α-取代-E-3,5-二羟基苯丙烯酸的合成及其抗炎活性*

李 静, 敖桂珍, 绪广林, 郑丽玲, 张 璐

(1. 苏州大学 药学院,江苏 苏州 215123; 2. 南京师范大学 生命科学院 新药研究中心,江苏 南京 210009)

非甾体抗炎药(NSAIDs)的胃肠道(GI)损伤等不良反应是限制该类药物临床应用的最大障碍。自从2004年罗非昔布因可增加心脏事件和脑卒中的风险而在全球范围内被召回，引起人们对NSAIDs安全性的广泛关注。环氧酶(COX)/5-脂氧酶(5-LOX)双重抑制剂特别是COX-2/5-LOX双重抑制剂成为今后NSAIDs研究的一个热点和焦点。敖桂珍等[1]曾报道α-取代的对甲砜基苯丙烯酸类化合物具有较强的抗炎作用和较低的GI副作用，后来Moreau A[2]证实这类化合物具有COX-2/LOX双重抑制作用，且对COX-2的选择性较好。Pontiki E等[3]发现α-苯基-3,5-二叔丁基-2-羟基-苯丙烯酸类对LOX有较好的抑制活性。

本课题组合成的一些α-芳基-3,5-二甲氧基苯丙烯酸(3a～3c)抗炎活性显著强于阿司匹林(P<0.05)[4]。天然产物白藜芦醇(3,4′,5-三羟基-二苯乙烯)具有显著的抗炎作用，目前尚未发现白藜芦醇有明显的毒副作用。如果将3,5-二甲氧基苯丙烯酸`的甲氧基脱去甲基，生成物中的3,5-二羟基苯乙烯结构与白藜芦醇部分结构重合，而且生成的酚羟基在体内可能起到俘获氧自由基的作用，使得抗炎作用增强、GI损伤进一步减少，因此本文设计并合成了三个新的α-取代-E-3,5-二羟基苯丙烯酸(4a～4c, Scheme 1),其结构经1H NMR, IR和MS确证。应用二甲苯致小鼠耳肿胀模型评价4的抗炎活性，研究结果表明它们都具有抗炎活性。其中4b与阳性对照药阿司匹林相比，表现出显著性差异(P<0.05)。

Scheme1

1 实验部分

1．1 仪器与试剂

XT5型显微熔点仪(温度未经校正);Varian UNITY INOVA 300型核磁共振仪(CDCl3为溶剂，TMS为内标)；Nicolet AVATAR 360 FT-TR型红外光谱仪(KBr压片)；Micromass TOF-MS型高分辨质谱仪。

3a～3c按文献[4]方法制备；其余所用试剂均为市售化学纯或分析纯。

1．2 合成

在圆底烧瓶中加入3a0.3 g(1 mmol)的无水二氯甲烷(8 mL)溶液，冰盐浴冷却至0 ℃以下，搅拌下缓慢滴加BBr32.0 g(6 mmol)的二氯甲烷溶液6 mL，反应30 min;再于室温反应3 h。倾入冰水中，用乙酸乙酯(3×10 mL)萃取，合并萃取液，浓缩得4a。

用类似方法合成4b和4c。

4a: 白色固体，产率83%, m.p.150 ℃～151 ℃;1H NMRδ: 5.95(s, 2H, ArH), 6.18(s, 1H, ArH), 6.72(d,J=8.8 Hz, 2H, ArH), 6.92(d,J=8.4 Hz, 2H, ArH), 7.43(s, 1H, =CH); IRν: 3 365(OH), 1 671(C=O), 1 616, 1 509, 1 518, 1 427(C=C), 675(C=C-H) cm-1； EI-MS: Cacld for C15H12O5272.068 5, found 272.068 0。

4b: 白色固体,产率71%, m.p.109 ℃～110 ℃;1H NMRδ: 5.94(s, 2H, ArH), 6.18(s, 1H, ArH), 7.19(d,J=8.1 Hz, 1H ArH), 7.41(d,J=8.4 Hz, 1H, ArH), 7.64(s, 1H, ArH), 7.68(s, 1H, =CH); IRν: 3 388(OH), 1 681(C=O), 1 626, 1 585, 1 473, 1 420(C=C), 673(C=C-H) cm-1； EI-MS: Cacld for C15H10Cl2O4323.995 6, found 323.995 5。

4c: 棕色固体,产率85%, m.p.183 ℃～184 ℃;1H NMRδ: 6.43(s,J=16.0 Hz, 1H, =CH), 6.52(s, 1H, ArH), 6.69(s, 2H, ArH), 7.75(d,J=16.0 Hz, 1H, =CH); IRν: 3 282(OH), 1 602(C=O), 1 509, 1 457, 1 427(C=C), 643(C=C-H) cm-1； EI-MS: Cacld for C9H8O4180.042 3, found 180.041 8。

2 结果与讨论

2.1 合成

以合成4a为例，考察了反应条件对BBr3脱甲基的影响。

(1) BBr3用量的影响：理论上n(3a) ∶n(BBr3)=1 ∶3;但在此条件下脱甲基反应不完全，TLC显示反应只有部分脱甲基的产物。当n(3a) ∶n(BBr3)=1 ∶6时，反应基本完全。

(2) 溶剂的影响：溶剂的性质对BBr3的反应活性有一定的影响，以二氯甲烷和甲苯为例。在二氯甲烷中室温下即可以迅速进行反应。而在甲苯中室温下几乎不反应，当温度升高到40 ℃才开始反应，且脱甲基不完全。分析原因可能是因为甲苯具有离域的π电子，属于弱Lewis碱，能与BBr3形成酸碱复合物，降低了BBr3的活性。

(3) 温度的影响：首先在冰浴冷却下反应30 min，然后控制在室温即可。温度升高会发生聚合副反应。

2.2 抗炎活性

应用二甲苯致小鼠耳肿胀模型评价4的抗炎活性。取小鼠70只，雌雄兼用，体重(20 ± 2) g，随机分7组，每组10只，给药前禁食12 h，自由饮水。灌胃给药。给药剂量按小鼠体重的0.2 mL·g-1的质量浓度给药。给药1 h后，每只小鼠右耳涂二甲苯20μL/只致炎，小鼠的左耳廓为空白对照。致炎1 h后处死小鼠，用直径7 mm打孔器在双耳对称处打下耳片称重。以右耳和左耳质量差异度为指标，将对照组与给药组进行统计学处理，计算抑制率。

表 1 化合物对二甲苯致炎小鼠耳肿胀的影响Table 1 Effect of compounds on xylene-induced mice ear swelling

aP<0.05,bP<0.01(阴性对照组羧甲基纤维素钠);cP<0.05,dP<0.01(阴性对照组阿司匹林)

由表1可见，4对小鼠耳廓二甲苯致炎的抑制作用见表1。4a～4c均表现出一定的抗炎活性，而且抑制率高于阿司匹林。其中4b和4c与阴性对照组羧甲基纤维素钠相比，表现明显抗炎活性(P<0.01,P<0.05)。3b转化为4b后，抑制率由56.4%增加到69.1%，而且与阿司匹林相比，有显著性差异(P<0.05)。

[1] 敖桂珍,张奕华,季晖,等.α-取代对甲磺酰基苯丙烯酸的合成及抗炎活性[J].中国药科大学学报,2002,33(6):460-464.

[2] Moreau A, Chen Q H, Knaus E E,etal. Design,synthesis,and biological evaluation of (E)-3-(4-methanesulfonylphenyl)-2-(aryl)acrylic acids as dual inhibitors of cyclooxygenases and lipoxygenases[J].Bioorg Med Chem,2006,14(23):7716-7727.

[3] Pontiki E, Hadjipavlou-Lintina D. Synthesis and pharmacochemical evaluation of novel aryl-acetic acid inhibitors of lipoxygenase, antioxiadants, and anti-inflammatory agents[J].Bioorg Med Chem,2007,15(17):5819-5827.

[4] 郑丽玲,绪广林,敖桂珍,等.α-取代的3,5-二甲氧基苯丙烯酸的合成及其抗炎活性[J].应用化学,2008,25(4):481-484.