石榴皮鞣质的药理学研究进展

付 军，李 正

(重庆市九龙坡区第一人民医院，重庆 400050)

石榴皮为石榴科植物石榴 Punica granatun L.的干燥果皮，性温，味甘酸涩，具有涩肠、止血、收敛止泻以及杀虫功效[1]。石榴皮主要成分为鞣质，含量约为10.4～21.3%;其他成分包括蜡0.8%，树脂 4.5% ， 甘露醇 1.8% ，糖 2.7% ， 树胶 3.2% ， 菊粉 1.0% ，黏质0.6%，没食子酸4.0% 等[2]。鞣质又称单宁，是一类复杂的高分子多酚类化合物能与蛋白质结合，具有涩味和收敛性。因其化学结构而分为二大类，一类为可水解鞣质，另一类为缩合鞣质。石榴皮中的鞣质以水解性鞣质为主，因而具有水解性鞣质的药理作用。随着科学技术的提高，对其化学成分的研究有了较大进展，其药理活性也日益受到重视，现就近几年相关研究综述如下。

1 石榴皮鞣质的药理作用

1.1 对胃肠道系统的作用

李定格等[3]研究了石榴叶水浸剂灌胃给予对实验动物胃肠道系统的影响，结果显示水浸剂能显著增强大鼠胃蛋白酶活性，促进胆汁分泌，加强大鼠小肠蠕动。他们还进一步研究观察石榴叶水浸剂对大鼠胃酸分泌的影响，大鼠16只(雌雄各半)，结果显示可显著抑制大鼠胃液分泌和总酸排出量，明显降低大鼠胃溃疡发生率，并减少胃溃疡面积和降低胃溃疡程度[3－4]。将石榴皮的70%甲醇提取物以250 mg/kg和500 mg/kg灌胃给药，对阿司匹林和乙醇引起的大鼠胃损伤抑制率分别为22.37%和74.21%以及21.95%和63.41%;同时使大鼠体内的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH－Px)水平上升到与正常大鼠接近[5]。石榴皮水提取物200，400，800 mg/kg灌胃能不同程度降低结肠炎模型大鼠黏膜损伤指数(CMDI)、髓过氧化物酶(MPO)活性，减少丙二醛(MDA)含量，提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性[6]。胡伟等[7]采用琼脂稀释法检测石榴皮水煎剂对幽门螺杆菌(HP)甲硝唑耐药株和敏感株的最低抑菌浓度(MIC)，并计算MIC50，MIC75，MIC90。结果显示，石榴皮对幽门螺杆菌的 MIC范围为7.8～500.0g/L，对幽门螺杆菌甲硝唑耐药株和敏感株的 MIC50分别为 29.9 g/L 和 28.0 g/L，MIC75分别为 65.1 g/L 和 59.1 mg/L，MIC90分别为131.1 g/L和115.9 g/L。说明石榴皮对幽门螺杆菌有一定体外抑制幽门螺杆菌作用，并对甲硝唑耐药幽门螺杆菌株及敏感株都有效。

1.2 体外抗菌和抗病毒作用

石榴皮中的主要活性成分鞣质，是一种具有沉淀蛋白质特性的水溶性多元酚类化合物，抗病毒功能就是利用这一特性。不同浓度的石榴皮水提取物与细胞作用2 h后接种病毒，结果表明，随着浓度的加强，抗病毒作用加强。将有抗Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV－2)作用的石榴皮水煎剂用明胶微球除尽石榴皮中的鞣质成分，石榴皮中抗病毒作用明显减弱[8]。石榴皮具有明显的直接杀灭乙型肝炎病毒(HBV)病毒作用。400μg/mL石榴皮水煎剂使乙型肝炎病毒轻度聚集，但结构尚完整;800μg/mL使乙型肝炎病毒中度聚集，有少许结构破坏;1600μg/mL和3200μg/mL导致乙型肝炎病毒明显聚集，常见颗粒衣壳缺失、核壳破坏现象。乙型肝炎病毒与不同浓度药物作用后，与抗体结合的抑制作用呈现剂量依赖关系。石榴皮对乙型肝炎病毒DNA聚合酶有明显的抑制作用，半数致死量(IC50)为710μg/mL，药物浓度增高，对DNA聚合酶的抑制作用也随之加强[9]。石榴皮中的鞣质因能凝固微生物体内的原生质及对多种酶的影响，对多种细菌、真菌有抑制作用。如石榴皮的水提物对金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌、大肠杆菌、黑曲霉的平均抑菌浓度分别为 10.7，73.4，340.5，17.3μg/mL，对绿脓杆菌、白色念珠菌的最低抑菌浓度是 100μg/mL[10－12]。

1.3 抗肿瘤和抗癌变

石榴皮水解物鞣花酸，能阻止某些致癌物质引发的癌症。以色列Technion技术研究所报道，石榴皮有明显的抗乳腺癌作用。从石榴皮中提取的逆没食子鞣质，纯化后对小鼠的药理试验表明，体内逆没食子鞣质被水解为鞣花酸，鞣花酸以4g/kg的剂量饲养A/J小鼠可使由亚硝胺酮[NNK，4－(methylnitrosamino)－1－(3－pyridy1)－1－butanone]诱发的多种肿瘤发生率被抑制54%[13]。石榴皮的丙酮提取物以2 mg/kg小鼠提前30 min给药，能调整促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)和细胞核转录因子(NF－kappaB)通道，并且能抑制CD－1小鼠皮肤肿瘤的发生[14]。同时有研究报道，50 mg/L的石榴汁中所含的鞣酸单宁能通过调整细胞的转录因子和信号蛋白来抑制HT－29结肠癌细胞的增殖和吞噬作用[15]。

1.4 抗心脑血管疾病

鞣质是一类作用很强的自由基清除剂和脂质过氧化抑制剂，其中水解鞣质强于缩合鞣质，而后者又远强于小分子酚类(没食子酸和儿茶素等)，并且鞣质对多种自由基有广谱清除作用。鞣质在抗心血管疾病方面的作用突出体现在抗高血压上。实验证实，这种降压活性与体液中的电解质Ca络合有关而不影响心率。石榴叶鞣质150 mg/kg和75 mg/kg给予对高脂大鼠的血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)有显著降低作用，300 mg/kg和75 mg/kg对高血糖伴高血脂小鼠的甘油三酯降低作用明显，体外抑制羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG－CoA)的最低有效浓度为1×10－6g/mL，抑制率15.16%。研究发现，石榴叶鞣质呈剂量依赖性抑制实验性高脂血症动物血浆总胆固醇和甘油三酯水平增高，但对低密度脂蛋白(LDL－C)水平均无明显作用，显示出较好的调血脂作用。体外试验显示，石榴叶鞣质能明显抑制HMG－CoA还原酶活性，其 MIC为1×10－6g/mL，抑制率为15.16%;辛伐他汀的 MIC为1×10－4g/mL，抑制率为17.4%。石榴叶鞣质的效价较辛伐他汀强100倍左右，同时也提示石榴叶鞣质降低胆固醇的作用机制与抑制该酶活性有关。此外石榴皮提取物对氧化应激人脐静脉内皮细胞(ECV304)具有保护作用[16]。在氧化应激状态下，石榴皮提取物(高、中、低质量浓度分别为200，100，50 mg/L)可使人脐静脉内皮细胞存活率显著性升高;乳酸脱氢酶释放减少，一氧化氮分泌有所恢复;并可防止细胞膜微黏度的升高;对细胞抗氧化力值与超氧化物歧化酶活性有显著保护作用;可抑制血管内皮细胞与单核细胞黏附率升高和细胞凋亡发生，并具有一定的剂量依赖关系。因此石榴皮提取物具有防治人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的作用[17]。

1.5 免疫调节作用

石榴皮醇提物100，200，400 mg/kg组分别每日灌胃，连续给药10 d。在连续给药的第5天，除空白对照组外，每只小鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX)100 mg/kg 0.2 mL，造成免疫低下模型。在连续给药的第6天，除空白对照组外，每只小鼠腹腔注射2绵羊红细胞(2SRBC)0.2 mL进行免疫。各组小鼠在末次给药24 h后处死，进行相关试验。结果显示，与空白对照组相比，免疫低下模型组抗体吸光度值和血清溶血素生成水平(HC50)均有显著下降(P＜0.01)。石榴皮醇提取物高剂量组对抗体吸光度值、血清 HC50均明显高于免疫低下模型组(P ＜0.05，P ＜0.01)[18]。

2 鞣质的毒副作用

事物的作用总是一分为二。中药成分中所含的鞣质具有可利用的一面，也存在不利的一面。有人认为，两大类鞣质中水解鞣质毒性较大，对肝脏有损害作用。五倍子鞣质、石榴皮鞣质、地榆鞣质、诃子肉质等属于水解型鞣质，应用中发现它们可使血清丙氨酸氨基酸转移酶显著高于正常，表现出严重肝损害的副作用;而四季清、虎杖、黄柏中的鞣质多为缩合型，对肝脏基本无毒副作用。有研究表明，口服2～4.6 g/kg鞣质可引起小鼠肝脏毒性[19]。而石榴皮所含的鞣质主要是水解单宁，其毒性主要是直接肝脏毒性，长期大量应用可引起肝小叶中央坏死、脂肪肝、肝硬化[20]，过量服用可引起血清丙氨酸氨基酸转移酶显著高于正常，严重损害肝脏[21]，提示石榴皮鞣质存在着潜在的毒性。尽管其有较明显的肝毒性，但比现代医学常用的化学药物对全身的毒副作用小，仍有良好的应用与开发前景。

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