普洱茶对大鼠钙磷代谢的影响

杨兰兰，侯 艳，肖 蓉，邵宛芳，龚 江，秦廷发

普洱茶对大鼠钙磷代谢的影响

杨兰兰1，侯 艳2，肖 蓉3,*，邵宛芳2，龚 江1，秦廷发2

(1.云南农业大学动物科学技术学院，云南 昆明 650201；2.云南农业大学龙润普洱茶学院，云南 昆明 650201；3.云南农业大学食品科学技术学院，云南 昆明 650201)

初步探讨普洱茶对实验大鼠钙磷代谢的影响。采用100只雄性Wistar大鼠按照体质量随机分为对照组(纯净水)，普洱熟茶低、中、高剂量组，普洱生茶低、中、高剂量组，曲茗绿茶低、中、高剂量组，每组10只，分别灌胃纯净水，0.5、1.0、2.0g/(kg·d)(以体质量计)的普洱茶和绿茶茶汤，进行为期90d的灌胃实验。实验结束后将大鼠处死，测定分析普洱茶对实验大鼠钙磷代谢的相关指标。结果发现：各实验组动物粪钙含量均显著低于对照组(P＜0.05)，除高剂量普洱生茶组和高剂量普洱熟茶组外，其他实验组大鼠粪磷含量与对照组相比无明显差异(P＞0.05)；各实验组钙磷表观吸收率与对照组相比无显著差异(P＞0.05)；结论：在本实验条件下，该批普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对实验大鼠的钙磷代谢无影响。

普洱茶；钙；磷；代谢；大鼠

云南是普洱茶的原产地。早在东汉时期，普洱茶就已经开始慢慢发展起来[1]。特别是近年来随着普洱茶及普洱茶文化的不断发展，国内外专家学者对普洱茶的生理、药理功能进行了更加深入的研究，不断证实了普洱茶具有抗衰老、减肥、防癌、抗癌、降压、降脂等保健功效[2-5]。虽然普洱茶已被广大人民所接受，但有学者认为饮用普洱茶会抑制人体对钙的吸收，造成机体钙离子的流失。因此，本实验采用不同剂量的普洱茶对大鼠进行为期3个月的灌胃实验，测定大鼠对饲料中钙磷的吸收利用率以及粪钙、粪磷的含量，探索普洱茶对实验大鼠钙磷代谢的影响，从而为消费者健康饮用普洱茶提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料、实验动物与试剂

普洱茶生茶和普洱茶熟茶(2007年)分别取自云南云县天龙生态茶业有限责任公司(产品标准号：DB53/103—2007)；云南省农业科学院茶叶研究所，西双版纳普洱茶研究院(产品标准代号：DB53/103)；云南省思茅茶树良种场，中国普洱茶研究院(产品标准代号：D B 5 3/ 103)。将上述3种茶样分别按普洱熟茶、普洱生茶等量混合。

曲茗绿茶由云南省思茅茶树良种场提供。

100只Wistar 雄性大鼠(60～75g)由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK(沪)2008～0016；基础饲料由昆明医学院动物实验中心提供；动物饮用水为云南山泉纯净水，由云南大山饮品有限公司提供。

血清钙试剂盒(20090317)、血清磷试剂盒(20090317)南京建成生物工程研究院。

1.2 仪器与设备

PS-4型电感耦合等离子原子发射光谱仪 美国贝尔德公司；XFLM-50CA电热式压力蒸汽灭菌器 浙江新丰医疗器械有限公司；HH-6 数显恒温水浴锅 常州市华普达教学仪器有限公司；RE-2000 旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器厂；BS210S 电子天平 北京赛多利斯天平有限公司；DGF30-ⅢA 电热鼓风干燥箱 南京实验仪器厂。

1.3 方法

1.3.1 茶汤制备

将普洱茶叶磨碎后用水浸提，水浸液制备见参考文献[5]，即将等量的茶叶充分溶解在纯净水中，通过浓缩最终制备出等体积的茶汤，提取的茶汤终质量浓度为1g/mL，4℃冰箱保存。

1.3.2 受试普洱茶样品常规成分的测定指标及方法

取样：按GB/T 8302—2002《茶 取样》取样；磨碎试样：按GB/T 8303—2002《茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定》制备；水分测定 ：按GB/T 8304—2002《茶 水分测定》测定；水浸出物测定：按GB/T 8305—2002《茶 水浸出物测定》测定；茶多酚含量测定：按GB/T 8313—2002《茶 茶多酚测定》测定；茶多糖含量的测定采用蒽酮-硫酸法，测定方法见参考文献[6]。

1.3.3 动物分组与处理

健康雄性Wistar大鼠100只，同室单笼饲养，自由采食和饮水，环境温度控制在(20±2)℃，相对湿度45%～60%。实验大鼠在实验环境下饲喂基础饲料适应1周后，随机分为对照组，普洱熟茶低、中、高剂量组，普洱生茶低、中、高剂量组，及绿茶低、中、高剂量组，每组10只。已有研究表明推荐成人每日用茶剂量为0.1g/kg[7]，实验中低、中、高剂量分别为人体推荐摄入量折算为每千克体质量剂量的5倍、10倍和20倍[8]，即低、中、高剂量分别为0.5、1.0、2.0g/(kg·d)，根据大鼠的体质量计算出每只大鼠每天可摄入的茶汤的量，然后将制备好的茶汤按照不同的剂量组用纯净水稀释到不同的质量浓度，一次经口灌胃2mL/d，空白对照组灌胃等体积纯净水，灌胃持续90d。

1.3.4 受试大鼠测定指标及方法

1.3.4.1 常规指标测定

每周定时测量实验大鼠的体质量、体长(体长测定从大鼠鼻端到肛门)、饮水量和摄食量。

1.3.4.2 受试大鼠饲料和粪便中钙磷含量的测定

受试大鼠处死前4d收集每只受试大鼠的全部粪便，送往农业部农产品质量监督检验测试中心(昆明)采用等离子体发光光谱仪测定钙磷含量。

1.3.4.3 钙磷表观吸收率的计算

1.3.4.4 食物利用率的计算

食物利用率/%=体质量增加量/摄入饲料质量，即大鼠每摄入100g饲料所增加的体质量。

1.3.5 数据处理

2 结果与分析

2.1 受试茶样常规成分含量测定结果

表1 受试普洱茶常规成分含量Table 1 Contents of regular ingredients in

表1 受试普洱茶常规成分含量Table 1 Contents of regular ingredients in

茶样水分含量/%干物质含量/%水浸出物/%茶多酚含量/%茶多糖含量/%普洱生茶7.75± 0.1492.25± 0.1449.40± 0.2329.97± 1.390.35± 0.02普洱熟茶9.88± 0.3590.12± 0.3542.00± 0.1812.38± 0.992.40± 0.14曲茗绿茶6.70± 0.1693.30± 0.2348.90± 0.1836.47± 0.340.33± 0.16

从表1可知，所采普洱茶生茶、普洱茶熟茶、曲茗绿茶理化成分含量符合云南省地方标准DB53/103—2006《普洱茶 云南省地方标准》，说明所选茶样具有一定的代表性，达到研究所需样品的要求。

2.2 实验饲料矿质元素测定结果

实验大鼠所食基础饲料经等离子原子发射光谱仪测定其钙含量为0.85%，磷含量为1.00%，钙磷比为1:1.18，其比例符合实验大鼠正常日食的钙磷比，能够保证实验大鼠钙磷的正常摄入量。

2.3 普洱茶对大鼠体质量的影响

在实验过程中大鼠生长良好，未见明显的异常变化。各组大鼠的摄食量及饮水量无明显变化，对大鼠体质量的影响见表2。

从表2可以看出，各实验组大鼠初始体质量与对照组相比无显著差异(P＞0.05)，实验组间相比无显著差异(P＞0.05)，说明各实验大鼠初始体质量处于同一水平；除低剂量普洱生茶组、低剂量普洱熟茶组和中剂量普洱熟茶组外，其他实验组终末体质量仍显著低于对照组(P＜0.05)。说明中、高剂量普洱生茶，高剂量普洱熟茶和绿茶均具有抑制实验大鼠体质量增长的作用并具有一定的量效关系。可能因为普洱茶中的麴菌含有微量脂肪分解发酵的脂肪酶，这对脂肪分解具有效用。

2.4 普洱茶及绿茶对大鼠体长的影响

在实验过程中大鼠生长良好，未见明显的异常变化，对大鼠体长的影响见表3。

从表3可以看出，与对照组相比，中、高剂量普洱生茶组实验大鼠体长的净增值较低，并具有显著差异(P＜0.05)；而普洱熟茶和绿茶各剂量组实验大鼠体长的净增值均无显著差异(P＞0.05)。说明普洱熟茶、绿茶和低剂量普洱生茶不影响实验大鼠体长的增长。

2.5 普洱茶及绿茶对大鼠食物利用率的影响

根据大鼠的初始体质量及终末体质量得到净增体质量，并由总摄食量根据1.3.4.4节公式计算出大鼠的食物利用率(表2)。各实验组食物利用率显著低于对照组(P＜0.05)；高剂量普洱生茶组食物利用率显著低于低剂量和中剂量普洱生茶组(P＜0.05)，普洱熟茶组间食物利用率相比无显著性差异(P＞0.05)，低剂量绿茶组食物利用率显著高于高剂量绿茶组(P＜0.05)；低剂量各组间食物利用率相比无显著性差异(P＞0.05)，中剂量普洱生茶组食物利用率显著高于中剂量绿茶组(P＜0.05)，高剂量普洱生茶组食物利用率显著低于高剂量熟茶组(P＜0.05)，说明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对实验大鼠的食物利用率有一定的影响。

表2 普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对大鼠体质量及食物利用率的影响Table 2 Effects of unfermented pu er tea, fermented pu er tea and green tea on body weight of rats,,

表3 普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对大鼠体长的影响Table 3 Effects of unfermented pu er tea, fermented pu er tea and green tea on body length of rats,,

2.6 普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对大鼠粪便中钙磷含量的影响

从表4可以看出，各实验组大鼠粪钙含量均显著低于对照组(P＜0.05)，说明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和绿茶不仅不会增加实验大鼠机体中钙离子从粪便中的排出量，反而抑制了钙离子的排出量，并具有一定的量效关系。

此外，除高剂量普洱生茶组和普洱熟茶组粪磷含量显著低于对照组外(P＜0.05)，其他实验组与对照组相比无明显差异(P＞0.05)，但大部分实验大鼠组粪磷含量较对照组低，说明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和绿茶不会促进机体内磷离子从粪便中排出，相反高剂量的生茶和熟茶抑制了磷离子的排出。

表4 普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对大鼠粪便中钙磷含量的影响Table 4 Effects of unfermented pu ,er tea, fermented pu ,er tea and green tea on contents of calcium and phosphorus in stool of rats

2.7 普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对大鼠钙磷表观吸收率的影响

表5 普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对大鼠钙磷表观吸收率的影响Table 5 Effects of unfermented pu ,er tea, fermented pu ,er tea and green tea on apparent absorption rates of calcium and phosphorus in rats

从表5可以看出，各实验组钙和磷的表观吸收率与对照组相比无显著差异(P＞0.05)，说明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对大鼠钙和磷表观吸收率没有影响。

3 结 论

由实验结果可以看出，高剂量普洱生茶、普洱熟茶和绿茶均具有抑制实验动物体质量增加的作用，并具有一定的量-效关系。因为普洱茶中的麴菌含有微量脂肪分解发酵的脂肪酶，这对脂肪分解具有效用。与侯艳等[9]的研究结果相似。另有文章报道，日本朝日啤酒和朝日饮料两公司为了寻求抑制减肥反弹的方法，利用老鼠对具有抑制脂肪吸收效果的4种中国茶( 普洱茶、茉莉花茶、乌龙茶、混合茶) 进行了研究，结果发现，喂食普洱茶粉末的老鼠，体质量下降非常明显，显示出惊奇效果[10]。普洱熟茶、绿茶和低剂量的普洱生茶不影响实验动物体长的增长。普洱茶和绿茶对实验动物的日摄食量影响不大；此外，已有研究显示，大鼠饲料钙磷比为1.2:1时，生长期实验大鼠体质量增加及骨骼发育较好[11-12]，本实验所采用的饲料钙磷比为1.18:1，接近该比值能够保证实验大鼠正常生长发育。

在本次实验食物利用率的结果分析中，各实验组食物利用率显著性低于对照组，说明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对实验大鼠的食物利用率有影响。因为大鼠饲料的摄入量没有差异性，而灌胃普洱生茶、普洱熟茶和绿茶抑制了实验大鼠体质量的增加，从而对大鼠的食物利用率造成了影响，其结果符合动物生长规律。

在本次实验粪钙和粪磷的结果分析中，各实验组粪钙含量均显著低于对照组(P＜0.05)；除高剂量普洱生茶组和普洱熟茶组粪磷含量显著低于对照组外(P＜0.05)，其他实验组与对照组相比无明显差异(P＞0.05)，但大部分实验大鼠组粪磷含量较对照组低，说明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和绿茶不会促进实验大鼠体内钙磷离子从粪便中的排出，相反随剂量的升高粪便中钙磷离子的含量降低。此外，虽然本实验高剂量的普洱生茶、普洱熟茶和绿茶的食物利用率较低，但相反的是高剂量的普洱生茶、普洱熟茶和绿茶组实验大鼠粪便中钙磷离子的含量并未高于对照组。影响钙磷排出的因素很多，其中包括钙、磷的摄入量和二者的比例，其原因有待进一步研究[13-17]。

在本次实验钙磷表观吸收率的结果分析中，各实验组钙磷表观吸收率与对照组相比无显著差异(P＞0.05)，说明灌胃普洱生茶、普洱熟茶和绿茶对钙磷表观吸收率没有影响，这与钙磷的摄入量与排出量呈一致关系。

本实验通过对普洱生茶和普洱熟茶以及绿茶的研究发现普洱生茶、普洱熟茶和绿茶不会促进实验大鼠体内钙磷离子从粪便中的排出，对钙磷表观吸收率没有影响，这与钙磷的摄入量与排出量呈一致关系。因此在本实验条件下，本批次普洱生茶和普洱熟茶以及绿茶不会促进实验大鼠体内钙磷的流失。

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Effect of Pu’er Tea on Metabolism of Calcium and Phosphorus in Rats

YANG Lan-lan1，HOU Yan2，XIAO Rong3,*，SHAO Wan-fang2，GONG Jiang1，QIN Ting-fa2
(1. College of Animal Science and Technology, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China；2. College of Longrun Pu’er Tea, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China；3. College of Food Science and Technology, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China)

In this paper, the effect of pu’er tea on metabolism of calcium and phosphorus in rats was investigated. A total of 100 male Wistar rats were randomly divided into 10 groups for 10 rats in each group. The first group was designated as the control group administered with pure water by gavage. Nine groups were designated as treatment groups with daily oral administration of fermented pu’er tea, unfermented pu’er tea and green tea extract at the dosages of 0.5, 1.0 g/(kg·d) and 2.0 g/(kg·d), respectively. After 90 days consecutive treatment, the rats were sacrificed and metabolic index of pu er tea on calcium and phosphorus in rats were determined. Results indicated that calcium content in stool of each experimental group was significantly lower than that in the control group (P＜0.05). Except for unfermented and fermented pu’er tea groups at high dosage, calcium contents in stool of other experimental groups had no significant difference (P＞0.05), compared with the control group. Compared with the control group, apparent absorption rates of calcium and phosphorus in experimental groups had no significant difference (P＞0.05). Therefore, the moderate consumption of fermented pu’er tea, unfermented pu’er tea and green tea had no effect on metabolism of calcium and phosphorus in rats.

pu’er tea；calcium；phosphorus；metabolism；rats

TS207.3

A

1002-6630(2011)03-0219-04

2010-05-25

“十一五”国家科技支撑计划项目(2007BAD58B04)；云南省教育厅科学研究基金项目(08Y0182)

杨兰兰(1988—)，女，硕士研究生，研究方向为动物食品质量与安全。E-mail：453317877@163.com

*通信作者：肖蓉(1965—)，女，教授，学士，研究方向为食品安全性和功能性评价。E-mail：xiaorong91515@163.com