一株同时与痢疾志贺菌和侵袭性大肠埃希菌血清凝集的类志贺邻单胞菌

邹红敏

（四川省资中县疾病预防控制中心，四川 资中 641200）

资中县一酒楼曾发生一起食物中毒，我们从该酒楼2份食物留样、6份患者直肠拭子中分离出一株类志贺邻单胞菌。该菌不仅与痢疾志贺菌和侵袭性大肠埃希菌有着共同抗原，与两菌诊断血清发生交叉凝集，还与志贺菌有着极为相似的生化反应。

1 流行病学概况

1.1 基本情况

资中县某酒楼同餐进食460余人，有209人先后出现腹痛、腹泻、恶心、呕吐等消化道症状，腹痛以上腹部和脐周持续性、阵发性绞痛为主，腹泻多为黄绿色水样便，少数有血便，无明显里急后重症状。血常规结果：白细胞总数增高者占57.7%（45/78），中性粒细胞增高者占46.2%（36/78）。大便常规结果：白细胞“+”6例，有红细胞异常5例，大便隐血试验阳性2例，发现吞噬细胞2例。

1.2 流调医生开具的检验项目

志贺菌、沙门菌、致泻性大肠埃希菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌。

2 实验室检验

2.1 样品采集

采集食物留样12份，呕吐物2份，患者直肠拭子12份，从业人员直肠拭子5份。

2.2 检验项目与方法

志贺菌、沙门菌、致泻性大肠埃希菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌。按GB/T 4789-2003《食品卫生微生物学检验》[1]、《霍乱防治手册》（第五版）[2]和GB 14938-94《食物中毒诊断标准及技术处理总则》[3]进行检验和判断。

2.3 样品处理及分离鉴定

2.3.1 直肠拭子直接划线接种于SS、Mac、4号琼脂平板、碱性琼脂平板、血平板及氯化钠结晶紫平板，37℃孵育24h。

2.3.2 所有样品都经GN、MM、3.5%氯化钠结晶紫、7.5%氯化钠肉汤、碱性胨水增菌后，划线接种于SS、Mac、4号琼脂平板、碱性琼脂平板、血平板及氯化钠结晶紫平板，37℃孵育24h。

2.3.3 挑取SS、Mac平板上扁平、无色、透明或半透明、光滑、细小的可疑菌落，接种三糖铁斜面和3.5%氯化钠三糖铁斜面。

2.3.4 挑取 4号琼脂平板、碱性琼脂平板上扁平、无色、半透明、光滑的可疑菌落，与O1、O139群霍乱诊断学清不凝集。

2.3.5 挑取氯化钠结晶紫平板扁平、无色、透明的可疑菌落，接种3.5%氯化钠三糖铁斜面。

2.3.6 挑取血平板上溶血、无色、扁平、细小的可疑菌落进行革兰染色，为革兰阴性杆菌，两端钝园。接种三糖铁斜面和3.5%氯化钠三糖铁斜面。

2.3.7 根据三糖铁的结果，选取底层产酸不产气，斜面不变的培养物，挑取菌苔分别与志贺菌、沙门菌诊断学清做玻片凝集试验，同时接种11种微量生化反应管和做药敏试验。

2.4 结果

从2份食物留样、6份患者直肠拭子中分离出一株可疑菌，三糖铁的结果为底层产酸不产气，斜面不变，无动力，不产H2S。氧化酶阴性。与志贺四种多价血清、痢疾志贺菌2型血清凝集，盐水对照不凝集。11种微量生化反应为：发酵葡萄糖产酸不产气；鸟氨酸阳性；赖氨酸、H2S、靛基质、乳糖、卫矛醇、苯丙氨酸、尿素、枸橼酸盐均为阴性。根据血清学结果，结合生化反应，初步判定该菌为痢疾志贺菌2型。但与患者无明显里急后重的症状不吻合。再用侵袭性大肠埃希菌诊断血清做凝集试验时发现该菌与侵袭性大肠埃希菌OK多价Ⅰ、O28ac∶K73血清发生凝集。于是怀疑该菌不是痢疾志贺菌。由于我室条件有限，立即向上级请求技术资源。

四川省CDC的老师赶到我室，对该菌重新鉴定，发现该菌除与痢疾志贺菌2型血清凝集外，还与侵袭性大肠埃希菌血清凝集，即作出“不确定为痢疾志贺菌2型”的判断。因基层试验条件有限，带回省CDC做进一步鉴定。经全面生化，最后鉴定为“类志贺邻单胞菌”。

药敏试验结果显示该菌对氯霉素、四环素、痢特灵、先锋霉素、复方TMP敏感，对青霉素、链霉素耐药。

3 讨 论

根据流行病学调查、患者临床表现和实验室检测结果，依据GB 14938-94《食物中毒诊断标准及技术处理总则》，判断这是一起由类志贺邻单胞菌引起的食物中毒。

氧化酶试验是肠杆菌科与弧菌科细菌鉴定的“分水岭”。该菌氧化酶试验四川省CDC为阳性，而我室却为阴性。原因是在滴加盐酸二甲基对苯二胺溶液后，显淡粉红色，再加α-萘酚溶液后，不显蓝色，因此错误判断为阴性，为该菌的误判埋下了伏笔。

类志贺邻单胞菌为弧菌科邻单胞菌属中的一个种，菌体一端有数根鞭毛，动力阳性。而本菌动力却为阴性，可能与该菌是从食物留样中分离出来，细菌在加热过程中受损有关。

此次病原菌的分离，暴露出基层疾控中心的很多问题。如检验人员经验不足、设备简陋、应急物资的准备不充分等。提醒我们应该加强业务培训，从不同渠道获取专业知识，积极积累经验，以提高自身业务水平。在细菌鉴定过程中，不能仅凭血清凝集及部分生化结果吻合就下结论。另外建议疾控中心设有用于购买应急物资的专项资金，不将这部分成本也计入检验科，保证我们有足够的贮备以应对不时之需。

[1] GB/T 4789-2003《食品卫生微生物学检验》[S].2003.

[2] 中华人民共和国卫生部疾病控制司.霍乱防治手册[S].5版.北京：人民卫生出版社,1999..

[3] GB 14938-94《食物中毒诊断标准及技术处理总则》[S].1994.