甲胎蛋白异质体检测在肝癌诊断中的应用

马端叶 于丽梅 封建凯 盛丽

甲胎蛋白（AFP）作为肝癌的肿瘤标志物在临床上应用已久，但是一些良性肝病，如慢性肝炎、肝硬化患者甲胎蛋白也会呈低浓度升高，这给临床上鉴别肝癌和良性肝病带来困难。研究发现，肝细胞坏死再生时产生的AFP与肝细胞癌产生的AFP在糖链结构上有差异，如用小扁豆凝集素（LCA）作为外源性凝集素，AFP可以LCA非结合型(AFP-L1,AFP-L2)和LCA结合型（AFP-L3）3种异质体，其中AFP-L1主要存在于良性肝病中，AFP-L2来自孕妇，而AFP-L3为肝细胞癌所特有[1]。目前认为，通常所说的AFP异质体实际是指与LCA结合的AFP-L3[2]，1999年在第四届肝癌学术会议上，被指定为原发性肝癌临床诊断的肝癌标志物之一。

1 对象与方法

1.1 对象

170例血清标本来自我院2010年2月～2011年3月门诊或住院患者，患者年龄11～82岁，全部病例AFP检测阳性。证实所有肝癌患者均为本院门诊及住院患者，均是临床病理B超、CT检查确诊，部分经术后病理证实。

1.2 试剂与仪器

AFP检测使用罗氏E170电化学发光分析系统配套试剂，AFP-L3快速分离微量离心柱法由北京热景生物技术有限公司提供。

1.3 方法

采用微量离心柱方法。亲和吸附离心柱内装有耦联凝集素微球，可以特异结合AFP-L3,当血清流过离心柱时，与LCA亲合力强的AFP-L3结合于柱中，经过清洗除去不结合的AFP,再经过浸泡洗脱离心获得AFP-L3。然后应用罗氏E170电化学发光法检测总AFP和AFP-L3的含量并计算AFP-L3占AFP总量的百分比，以AFP-L3≥10作为AFP-L3异常升高的标准。

1.4 经统计学处理

用SPSS 10.0统计软件，对各组的肿瘤标志物浓度和阳性率进行t检验或x2检验。

2 结果

75例肝癌组患者血清中，AFP-L3阳性率为82.6%，肝硬化组阳性为25.5%，慢性肝炎组为20%，见表1。经x2检验，AFP-L3阳性率在肝癌组与肝硬化和慢性肝炎组比较，P＜0.05，差异均有统计学意义。

表1 各组患者AFP-L3阳性率比较（例）

肝癌、肝硬化和慢性肝炎患者AFP-L3的平均水平见表2，经t检验，肝癌患者与肝硬化和慢性肝炎患者比较，P＜0.01，均具有显著性差异。

表2 各组患者AFP-L3测定结果比较

3 讨论

肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，在恶性肿瘤中的死亡排位中居第三，仅次于胃癌和肺癌。我国每年因肝癌死亡的人数占全世界肝癌死亡人数的40%，是一种严重威胁人民生命健康的疾病[3]。至今为止，AFP仍是原发性肝癌最特异指标，但AFP在一些良性肝病患者中也会有不同程度的升高[4]。因为在肝细胞再生过程中会产生一定量的AFP，这给临床诊断带来一定的困难，尤其是AFP低浓度的肝癌，单检测AFP很难与肝硬化、慢性肝炎鉴别。此时AFP异质体检测就有良好的临床意义，尤其对于AFP在20～400ng/ml之间具有较好的价值。与郑颖、胡敏华等报道一致[5-7]，本研究结果显示：AFP-L3≥10%作为肝癌的诊断标准敏感性为82.6%，与慢性肝病鉴别诊断的特异性为76.8%，肝癌患者的AFP-L3均值及阳性率均高于肝硬化组和慢性肝炎组，差别具有统计学意义，提示检测AFP-L3有助于鉴别原发性肝癌与非原发性肝癌患者。尤其在甲胎蛋白低浓度组AFP＜400ng/ml,AFP-L3≥10%为鉴别诊断指标时，肝癌与良性肝病可得到明显区分。

我们在临床检测工作中已发现很多患者血清AFP为20～100ng/ml，AFP-L3阳性，从而使肝癌得到及时早期诊断。因此，AFP-L3非常适用于AFP低浓度升高的患者，对鉴别肝细胞癌与慢性肝炎、肝硬化等肝病患者是很有帮助的，特别对AFP低浓度升高的慢性肝炎、肝硬化等肝病患者，定期复查AFP-L3，动态观察其值变化可及时发现疾病的恶变倾向，明确诊断。尤其对AFP-L3≥10%的患者进行随访和严密的监控是很有必要的。

本文采用国产的微量离心柱法试剂，可以快速简便地获得AFP-L3的组分，用化学发光法进行定量测定，具有操作简单、用时短、稳定性高、经济性好等特点，利于临床推广。

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[5] 郑颖，单晓洁，任茗睿，等.微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体对原发性肝癌诊断的意义[J].浙江实用医学，2009，14（1）：3-4.

[6] 胡敏华，陈燕，梁亚嘉，等.新微量离心柱法测定甲胎蛋白异质体对原发性肝癌诊断的价值[J].福建医药杂志，2009，31（4）：95-96.

[7] 熊彪，蔡其浩，蒙凯.三项生化指标联合甲胎蛋白诊断原发性肝癌的研究[J].当代医学，2008，14(14)：37-38.