高效液相色谱法测定维U颠茄铝镁片中硫酸阿托品含量

刘益庆，陈乃江

(江苏省连云港市药品检验所，江苏 连云港 222006)

高效液相色谱法测定维U颠茄铝镁片中硫酸阿托品含量

刘益庆，陈乃江

(江苏省连云港市药品检验所，江苏 连云港 222006)

目的用高效液相色谱法测定维U颠茄铝镁片中硫酸阿托品的含量。方法采用Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6mm，5 μm)，以0.5%三乙胺溶液(0.2%四氢呋喃，用冰醋酸调pH至6.10)－乙腈(80∶20)为流动相，检测波长为210 nm，柱温为室温。结果硫酸阿托品质量浓度在 24.18～290.16 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 8)，平均回收率为 97.21%，RSD=1.1%(n=5)。结论该法简便、快速、准确且专属性强，可用于产品的质量控制。

维U颠茄铝镁片;硫酸阿托品;高效液相色谱法;含量

维U颠茄铝镁片为复方制剂，组分有维生素U、氢氧化铝、三硅酸镁和颠茄流浸膏。目前，还没有特定的方法能用来对颠茄流浸膏成分进行定量分析，故建立定量方法极为重要。颠茄流浸膏的定量难在提取，因为维U颠茄铝镁片中的颠茄流浸膏成分很少，要尽可能地提取完全，才能准确地定量。虽经过多次摸索，笔者也只能检测出硫酸阿托品成分。本试验以硫酸阿托品含量为指标，用高效液相色谱(HPLC)法对颠茄流浸膏进行了定量分析。

1 仪器与试药

2695－2996型高效液相色谱仪(美国Waters公司);BP211d型电子分析天平(德国赛多利斯公司);超声波发生器(上海吉理超生仪器厂)。硫酸阿托品对照品(中国药品生物制品检定所，批号为100040－200510);维U颠茄铝镁片(山东新星药业有限公司，批号为 20090918，20091028，20100101);阴性样品(自制);乙腈(色谱醇)，水(超纯水)，三乙胺、冰醋酸、四氢呋喃(分析纯)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Phenomenex C18柱(250 mm × 4.6 mm ，5 μm);流动相:0.5%三乙胺溶液(0.2%四氢呋喃，用冰醋酸调 pH至6.10)－乙腈(80∶20);检测波长:210 nm;柱温:室温。

2.2 溶液制备

精密称取硫酸阿托品对照品36.27 mg，加甲醇至100 mL量瓶，超声溶解并用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取本品25片，研磨成细粉，置分液漏斗中，加稀乙醇150 mL，振摇使溶解，加氨试液5 mL，迅速用氯仿振摇提取3次，每次15 mL，合并氯仿液，水层用1 mol/L氢氧化钠溶液提取，再用氯仿振摇提取10次，每次20 mL，合并所有的氯仿液，水浴蒸干，残渣用加甲醇溶解并定量转移至5 mL的量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。取阴性对照品，重复以上操作，制成阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

系统适用性试验:分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液各10 μL，注入液相色谱仪测定。理论板数按硫酸阿托品峰计算不低于3 000，并且阿托品峰与其他成分峰分离良好。阴性对照品溶液色谱中，在与供试品溶液色谱中硫酸阿托品相应位置上未出现吸收峰，表明处方中其他成分对硫酸阿托品色谱峰测定无干扰(图1)。

标准曲线绘制:精密量取对照品溶液，分别制成质量浓度为24.18，48.36，72.54，145.08，290.16μg/mL的溶液，依次进样10 μL测定峰面积。以峰面积(Y)对质量浓度(X)进行回归，得到回归方程 Y=14 739 X+42 898，r=0.999 8(n=5)。结果表明，硫酸阿托品质量浓度在24.18～290.16 μg/mL 范围内与峰面积线性关系良好。

图1 高效液相色谱图

精密度试验:取同一质量浓度的对照品溶液，重复进样5次，测定其峰面积。结果峰面积的 RSD为1.0%(n=5)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，分别于 0，2，4，6，8，12，20 h 时进样，测定峰面积。结果的 RSD为0.8%(n=7)，表明供试品溶液在12 h内稳定。

重现性试验:取同一批样品5份，按供试品溶液制备方法制备溶液并依法测定。结果的 RSD为1.8%(n=5)，表明方法重现性良好。

加样回收试验:取已知含量的样品适量，加入对照品溶液，依法测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 硫酸阿托品加样回收试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

取3批样品，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，测定峰面积，按外标法计算含量。结果批号为 20100101，20090918，20091025的样品中硫酸阿托品含量分别为0.044 61，0.044 68，0.044 57 mg/g。

3 讨论

维U颠茄铝镁片所含的颠茄流浸膏成分很少，必须多次反复地提取，才有可能提取完全。笔者试过很多方法:用甲醇超声溶解，蒸干后用氯仿－水萃取;用环己烷超声提取;水溶后加乙腈，蒸干后氯仿萃取。几种方法的效果都不是太好。最后发现用稀乙醇溶解，氨试液中和，氯仿萃取，水层调节好pH，再继续萃取，能得到比较完全的硫酸阿托品成分。

关于流动相，笔者比较了水－甲醇，缓冲盐－乙腈，水－缓冲盐－乙腈。通过不断地摸索、调节流动相的比例和pH，最后选定0.5%三乙胺溶液(0.2%四氢呋喃，用冰醋酸调节 pH至6.10)－乙腈(80 ∶20)。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:化学工业出版社，2005:425－426.

[2]中华人民共和国卫生部药典委员会.化学药品地方标准上升国家标准(第六册)[M].北京:化学工业出版社，2002:224－225.

[3]刘文英.药物分析[M].第5版.北京:人民卫生出版社，2002:183.

[4]汪茂田，谢培山，王忠东，等.天然有机化合物提取分离与结构鉴定[M].北京:化学工业出版社，2004:112－140.

Determination of Atropine Sulfate in Vitamin U，Aluminium Hydroxide and Mangesium Trisilicate Tablets by HPLC

Liu Yiqing，Chen Naijiang
(Lianyungang Institute for Drug Control，Lianyungang， Jiangsu， China 222006)

ObjectiveTo establish a HPLC method for the determination of atropine sulfate in Vitamin U，Aluminium Hydroxide and Mangesium Trisilicate Tablets.Methods The HPLC system consisted of the Gemini Phenomenex C18column(250 mm × 4.6mm，5 μm)，with 0.5% triethylamine solution(0.2% tetrahydrofuran，adjusting pH value to 6.10 with glacial acetic acid)－ acetonitrile(80 ∶20)as the mobile phase and the detection wavelength of 210 nm.Results The linear range of atropine was 24.18 － 290.16 μg/mL(r=0.999 8).The mean recovery rate was 97.21%，RSD=1.1%(n=5).Conclusion This method is proved to be simple，rapid，accurate and exclusive.

Vitamin U，aluminium hydroxide and mangesium trisilicate tablets;atropine sulfate;HPLC;content

R927.2;R975+.7

A

1006－4931(2011)10－0035－02

刘益庆，男，药师，主要从事药品检验与研究工作，(电话)0518－85836781(电子信箱)liuyiqing510@163.com。

2010－06－17;

2010－11－09)