半夏泻心汤对溃疡性结肠炎大鼠模型胃肠激素的影响

王 营 李晓军 (三河市东杉医院,河北 三河 065200)

半夏泻心汤是张仲景《伤寒论》中治疗误下伤中,以致少阳热邪乘虚内陷,郁结心下,形成寒热互结,虚实夹杂,阴阳失调,升降失常心下痞满,或呕或利的主方。该方具有辛开苦降、调和寒热之功,可治疗脾胃同病,气机阻滞的痞满。溃疡性结肠炎(UC)又称慢性非特异性溃疡性结肠炎(CUC),为一种原发性器官特异的自身免疫性疾病,其病因尚未完全明确,目前认为主要与免疫异常有关。参与的多种炎症细胞及免疫细胞释放抗体、细胞因子及炎症介质等,引起组织破坏及炎性病变。可能与自身免疫、感染、遗传因素及精神因素有一定关系〔1〕。国内外主要采用免疫抑制剂柳氮磺胺吡啶进行治疗,对急性或慢性病急性发作的活动性UC患者,采用皮质类固醇治疗,也有用硫唑嘌呤维持的。但上述药物治疗时间长,不良反应较多,且易复发。本研究采用拆方与全方对比的分析方法,对UC大鼠模型胃肠激素 P物质(SP)、舒血管肠肽(VIP)含量检测,观察比较疗效。

1 材料与方法

1.1 实验动物 SD大鼠 60只,200～220 g,雌雄各半,由本校动物室提供。

1.2 药品及试剂 黄芩、黄连、人参、半夏、干姜、甘草、大枣,购自承德市医药公司;醋酸,由天津市凯通化学试剂有限公司提供;盐酸,由天津市凯通化学试剂有限公司提供;SP、VIP分析药盒,购自北京航天医学工程研究所。

1.3 实验方法 SD大鼠随机分 6组,即正常组、模型组、辛开组(半夏,干姜)、苦降组(黄芩,黄连)、甘调组(人参,甘草,大枣)、辛开苦降组(全方组),每组 10只。正常组不作任何处理,每天以 10ml/kg生理盐水灌胃,其他 5组实验前禁食 24 h,不禁水,将直径 3 mm聚乙烯导管经肛门插入至结肠内,深度 5～6 cm,随后注入 8%醋酸 1.5 ml,保留 15 s,注入生理盐水 3 ml,消除醋酸的作用〔1〕。2d后模型组每天以 10ml/kg生理盐水灌胃外,其他 4组分别用相应的中药水煎剂 10 ml/kg灌胃,连续3 w后将各组动物断头处死,每只大鼠取 5 g左右的大肠并称重,放入预冷的试管,加入适量的0.1mol/L HCl立即沸水中煮沸 10 min以灭活蛋白酶,用玻璃匀浆器匀浆,16 000r/min离心20 min,取上清,贮于 -20℃冰箱备测。按 SP、VIP分析药盒说明书操作程序测定结果,最后按组织匀浆实际稀释倍数计算出每克湿重组织中 SP、VIP含量,作统计分析〔2〕。

1.4 统计学处理 采用SPSS12统计学软件进行t检验。

2 结 果

模型组 SP、VIP含量明显增高,与正常组比较有差异性(P＜0.05);合方组与拆方组含量较模型组明显降低(P＜0.05);辛开组与苦降组无统计学意义(P＞0.05);而合方组与各组比较均有统计学意义(P＜0.05)。见表 1。

表1 大鼠UC肠管SP和VIP含量比较(±s,n=10,ng/g)

表1 大鼠UC肠管SP和VIP含量比较(±s,n=10,ng/g)

与模型组比较:1)P＜0.05;与辛开苦降组比较:2)P＜0.05

组别 SP VIP正常组 23.79±0.791)2) 834.04±47.591)2)模型组 37.69±2.572) 1 617.65±170.602)辛开组 29.47±2.021)2) 1 421.28±152.201)2)苦降组 30.43±1.671)2) 1 466.85±134.501)2)甘调组 33.21±2.611)2) 1 515.87±167.732)辛开苦降组 26.61±2.331) 1 269.38±113.241)2)

3 讨 论

祖国医学将 UC归属于“泄泻”、“肠风”、“脏毒”、“便血”等范畴〔2〕。众多医家多从中医理论就半夏泻心汤君药为半夏给予了阐释,但缺乏客观的药效学依据。有研究结果显示:半夏对正常大鼠胃蛋白酶活性具有抑制作用,随剂量的增加抑制作用增强;虽然党参干姜对胃分泌也具有抑制作用,但结合其他研究(半夏泻心汤对胃肠运动的影响的实验研究显示半夏对胃肠运动具有双向调节作用),以及以往对半夏泻心汤全方药效学的研究〔3,4〕,认为半夏与半夏泻心汤对小鼠胃分泌的影响方面具有一定的一致性,即半夏的药效学作用与半夏泻心汤所主病症具有相似性,提示半夏可能为半夏泻心汤之君药。

胃肠激素不但存在于胃肠,有的还同时存在于神经系统内,对神经及免疫有重要的调节作用。它们的增多或减少,可以引起胃肠道、免疫、神经功能失调而发病。胃肠激素中SP和VIP对 UC的发病起重要作用,SP刺激肠蠕动,VIP刺激肠液分泌,它们对胃肠黏膜和平滑肌具有广泛的调节作用,是胃肠运动和肠分泌的重要调节肽,其含量增多,肠平滑肌兴奋增高,收缩加强,平滑肌痉挛,肠蠕动加快,肠分泌增多而导致腹痛、腹泻。组织缺血、缺氧,毛细血管通透性增加而形成肠黏膜病理改变而出现脓血黏液便、里急后重。SP和 VIP在消化道作为胃肠激素,在神经系统作为神经递质,在免疫系统能与免疫细胞相应受体结合产生免疫效应。同一物质在 3个系统被利用,其含量改变,导致神经-胃肠激素-免疫功能失调可能是 UC发病的重要因素。研究表明,UC神经内分泌-免疫调节存在微妙的改变:肠道神经肽表达、分布及调节异常,外周细胞对神经系统反应性也异常。先前认识到,SP、神经激肽-1受体上调与UC乙状结肠中噬酸性粒细胞浸润相一致。近来发现〔5〕,固有层中细胞神经生长因子NGF及受体 P75增多,而肠神经结构中脑源性神经营养因子 BDNF锐减,这种不平衡可能引起患者局部组织炎症过度代谢紊乱。尿皮质醇Ⅱ(UcnⅡ)能作用于结肠上皮细胞的促肾上腺皮质激素释放激素受体 2(CRHR2)促进炎症反应〔6〕,而在 IBD肠道中 UcnⅡ、CRHR2 mRNA水平升高。体外实验证实〔7〕,UC肾上腺素能介导的 IL-10通路障碍:女性UC患者外周血细胞对 β肾上腺素的反应性减弱,导致调节性细胞因子 IL-10生成减少。

除肠道正常菌群在诱导UC中可能起作用外,不能忽视自身抗原和病原菌超抗原在诱导UC发生中的特殊作用。在抗原的诱导下,免疫功能调节的异常是引起 UC病理学改变的重要因素。神经内分泌系统与免疫系统间的相互调节作用反面的深入研究可能会更有助于弄清UC的病因病机。

本实验说明辛开苦降合法之半夏泻心汤,能够降低UC大鼠模型胃肠激素 SP及 VIP的分泌,从而缓解肠平滑肌兴奋,收缩减弱,平滑肌痉挛减轻,肠蠕动减慢,肠分泌减少,减轻腹痛、腹泻的临床症状,从而达到缓解和治愈溃疡性结肠炎的目的。

1 杨冬华 .消化系疾病治疗学〔M〕.北京:人民卫生出版社,2005:284.

2 黄志欣,劳绍贤,崔琦珍,等.溃结灵颗粒治疗活动期溃疡性结肠炎的临床与实验研究〔J〕.中国中西医结合消化杂志,2003;3(11):141.

3 温武兵,张桂珍,叶向荣 .半夏泻心汤调和胃肠作用的动物实验研究〔J〕.中国医药学报,2000;15(2):66.

4 麻春杰.半夏泻心汤对实验性大鼠胃运动的影响〔J〕.实用中医药杂志,1996;4(1):31.

5 Johansson M,Norrgrd O,Collins JE,et al.Study of expression patterns and levels of neurotrophins and neurotrophin receptors in ulcerative colitis〔J〕.Inflamm Bowel Dis,2007;13(4):398-409.

6 Moss AC,Anton P,Savidge T,et al.UrocortinⅡmediates pro-inflammatory effects in human colonocytes via corticotropin-releasing hormone receptor 2〔J〕.Gut,2007;56(9):1210-7.

7 Langhorst J,Cobelens PM,Kavelaars A,et al.Stress-related peripheral neuroendocrine-immune interactions in women with ulcerative colitis〔J〕.Psychoneuroendocrinology,2007;32(8-10):1086-96.