血清甲胎蛋白异质体对肝细胞癌的诊断意义

吴晓霞 邓 俊 姚悦萍 王娟华 陆忠华 周 敏 陈 卫

近年来，肝细胞癌（HCC）的发病率呈明显的上升趋势，且死亡率高。甲胎蛋白（AFP）是当前诊断HCC最有价值的血清标志物。但在慢性肝炎以及肝硬化患者中也可存在AFP升高，给临床诊断带来一定的困难。大量研究发现AFP存在多种异质体[1]，其中（小扁豆凝集素亲和型甲胎蛋白异质体）AFP-L3对HCC与良性肝病具有较大的鉴别意义。我们在慢性肝炎、肝硬化和HCC患者检测了血清AFP和AFP-L3，以探讨它们对HCC的诊断价值。

对象与方法

一、研究对象 2009年12月至2011年4月本院肝病科住院的肝癌患者135例，男性96例，女性39例，平均年龄46.3岁。经临床、CT、B超或肝脏穿刺或术后组织病理学检查确诊，并符合2001年广州第八次全国肝癌学术会议修订的原发性肝癌的诊断标准。另选同期住院的慢性乙型肝炎52例，男性36例，女性16例，平均年龄43.5岁；肝炎肝硬化64例，男性49例，女性15例，平均年龄47.8岁。

二、检测方法 采用雅培I2000化学发光仪进行电化学发光法监测AFP（试剂由雅培公司提供）；采用亲和吸附离心管法（试剂由北京热景生物技术有限公司提供）和化学发光法检测AFP-L3（计算AFP-L3占AFP总量的百分比，以AFP＞25ng/ml为阳性、25～400ng/ml为低浓度阳性，AFP-L3≥10%作为阳性判断标准）。

三、统计学方法 应用SPSS17.0软件进行统计学分析,计数资料比较采用卡方检验。

结 果

一、HCC与良性肝病患者血清AFP和AFP-L3阳性情况的比较 在135例HCC患者中，AFP阳性率为82.2%（111/135）、AFP-L3阳性率为 75.6%（102/135），而在 116 例良性肝病患者中，AFP阳性率为41.4%（48/116）、AFP-L3阳性率为14.7%（17/116），两者相比差异均有显著性（x2AFP=33.5，x2AFP-L3=66.4，P＜0.001），见表 1。

表1 HCC与良性肝病患者血清AFP和AFP-L3阳性情况（%）的比较

二、AFP-L3阳性与AFP水平的关系 在28例AFP低水平阳性的HCC患者中，AFP-L3阳性为75%（21/28），在83例AFP＞400ng/m l的 HCC 患者中，AFP-L3阳性为 78.3%（65/83），两者阳性率无显著性差异（x2=0.0086，P＞0.05）；在 AFP低浓度阳性的良性肝病患者中，AFP-L3阳性率为21.9%（9/41），显著低于 AFP低水平阳性的 HCC患者（x2=19.1，P＜0.001）。

三、AFP-L3阳性与肿瘤大小的关系 见表2。

表2 肿瘤大小与AFP-L3阳性率的关系

讨论

目前，诊断HCC的血清标志物仍首推AFP，然而约有30%～40%HCC患者血清AFP呈低水平阳性甚至阴性[2]，且AFP在一些良性肝病中也有不同程度的升高，特别是在慢性肝炎和肝硬化患者中有20%～50%AFP升高者[3，4]，尤其是在慢性肝炎或肝硬化患者病情急性活动时，会产生较高水平的AFP。目前，临床上采用AFP＞400ng/m l持续8周作为PHC诊断的标准之一，对于AFP低水平持续阳性的患者需要进行动态观察AFP的变化。但这种长期随访的方法往往延误诊断而造成失去及时治疗的机会。

1970年，Purves等首先应用淀粉凝胶电泳分离出人的AFP异质体，以后众多学者利用AFP糖链与植物凝集素结合能力的差异，对AFP异质体进行了广泛的研究。他们认为不同来源的肿瘤表达的AFP糖链不同。AFP糖链不同构成AFP的异质体，与疾病有一定的相关，后来的研究发现肝癌细胞分泌的AFP特点是L3明显增高[5]。

本研究检测135例HCC和116例良性肝病患者血清AFP水平及AFP-L3阳性率，结果显示在HCC患者两者的水平明显高于良性肝病。AFP低水平阳性的肝癌患者AFP-L3阳性率明显高于肝硬化和慢性肝炎患者。研究还发现AFPL3阳性率不受AFP水平的影响，与肿瘤的大小也无明显的相关性，与蔡志昌和卓广超等[6，7]的研究结果相一致。

在本研究中，5.9%HCC患者AFP和AFP-L3均为阴性，而在良性肝病中有9.5%的患者AFP及AFP-L3均为阳性，甚至有2例患者AFP及AFP-L3均为高滴度阳性。说明这两项血清标志物的检测尚有一定的漏诊率和假阳性率，在临床实践中需要临床医师在分析这两项指标时能结合患者的病史、肝功能等其他生化指标以及超声、CT等影像学检查结果进行综合分析，以对疾病尽早作出正确的诊断和治疗。

有文献报道，如果患者血清AFP只有轻微的升高而AFP-L3所占的比例超过10%，就提示肝癌存在的可能性很大[8]，此时影像学检查甚至不能在肝脏中发现占位性病变。有人认为AFP-L3阳性对诊断HCC的正确率高达94%[9]，而联合检测对肝癌的诊断可能更有意义[10]。因此，AFP-L3检测对慢性肝炎和肝硬化患者肝细胞癌变的早期诊断有重要价值。

[1]PURVES LR，VAN DER MERVE E，BERSOHN I.Variants of alpha-fetoprotein[J].Lancet，1970；2:464.

[2]廖维甲，覃理灵，梅铭惠.AFP、AFU和SA联合检测在肝细胞癌诊断中的价值[J]. 实用肝脏病杂志，2006，9（6）：373-374.

[3]FUJIYAMA S，TANAKA M，MAEDR S，et al.Tumor markers in early diagnosis，follow up and management of patients with hepatocellular carcinoma[J].Oncology，2002，62（Suppl 1）:57-63.

[4]KRECZKO S，LIPSKA A，WYSOCKA J.Alfa-fetoprotein:diagnostic value in hepatic disorders[J].Pol Merkuriusz Lek，2000，8:420-423.

[5]刘倩，王文奇.肝癌[M].1版.北京：人民卫生出版社，2000:276-280.

[6]蔡志昌，沈霞.AFP异质体在肝癌诊断中的应用[J].中国实验诊断学，2001，5（4）：189-190.

[7]卓广超，汪子伟.AFP异质体测定在良恶性肝病鉴别诊断中的应用[J]. 中国肿瘤，2005，14（7）：472-473.

[8]SHIMAUCHI Y，TANAKA M，KUROMATSU R，et al.A simul－taneous monitoring of lens culinaris agglutinin A reactive alpha-fetoprotein and des-gamma-carboxy prothrombin as an early diagnosis of hepatocellular carcinoma in the follow-up of cirrhotic patients[J].Oncol Rep，2000，7:249-256.

[9]TU ZX，YIN ZF，WU MC.Prospective study on the diagnosis of hepatocellular carcinoma by using alpha-fetoprotein reactive to lentillectin[J].Chin Med Sci J，1992，7（4）：191-195.

[10]王爱华，王华梁，方芳，等.AFP和AFP异质体对405例原发性肝癌的诊断价值探讨[J].上海医学检验杂志，2002，17（2）：87-89.