IVF-ET术中受精不良女性原因分析

谢 伟 张海英 漆光子 檀大羡

1.广西壮族自治区人口和计划生育研究中心生殖医学科(南宁,530021);2.广西医科大学公共卫生学院统计学教研室

体外受精 -胚胎移植(IVF-ET)术中卵子受精低下或不受精是个难题,男方精液质量无疑是重要原因之一,但不少病例男方精液检查基本正常,所以女方也是不能忽视的原因之一。本文对不受精病例女方相关因素进行分析。

1 资料和方法

1.1 研究对象

2009年 1～12月在本中心行 IVF-ET治疗的受精低下者 53个周期,男方精液常规和形态学正常,且有使女方受孕史;选择同期男方精液常规和形态学正常,且有使女方受孕史,但受精正常患者共42周期。文中受精功能低下也仅指女方因素的受精功能低下。根据文献及本中心经验受精功能低下为受精率≤30%[1,2]。

1.2 研究方法

1.2.1 单因素分析 根据经验和文献[1,2]报道对于可能的受精低下原因进行两组间比较,差异有统计学意义或可疑有差异的因素,纳入非条件 logistic多因素分析。

1.2.2 多因素分析 以受精低下和受精良好为因变量,以 P＜0.05为标准引入差异因素为自变量,如年龄、B超卵泡数、MⅡ卵子个数,考虑到实际取卵数与 MⅡ卵子数的关系也将其引入,助孕次数、超排方案作为可疑因素引入,使用非条件 logistic多因素回归分析可能影响受精的因素。赋值见表 1。

表 1 logistic回归赋值说明＊

1.3 统计学方法

使用 SPSS 13.0统计软件进行单因素,非条件logistic多因素统计分析,检验水准 α=0.05。

2 结果

2.1 单因素分析

2.1.1 计数因素比较 经 χ2检验子宫内膜异位症 P=1.000,多囊卵巢综合征 P=0.902,输卵管积水 P=0.027。但对输卵管积水因素再进行Mantel-Haenszel法检验时,发现≥35岁组和 ＜35岁组无差别,同时输卵管积水组和非输卵管积水组无差别(OR=0.130,P=0.08)。

2.1.2 计量因素比较 年龄 P=0.008,FSH/LH P=0.579,FSH P=0.997,LH P=0.179,E2P=0.593,B超卵泡数 P=0.000,实际取卵数 P=0.228,MⅡ卵子个数 P=0.005。

2.2 非条件 logistic多因素回归分析

结果显示年龄与女性受精低下无相关性,而 B超卵泡数、实际取卵数和 MⅡ卵子数与女性受精低下相关。其中 B超卵泡数和 MⅡ卵子数是减少风险因素,实际取卵数是增加风险因素。见表 2。其中 χ2=32.492,P=0.000回归方程有意义。回归方程为logistic P=2.240-1.290X2+1.440X4-2.058X3。

表 2 IVF-ET女性受精低下非条件 logistic多因素回归分析

3 讨论

人类卵子受精过程是一个复杂的过程,也就意味许多因素都可以影响卵子受精,精子在受精过程中的重要作用无可质疑,但女方卵子的质量好坏也可以造成受精不良的后果。

根据经验和文献[1,2],助孕次数、女方年龄、超促排卵方案、PCOS、采卵数、MⅡ卵子个数、FSH等都可能是影响因素。通过单因素分析进行筛查,发现两组年龄、B超卵泡数、实际取卵数和 MⅡ卵子数差别有统计学意义。

年龄是与卵子质量密切相关因素[3],也是反映自身条件的重要指标。Claudio等[4]认为年龄又与累积妊娠率呈负相关。随着女方年龄增大,卵巢的体积缩小,窦卵泡的数量下降,卵子的质量也会下降,本文中两组年龄差别有统计学意义。目前认为高龄妇女卵子质量下降,从而不利精子的穿透和受精。但在文中非条件 logistic多因素回归分析中,方程排除了年龄的因素,可能与年龄分组较粗或样本数不高有关,需进一步研究。

非条件 logistic多因素回归分析发现,实际取卵数是卵子受精低下的正相关因素,而 B超卵泡数和MⅡ卵子数是受精低下的负相关因素。目前认为 MⅡ卵子受精能力最佳,这时放射冠细胞扩散,伴随卵子细胞质成熟,颗粒细胞半透明状,有利受精[5]。同时成熟卵泡中的卵泡液包含了许多细胞因子,如卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、瘦素等,有利于卵子的发育成熟和受精[6]。故增加 MⅡ卵个数有利于减少不受精的发生。

超促排卵方案如长方案、短方案等之间本身没有好坏之分,也不会因为超排方案不同而对卵子受精产生不利影响,本文中统计学分析未见长方案、短方案或微刺激方案对卵子受精的影响,但超排方案用药需要根据不同患者的身体条件、卵巢功能及药物敏感性采取个体化治疗方案,促使卵巢产生过多或者过少的卵子,都可以对获得的卵子质量有重要影响,进而影响卵子受精。如对于降调节的启动时机,促性腺激素(Gn)的使用剂量和时间,是否需要改用促性腺激素释放激素(GnRHa)等都要准确地掌握,同时及时检测雌二醇(E2)和超声检查卵泡生长情况。

E2和超声检查均是监测卵泡数量和成熟的重要工具[7],目前使用最多的是经阴道超声检查监测卵泡发育,具有操作简便、安全无创、图像清晰、重复性好、准确性高等特点。本文结果显示 B超监测卵泡数量,有利减少卵子不受精的发生,而两组实际的取卵数差异却无统计学意义,如 Yoldemir等[8]认为获卵数和临床妊娠率无关,而超声检查能监测卵泡数量,更能反映卵子的成熟过程,从而减少不受精发生。多数人认为取卵数为 5～15时优胚和妊娠率高,考虑到卵巢在性激素的作用下会有一群卵泡成熟,但优势卵泡只有一个,取卵数量的增加可能会影响卵子的质量,特别是 MⅡ卵子的质量或数量,从而对精卵结合产生影响[9]。但 E2在两组间差异无统计学意义,可能是采血时间、检验水平及样本数量的差异所致,需进一步研究。

目前多数观点认为输卵管积水可以影响胚胎的发育,如李朋粉等[10]认为输卵管积水可影响人囊胚形成及囊胚质量。Strandell等[11]认为输卵管积水通过如产生炎性因子,或因子受体表达增加,积水本身的毒性等都可以造成胚胎毒性及低移植率,但输卵管积水是否影响到卵子正常受精尚无定论,虽然也有实验发现输卵管积水可以对鼠精子的质量产生影响[12]。但对人精子的影响需要进一步的论证。本文虽然受精正常和低下两组输卵管积水单因素分析有统计学意义,但将其纳入非条件 logistic多因素回归分析发现两组间差别无统计学意义。

综上认为：超声监测卵泡数和合理的 MⅡ卵子数是有利于提高女性受精功能的因素,而过多或过少的获卵数是降低女性受精功能因素,合理的超排方案是获得优质卵子的前提。

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4 Claudio C,Philippe J.Isolated fetal pyelectasisand chromosomal abnormalities[J].Am JObstet Gyneco,2005,193(9)：732-738.

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7 苗本郁,周灿权,庄广伦.控制性促超排卵治疗周期中卵泡生长速率的观察[J].生殖医学杂志,2000,9(1)：28-32.

8 Yoldemir T,Fraser IS.The effect of retrieved oocyte count on pregnancy outcomes in an assisted reproduction program[J].Arch Gynecol Obstet,2010,281(3)：551-556.

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11 Strandell A,Lindhard A.Why does hydrosalpinx reduce fertility?The importance of hydrosalpinx fluid[J].Hum Reprod,2002,17(5)：1141-1145.

12 de Vantéry ArrighiC,Lucas H,El-Mowafi,D etal.Effects of human hydrosalpinx fluid on in-vitro murine fertilization[J].Hum Reprod,2001,16(4)：676-682.