区插入了34个由V6变异拼接型外显子所编码的不同序列的氨基酸残基。

3.2 CD44v6的生物学功能 CD44v6为细胞表面跨膜糖蛋白分子之一，分布极为广泛，其主要有以下生物学功能:(1)可以参与细胞伪足的形成;(2)与细胞骨架连接蛋白相结合;(3)与细胞的迁徙运动密切相关;(4)可以识别并结合相应的配体，参与肿瘤细胞、宿主细胞以及宿主基质之间的黏附;(5)可以参与细胞与基质、细胞与细胞间的黏附作用;(6)其作为细胞基质透明质酸受体，可以改变肿瘤细胞表面黏附分子的功能和构成，在肿瘤细胞的转移和扩散过程中起着非常重要的促进作用［1］。

3.3 CD44v6与肿瘤转移 CD44v6的过表达均与人体多种恶性肿瘤的发生、发展、侵袭和转移相关。CD44v6可以参与淋巴细胞的增殖、活化及再循环，主要介导循环中的淋巴细胞回归定位于淋巴结中，其被称为是淋巴结归巢的受体［3］。表达CD44v6的肿瘤细胞离开原发灶进入外周淋巴器官的过程有很强的侵袭行为，同淋巴细胞循环的运行过程非常相似，都能在黏附接触过程中进行细胞迁移，在引流淋巴结中快速积聚以后大量的增殖，并通过外渗作用进入周围组织细胞，最后释放到循环系统中。CD44v6作为细胞基质透明质酸受体，可以改变肿瘤细胞表面黏附分子的功能和构成，有利于癌细胞的侵袭、转移和扩散［4］。Vizoso等［5］在直肠癌中的研究表明，CD44v6阳性表达者的复发率和淋巴结转移率显著高于阴性表达者和无淋巴转移者，该研究结果证实了CD44v6的过量表达与人体恶性肿瘤的发生发展、侵袭以及转移密切相关。Guler等［6］在人喉上皮癌中研究发现，CD44v6在原位癌组织和发育不良组织中高表达，而且患者的预后差，生存期显著缩短。Koopmen等［7］研究显示，在宫颈鳞癌组织中，脉管神经浸润组CD44v6的阳性表达率明显高于未浸润组，低分化组中CD44v6的阳性表达率显著高于高中分化组，提示肿瘤的侵袭和转移与CD44V6的阳性高表达率密切相关。李霞［8］在子宫颈癌中的研究发现，CD44v6阳性表达的肿瘤较阴性表达者恶性程度高、淋巴结转移率高、进展快，提示CD44v6的阳性表达程度与癌组织的病期进展及浸润深度有关，其显著的阳性表达预示着癌组织容易向周围组织扩散，具有更强的侵袭和转移能力。

本实验结果表明，CD44v6分子在宫颈癌组织中的阳性表达率(82.9%)显著高于宫颈上皮内瘤变组织(46.7%)及正常宫颈组织(10.0%)，差异有统计学意义(P＜0.05);在宫颈癌组织中，有淋巴转移组CD44v6的阳性表达率(96.0%)显著高于无淋巴转移组(50%)，差异有统计学意义(P＜0.05)，本实验研究结果与文献报道一致。本文认为CD44v6在子宫颈癌组织中的阳性过度表达，促进了宫颈癌细胞的增殖分化，CD44v6分子作为淋巴细胞的归巢受体，介导了淋巴细胞与血管内皮细胞的结合，使淋巴细胞穿过血管壁回到淋巴组织，从而逃避免疫识别和杀伤，与宫颈癌细胞的侵袭、淋巴结的转移扩散密切相关。

1 郭亮，张敏，高洁凡.转移相关基因蛋白CD44v6和nm23-H1在宫颈病变中的表达及意义.河北医药，2009，31:911-913.

2 王繁，吕杰强.CD44v6和Ezrin在子宫内膜癌中的研究进展.实用肿瘤学杂志，2008，22:398-400.

3 Zhang JC，Wang ZR，Cheng YJ，et al.Expression of tumors and corresponding lumph nod metastases of colorectal carcinoma with dukes stage Cord world.J Gastroenterol，2003，9:1482.

4 Ontgomery E，Abraham SC.CD44 loss in gastric stromal tumors as a prognostic marker.Am J Surg Pathal，2004，28:168-177.

5 Vizoso FJ，Femandez JC，Corte MD，et al.Expression and clinical significance CD44v5 and CD44v6 in respectable Colorectal cancer.J Cancer Clin Oncol，2004，130:679-684.

6 Guler G，Sarac S，Uner A，et al.Prognostic value of CD44 Variant 6 in laryngeale pidermoid carcinomas.Arch Otolaryngol Head Neck Surg，2002，128:393-397.

7 Koopmen G，Heider KH，Horst E，et al.Activated human lymphocytes and aggressive non-Hodykin’s lymphomas express ahomdogne of the rat metastasis-associated variant of CD44.J Exp Med，1993，177:897.

8 李霞.CD44V6与子宫颈癌预后关系的研究.实用肿瘤杂志，2004，19:51.