尿素维E珍珠乳膏的制备及质量控制

汪 刚，张 松，刘效筠（湖北黄石市第一医院药剂科，黄石市 435001）

尿素维E珍珠乳膏的制备及质量控制

汪 刚＊，张 松，刘效筠（湖北黄石市第一医院药剂科，黄石市 435001）

目的：制备尿素维E珍珠乳膏并建立其质量控制方法。方法：以尿素、维生素E、珍珠粉等为组方，用水包油基质制备尿素维E珍珠乳膏；分别采用高效液相色谱法和紫外分光光度法测定制剂中维生素E和尿素的含量。结果：所制制剂为白色乳膏，各项检查均符合《中国药典》相关规定；维生素E、尿素检测浓度的线性范围分别为40.0～200.0、125.0～500.0μg·mL－1（r＝0.9999、0.9998），平均回收率分别为99.9%（RSD＝1.0%，n＝9）、100.4%（RSD＝1.4%，n＝9）。结论：本制剂制备工艺简单，质量控制方法均较灵敏、准确、重复性好、专属性强，可用于该制剂的质量控制。

尿素维E珍珠乳膏；制备；质量控制；尿素；维生素E；高效液相色谱法；紫外分光光度法

尿素维E珍珠乳膏（鄂药制字H20081867）系黄石市第一医院自行研制的复方制剂，该制剂由尿素、维生素E、珍珠粉、甘油等主药组成，主要用于皮肤角化症及皮肤干燥瘙痒症的治疗及祛斑美容、防晒祛痘。该制剂制备工艺简单，质量稳定，经医院多年临床验证显示，疗效显著。为有效控制制剂质量，本文参照相关文献[1～4]，用化学及高效液相色谱（HPLC）法对其中的尿素、维生素E（VE）进行定性鉴别；并采用紫外分光光度法及高效液相色谱法对制剂中尿素及VE分别进行含量测定。现将其制备及质量控制方法报道如下。

1 仪器与试药

紫外分光光度计（美国Waters公司）；HPLC仪（美国Agilent公司）。

尿素维E珍珠乳膏（黄石市第一医院制剂室，批号：20090101、20090208、20090316，含量：尿素5g·100g－1，VE 2g·100g－1）；尿素标准品（批号：0963-200803，纯度：99.99%）、VE标准品（批号：0978-200805，纯度：99.99%）均由中国药品生物制品检定所提供；VE原料药（天津天药药业股份有限公司，批号：091016，纯度：98.95%）；尿素原料药（湖南省芙蓉制药厂，批号：091127，纯度：99.63%）；甘油、珍珠粉、依地酸二钠、氮酮均为药用标准，甲醇、乙醚为色谱纯，硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、三乙醇胺、氢氧化钠均为分析纯，水为注射用水。

2 处方与制备

2.1 处方

尿素50g，VE 20g，甘油20mL，珍珠粉2g，氮酮10mL，依地酸二钠0.1g，冷霜加至1000g。

2.2 制备

2.2.1 冷霜的制备。取硬脂酸（120g）、单硬脂酸甘油酯（35g）、液体石蜡（50g）、凡士林（10g）、羊毛脂（50g），加入油相加温反应釜中，加热到80℃熔融保温备用；另取三乙醇胺（4g）、注射用水（730mL），加入水相加温反应罐中加热到80℃溶解保温；再将80℃油相基质缓慢加入到80℃的水相中，边加边朝同一方向搅拌至乳化成型即得冷霜。

2.2.2 尿素维E珍珠乳膏的制备。取尿素，珍珠粉研细过筛后，用甘油研匀，加入适量冷霜中搅匀，依次加入VE、氮酮、依地酸二钠，边加边搅拌，将冷霜加至1000g，搅匀，即得。

3 质量控制

3.1 性状

本品为白色乳膏。

3.2 鉴别[1]

3.2.1 尿素。取本品1g，加氢氧化钠试液1mL，加热，即有氨臭能使湿润的红色石蕊试纸变蓝。

3.2.2 VE。在“样品含量测定”项下的色谱中，供试品溶液应呈现与VE标准品保留时间相同的色谱峰。

3.3 检查

3.3.1 装量。本品标示装量为30g，经检测供试品结果符合规定。

3.3.2 微生物限度。按《中国药典》2005年版微生物限度检查法检测符合规定[3]。

3.3.3 其他。应符合《中国药典》2005年版二部附录ⅠF乳膏剂项下的各有关规定[3]。

3.4 含量测定

3.4.1 VE。

（1）溶液制备。①供试品溶液：精密称取供试品1g，置于烧杯中，加聚山梨醇酯2g，充分搅拌10min，加水30mL搅拌使溶解，转移至100mL容量瓶中，加水分次洗涤烧杯，洗液并入量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，过滤即得供试品溶液。②标准品溶液：精密称取VE标准品约20mg，置于烧杯中，加入聚山梨醇酯0.2g，充分搅拌5min，其余操作同“供试品溶液的制备”项下方法即得。

（2）色谱条件。色谱柱：Kromasil C18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇；流速：1.0mL·min－1；柱温：30℃；检测波长：284nm，理论板数按VE峰计算应不低于2000。

（3）检测波长选择。取标准品溶液在200～400nm波长范围内扫描，结果VE在285nm波长处有最大吸收，故选择其为测定波长。

（4）专属性试验。取供试品溶液与标准品溶液、不含VE的空白溶液（取除VE外，其余组方及制备方法与样品相同的空白乳膏，同“供试品溶液”项下方法制备空白溶液），分别进样，结果供试品溶液呈现与VE标准品溶液保留时间相同的色谱峰，而空白溶液未见该色谱峰，说明空白样品不干扰供试品的测定，色谱详见图1。

图1 高效液相色谱图A.标准品；B.供试品；C.空白样品；1.VEFig 1 HPLC chromatogramsA.reference substance；B.test sample；C.blank sample；1.vitamin E

（5）线性范围。精密称取VE约40mg，按标准品溶液的制备方法制备成浓度为40.0、80.0、120.0、160.0、200.0μg·mL－1系列标准品溶液。分别进样10μL，测定峰面积，以浓度（C）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标进行线性回归，得线性方程：A＝228C－2441.8（r＝0.9999，n＝5）。结果VE检测浓度的线性范围为40.0～200.0μg·mL－1。

（6）稳定性试验。取供试品溶液分别于0、1、2、4、8h分别测定其峰面积，结果RSD＝0.66%，结果表明待测溶液在8h内稳定。

（7）回收率试验。取空白样品9份，分别精密加入VE标准品溶液适量（约相当于制剂中VE含量的80%、100%、120%），依法测定VE含量，计算回收率，结果见表1。

表1 回收率试验结果Tab 1 Results of recovery test

（8）精密度试验。取同一批号样品5份，制备成供试品溶液5份，分别进样10μL，依法测定其含量，结果，RSD＝1.2%，表明本方法精密度良好。

（9）样品含量测定。取供试品3批，每批2份，制备成供试品溶液，精密吸取10μL，进样测定。按外标法定量，用线性方程求得样品含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果Tab 2 Content determination of samples

3.4.2 尿素。

（1）溶液的制备。①标准品溶液：精密称取尿素标准品0.25g，加10%氯化钠溶液制成浓度为250μg·mL－1的标准品溶液。②供试品溶液：精密称取样品0.5g，置于烧杯中，加10%氯化钠溶液20mL，置于水浴上加热，充分搅拌使尿素溶解，置于冰水浴中冷却，滤过，将滤液用100mL容量瓶收集，沉淀物用10%氯化钠溶液同法处理4次（20、20、15、15mL），滤过后的滤液均并入量瓶中，用10%氯化钠溶液稀释至刻度，摇匀，即得。

（2）检测波长选择。取标准品溶液4mL，置于具塞试管中，精密加对二甲氨基苯甲醛溶液（对二甲氨基苯甲醛2g→94mL乙醇及6mL盐酸）4mL，在暗处放置20min，显色后在400～450nm波长范围内扫描，结果尿素呈现一宽幅吸收，最大吸收波长约为430nm，故选择其为测定波长。

（3）专属性试验。取本项下标准品溶液与供试品溶液及不含尿素的空白溶液（取除尿素外，其余组方及制备方法与样品相同的空白乳膏，以“供试品溶液”项下的方法制备空白溶液），分别按“检测波长选择”项同法处理后进行紫外扫描。结果供试品溶液与标准品溶液在430nm波长处呈现有相同的吸收峰，而空白溶液呈一直线，在430nm波长处未见有吸收，说明空白样品不干扰供试品的测定。紫外吸收光谱详见图2。

图2 紫外吸收光谱A.标准品；B.供试品；C.空白样品；1.尿素Fig 2 UV absorption spectrumA.reference substance；B.test sample；C.blank sample；1.urea

（4）线性范围。精密称取尿素标准品0.25g，置于100mL容量瓶中，加10%氯化钠溶液，并稀释至刻度，精密量取0.5、1、1.5、2、2.5mL置于10mL容量瓶中，加10%氯化钠溶液至刻度，摇匀，制成系列标准品溶液。各精密量取5mL，分别置于具塞试管中，精密加对二甲氨基苯甲醛溶液（对二甲氨基苯甲醛2g→94mL乙醇及6mL盐酸）4mL，在暗处放置20min，并以10%氯化钠溶液4mL，同法处理作空白，照分光光度法在430nm波长处测定吸光度。以浓度（C）为横坐标、吸光度（A）为纵坐标进行线性回归，得线性方程：A＝0.0042C－0.004（r＝0.9998，n＝5）。结果尿素检测浓度的线性范围为125.0～500.0μg·mL－1。

（5）稳定性试验。取供试品溶液分别于0、1、2、4、8h分别测定其吸光度，结果RSD＝0.75%。结果表明待测溶液在8h内稳定。

（6）回收率试验。取空白样品9份，分别精密加入尿素适量（约相当于制剂中尿素含量的80%、100%、120%），依法测定尿素含量，计算回收率，结果见表1。

（7）精密度试验。取同一批号样品5份，同法测定其含量，结果RSD＝1.8%，表明本方法精密度良好。

（8）样品含量测定。取样品3批制备成供试品溶液，依法测定含量，结果见表2。

4 讨论

本制剂是在尿素维生素E乳膏的基础上加珍珠粉等组分研制而成的水包油型乳膏制剂，方中珍珠粉具有美白祛斑、控油祛痘、消炎解毒、防晒防辐射的作用，从而提高制剂祛斑美容、防晒祛痘的功效。所得制剂质量稳定，各项检查均符合《中国药典》2005年版各有关规定，定性鉴别呈正反应。

根据VE的理化性质，并参照相关文献[2，4]，在制备供试品溶液和标准品溶液时加入表面活性剂聚山梨醇酯对VE起助溶作用，试验结果显示助溶效果显著。同时以甲醇为流动相，采用HPLC法，对标准品的峰形和供试品的分离情况进行研究，结果显示，二者在相同保留时间内其峰形完好，样品中VE峰的保留时间为14.538min，而基质（杂质）峰保留时间为2.865min，二者分离效果良好。此外参照《中国医院制剂规范》中“尿素乳膏”项下方法[1]，以10%氯化钠溶液为提取溶媒，即确保了尿素的溶解提取，又克服了VE的溶入，从而使二者得到有效分离；同时以对二甲氨基苯甲醛溶液为显色剂，采用紫外分光光度法对尿素维E珍珠乳膏中的尿素进行含量测定研究。结果显示，以HPLC法测定样品中VE含量，以紫外分光光度法测定其中尿素的含量，其方法均较灵敏，准确，重复性好，专属性强，可用于该制剂的质量控制。

[1] 中华人民共和国卫生部编.中国医院制剂规范（西药制剂）[S].第2版.北京：中国医药科技出版社，1995：140.

[2] 朴淑娟，张 纯，李朴清，等.用HPLC法测定维生素E乳剂中维生素E的含量[J].药学服务与研究，2006，6（5）：337.

[3] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（二部）[S].2005年版.北京：化学工业出版社，2005：278～279，附录ⅪJ、ⅠF.

[4] 宋金春，李韵秋，曾俊芬.HPLC法测定注射用12种复合维生素中维生素D2、维生素A与维生素E的含量[J].中国药房，2007，18（31）：2456.

Preparation and Quality Control of Urea Vitamin E Pearl Cream

WANG Gang，ZHANG Song，LIU Xiao-yun（Dept.of Pharmacy，Huangshi Municipal First Hospital of Hubei Province，Huangshi 435001，China）

OBJECTIVE：To prepare urea vitamin E pearl cream，and to establish quality control method of it.METHODS：Urea vitamin E pearl cream was prepared with urea，vitamin E，pearl powder and oil-water matrix，etc.UV spectrophotometry and HPLC were used to determine the content of urea and vitamin E.RESULTS：The prepared preparation was white cream and its quality was in line with the standard stated in Chinese Pharmacopeia（2005edition）.The linear ranges of vitamin E and urea were 40.0～200.0μg·mL－1（r＝0.9999）and 125.0～500.0μg·mL－1（r＝0.9998）.The average recoveries were 99.9%（RSD＝1.0%，n＝9）and 100.4%（RSD＝1.4%，n＝9）.CONCLUSION：The preparation method is simple.The quality control method is accurate and sensitive，specific，and reproducible for the quality control of urea vitamin E pearl cream.

Urea vitamin E pearl cream；Preparation；Quality control；Urea；Vitamin E；HPLC；UV spectrophotometry

R927.11；R986

A

1001-0408（2010）33-3126-03

＊主管药师。研究方向：医院药学。电话：0714-3062031。E-mail：wangyuhan621@163.com

2010-05-19

2010-06-09）