秦春艳, 方展强*, 唐以杰, 安 东, 杨雄邦
(1. 华南师范大学生命科学学院,广东省高等学校生态与环境科学重点实验室,广东广州 510631;2. 广东教育学院生物系,广东广州 510303; 3. 珠海淇澳-担杆岛省级自然保护区管理处,广东珠海 519000)
珠江口伶仃洋习见水生动物体内重金属含量测定与评价
秦春艳1, 方展强1*, 唐以杰2, 安 东3, 杨雄邦3
(1. 华南师范大学生命科学学院,广东省高等学校生态与环境科学重点实验室,广东广州 510631;2. 广东教育学院生物系,广东广州 510303; 3. 珠海淇澳-担杆岛省级自然保护区管理处,广东珠海 519000)
应用原子吸收分光光度计,分别测定了珠江口伶仃洋海域部分习见水生动物,包括鱼类、甲壳类、双壳类和头足类体内的镉(Cd)、铜(Cu)、锌(Zn)、铅(Pb)、铬(Cr)和镍(Ni)的含量,并使用标准物作了对照分析.结果显示,不同生物富集金属的能力不同.采用金属污染指数法比较不同生物体间对金属富集能力的差异性,用海洋生物污染评价标准以及有毒、有害物质的限量标准评价海洋生物的污染水平及食用安全性.结果显示,鱼类、虾类、双壳类和头足类都受到了不同程度的重金属污染,有的甚至达到了重污染水平(Cd、Cu、Zn、Pb、Cr),大部分海洋生物体内的某些重金属元素的含量出现严重超出食用标准的现象,如棘头梅童鱼的Cr和Pb分别超标23.93和48.05倍,长蛇鲻的Pb超标52.66倍;近江牡蛎的Cu和Cd分别超标740.27和89.59倍.结果表明,珠江口伶仃洋海域重金属污染情况较严重,应当引起有关部门的高度重视.
水生动物; 重金属; 含量与评价; 珠江口伶仃洋
海洋作为人类污染物的最后聚集地,重金属污染对其生态系统所产生的负面效应自然倍受关注.重金属的负面效应还会因其在生物体内的高富集能力和通过食物链的传递作用而对高生态位的生物产生更为严重的毒性,作为终极消费者的人类如果食用受到金属污染的海产品,健康就会受到严重威胁[1].重金属污染已成为人们最关注的问题之一.近年,国内学者已针对我国近海和潮间带水质、沉积物、底栖生物中的重金属污染现状作了大量研究,如郑长春等[2]对长江口以南沿岸海域,崔毅等[3]对胶州湾海域,陈蓉等[4]对湛江海域,吕海燕等[5]对浙江沿岸,柯才焕等[6]对厦门西港海域,阮金山等[7]对福建中、东部沿海水域,杨美兰等[8]对大亚湾海域的海洋生物体内的重金属残留展开过调查.广东是中国人口最为密集和经济最为活跃的地区之一,重金属污染问题比较普遍和严重,近年来,针对广东沿海地区以及珠江入海口周边地区,包括香港与澳门的近岸海域有关海产品重金属污染的问题已经开展了许多研究[9-13].本文以珠江口伶仃洋部分习见水生动物为研究对象,对其体内的重金属含量进行监测并初步评价其食用安全性.由于这些生物与人类关系较为密切,为重要的食用水产品,并且其种类容易辨认,其结果获得的数据也将为广东沿海的海洋环境治理提供有价值的参考资料.
1.1样品采集
采集地点 位于珠江口伶仃洋淇澳岛附近水域,由淇澳岛红树林自然保护区管理处委托当地渔民在淇澳岛大围湾红树林人工恢复林区面临伶仃洋的水域选择南、中、北等3个位置设置捕鱼网笼捕获水生动物样品;贝类样品则在附近沿岸海域采集.
样品采集 2007年2月期间由当地渔民在捕鱼网笼及附近沿岸海域收集到14种习见水生动物,包括鱼类、虾类、贝类和头足类动物样品,每一种类所获样品质量约为0.5~1.5 kg,采集种类见表1所示.样品放入聚乙烯塑料袋中,密封并做好标记,置于随身携带的冰盒中运回实验室中,鉴定种类,-20 ℃冰柜中冷冻保存至处理.
1.2样品处理
鱼类 用去离子水洗涤鱼样品,将其置于工作台上,用不锈钢解剖刀及剪刀剪除胸鳍,除去骨头,取其皮肤、肌肉和内脏,再用去离子水冲洗干净,吸水纸吸干水分.
表1 所采集的生物种类样品
虾类 虾样品解冻后,小心将其肠管道从背部取出,将附肢完全切除,用不锈钢解剖刀将腹部与头胸部及尾部分开,腹部翻下,用剪刀沿腹部外甲边缘切开后,用镊子将内侧外甲除去.用另一把不锈钢解剖刀松动腹部肌肉,并用镊子取出肌肉.用去离子水冲洗肌肉表面,并用吸水纸吸干水分,绞碎后进行匀浆.
双壳类 解冻后,用不锈钢解剖刀刮去所有表面附着物,用去离子水冲洗每一个个体,置于磁盘上,室温下吸干样品体表水分.去掉外壳,用去离子水反复冲洗壳内软组织,用吸水纸吸干多余水分,用不锈钢解剖刀取出软组织,绞碎后进行匀浆.
头足类 将采集到的枪乌贼解冻,并用去离子水反复冲洗,吸干水分后用不锈钢刀具将头部和腕部分离、绞碎后进行匀浆.
将以上各种样品的匀浆组织部分置于称量瓶中称其湿质量,然后,将样品放于有盖培养皿中,再放入低温冰箱速冻,然后转入冷冻干燥仪干燥不少于72 h至其恒质量.称量样品干质量后,计算各样品的干湿比(表2),将样品研磨成粉末状,装入体积分数5%硝酸泡过的聚乙烯封口样品袋中,密封,于干燥器中保存直至消化.
表2 样品干湿质量比
1.3样品消化
称取干样品0.25~0.30 g,置于100 mL消化罐中,分别加入HNO38 mL、H2O21 mL,装消解装置并将其放入微波消解炉中,在低能量250 W处消解5~10 min,温度上升到180 ℃,然后在180 ℃下进行消解15 min,最后通气10 min.消解程序执行完毕后,取出转盘冷却至室温,开罐,移入100 mL容量瓶中,用去离子水冲洗消解罐和滤纸,并将洗液转入容量瓶,最后用去离子水定容至100 mL,摇匀,转入用体积分数为5%HNO3溶液泡过并用去离子水洗净烘干的聚乙烯塑料瓶中,4 ℃保存待分析.同时,每9个样品放置1个标准物(Standard Oyster Tissue 1566a)和1个空白在样品消化相同条件下作对照.
1.4样品测定
使用原子吸收分光光度计(Z-2000)测定样品中Cd、Cu、Zn、Pb、Cr和Ni的含量,同时测定试剂空白液及标样,其中标准物质的各测定值和标准值的相对偏差均小于10%,符合要求.
1.5数据分析及污染评价方法
运用SPSS数据统计软件对数据进行统计分析处理.所有数据在95%置信度的水平下, 用Student’st-test检验法进行分析,比较各数据之间的差异.
本研究引入金属污染指数(MPI)以比较不同生物体之间所检测金属总含量的差异性.MPI的计算公式如下:
其中,Cn表示样品中不同金属的质量比.
采用单因子污染指数法来评价海产品体内的重金属污染状况.单因子污染指数法的计算公式为:
Pi=Ci/Si,
式中,Pi表示金属i的质量分指数,Ci表示金属i的检测数据,Si表示金属i的评价标准.当Pi<0.2时,表明重金属质量比位于正常的背景值范围内;若0.2≤Pi≤0.6,表明处于轻污染水平;若0.6 1.6质量控制 采用标准物作对照,对样品作多次重复分析及使用未受污染的试剂和仪器,在与样品分析流程相同条件下作了空白分析,未发现人为污染,标准物中的Cd、Cu、Zn、Pb、Cr、和Ni的平均回收率达86%以上,表明本实验对样品的分析方法是可靠的. 2.1鱼类、虾类、双壳类和头足类体内重金属含量 珠江口伶仃洋海域14种习见水生动物体内重金属含量的检测结果见表3. 表3 珠江口伶仃洋习见水生动物体内重金属含量 (μg/g,干质量) 从表3中可以看出,同种重金属元素在不同生物体内的含量差异较大.各种生物体内的6种重金属含量中,Cu和Zn的水平远高于其他重金属,其含量范围分别是12.71~8 565.43 μg/g和49.79~1 033.64 μg/g,Ni的含量最低,范围为0.31~2.21 μg/g.6种重金属中Cd、Cu和Zn在近江牡蛎体内的含量都是最高的,Ni在鯻鱼体内积累水平最高,Cr和Pb分别在棘头梅童鱼和长蛇鲻体内积累水平最高.七丝鲚的Cd含量最低,仅为0.07 μg/g,明显低于其他生物,而近江牡蛎的Cd含量为20.94 μg/g,明显高于其他生物;Cu在近江牡蛎体内含量最高,在七丝鲚体内含量最低;Zn在近江牡蛎体内水平最高,孔鰕虎鱼体内最低;在七丝鲚和孔鰕虎鱼体内没有检测到Pb,长蛇鲻体内Pb水平最,达6.46 μg/g;Cr在棘头梅童鱼体内水平最高为10.3 μg/g,刀额新对虾体内含量最低,平均为0.43 μg/g;Ni在鯻鱼体内积累水平最高(2.21 μg/g),棘头梅童鱼体内最低(0.31 μg/g). 2.2水生动物体内重金属污染评价 海洋生物体内重金属元素污染目前国内外都尚无明确的统一划分和评价标准.上个世纪80年代初,全国海岸带和海涂资源综合调查曾制定过部分金属元素的“海洋生物污染评价标准”,并且该标准也长期被海洋科技工作者作为参考并不断根据实际情况改善[14].英国、加拿大、澳大利亚等英联邦国家和智利颁布了对软体动物Cu的限制标准,质量比限定值(湿质量)分别为100、100、50、10 mg/kg[15].美国、英国、加拿大、澳大利亚、智利对Pb的标准(湿质量)均为2.0 mg/kg,英国和香港特别行政区对Pb的标准(湿质量)分别是10.0、6.0 mg/kg[16].美国、智利、澳大利亚对除贝类以外的水产品体内Zn的标准(湿质量)为40、100、150 mg/kg,澳大利亚提出软体动物的Zn的标准(湿质量)为1 000 mg/kg[17].美国、澳大利亚、南斯拉夫、智利和我国香港特别行政区规定了软体动物Cd含量的标准(湿质量)为5.5 mg/kg[18]. 本文根据上述我国推荐的评价标准及国内外的应用经验,综合提出海洋生物污染评价标准参考值,来衡量本研究中海洋生物的污染程度(以湿质量计)(表4),同时参考中华人民共和国国家标准(GB18406.4-2001)《农产品安全质量无公害水产品安全要求》中规定的有害、有毒物质最高限量(以湿质量计)(表5),来衡量受检生物的食用安全质量[19].评价模式则采用单因子污染指数法来评价海珍品体内的重金属污染状况. 表4海洋生物体内重金属评价标准(μg/g) Tab.4 Evaluation standards of trace metal elements in aquatic organisms 种类CdCrCuPbZn鱼类0.61.5202.040甲壳类2.01.51002.0150软体动物5.55.51002.01000 注:表中数据来源于参考文献[14—18]. 表5水产品中有毒、有害物质的限量标准(μg/g) Tab.5 Limiting standard of noxious and nocuous matters for aquatic products 项目CdCrCuPbZn标准0.12.0500.5/ 注:表中数据来源于参考文献[19]. 污染因子质量分指数分析结果(见表6)表明,在5种重金属元素中,Cu的污染最为严重,在所测生物体内都属重度污染(Pi≥1.0),其中,在近江牡蛎体内达到370.64;Cd在七丝鲚和刀额新对虾的体内属于轻度污染(0.2≤Pi≤0.6),在孔鰕虎鱼体内属中度污染(0.6≤Pi≤1.0),其余生物体内均为重度污染;Cr的污染也很严重,各种生物体内的Pi值都大于1.0,Zn在翡翠贻贝和火枪乌贼体内为中度污染(0.2≤Pi≤0.6),在其余生物体内也为重度污染;Pb在七丝鲚和孔鰕虎鱼体内没有检测到,其余生物体内也表现为重度污染. 表6珠江口部分习见水生生物体内重金属污染评价的质量分指数(Pi) Tab.6 Quality fraction of each pollution factor in different samples from the Pearl River estuary 水生生物质量分指数(Pi)CuCdCrZnPb棘头梅童鱼5.881.9433.256.9012.25孔鰕虎鱼21.310.8810.086.000七丝鲚2.260.429.156.070斑鰶30.182.725.218.503.25黄斑蓝子鱼25.5612.177.5013.398.72长蛇鲻7.232.702.225.5813.42鯻鱼4.052.913.448.047.24梭鱼13.102.061.166.613.42蓝圆鲹10.182.173.887.653.45斑鰶30.182.725.218.503.25刀额新对虾25.860.601.191.505.33翡翠贻贝4.731.257.050.4110.11近江牡蛎370.6416.472.714.473.89火枪乌贼8.391.842.720.345.57 根据表4中的限量标准,受检的14种水产品体内的绝大部分均超过使用标准.表7显示,除七丝鲚以外,Cu在所测生物体内都严重超标,其中,近江牡蛎的超标倍数达740.27;14种水产品体内的Cd全部超标;Cr仅在斑鲆、梭鱼和刀额新对虾体内属于可食范围,其余种类均超过限量标准;在七丝鲚和孔鰕虎鱼体内未检测到Pb,其余生物体内Pb的超标倍数均大于10. 表7珠江口各种生物体内重金属含量的超标倍数 Tab.7 The excess times over standards of heavy metals in different samples from the Pearl River estuary 种类名称超标倍数CuCdCrPb鱼类棘头梅童鱼1.3510.3823.9348.05孔鰕虎鱼7.524.446.56/七丝鲚/1.465.73/斑鲆0.546.15/26.17黄斑蓝子鱼9.2271.814.6333.85长蛇鲻1.8915.040.6752.66鯻鱼0.6216.331.5827.92梭鱼4.2411.39/12.69蓝圆鲹3.0712.051.9212.84斑鰶11.0715.192.9112.03食用标准50.000.102.000.50甲壳类刀额新对虾50.731.43/20.35食用标准50.000.502.000.50头足类与双壳类翡翠贻贝8.475.8318.4139.45近江牡蛎740.2789.596.4514.57火枪乌贼15.779.116.4721.25食用标准50.001.002.000.50 从图1的分析结果可以看出,各种重金属的MPI值大于5.0的有3种鱼类和3种软体动物,其中近江牡蛎重金属积累总量最高(34.70),说明其积累重金属能力最强,相比较而言,七丝鲚的富集能力最弱(2.59).各种生物富集重金属能力的大小顺序为:近江牡蛎≥黄斑蓝子鱼≥翡翠贻贝≥火枪乌贼≥斑鰶≥斑鲆≥刀额新对虾≥鯻鱼≥棘头梅童鱼≥蓝圆鲹≥长蛇鲻≥梭鱼≥孔鰕虎鱼≥七丝鲚. 图1 珠江口海域习见生物体内金属含量综合评价MPI值 Fig.1MPIvalues of different samples from the Pearl River estuary 2.3海产品的食用安全性评价 鱼类 鱼在水生食物链中多数是最高层的消费者,在湛江与阳江近岸水域,鱼类肌肉中重金属元素的含量均低于软体动物和甲壳动物的[12].究其原因可能与鱼类的生活习性有关,因为鱼类为游泳生物,虽然一些种类(如斑鲆)也营底栖生活,但其活动范围远比一般的软体动物和甲壳动物宽广.因此,它们与沉积物的直接接触远不如软体动物和甲壳动物,受沉积物金属污染的影响也较之有限.本研究中绝大部分鱼类可食部分都已经超出食用标准,除七丝鲚和孔鰕虎鱼体内没有检测到Pb以及七丝鲚体内的Cd属于轻度污染范围以外,其余鱼体中的所测重金属均处于重污染水平,应该引起注意. 甲壳类 高等甲壳类动物比双壳类在食物链中处于更高的生态位.虾类随着发育阶段的不同,食性和生活习性也在改变,逐步由滤食、浮游食性为主过渡到捕食、底栖食性为主,本研究的刀额新对虾体内Cu含量最高,这是由于Cu是海洋生物体内的生理必需元素,参加生物的重要生理代谢活动.从检测结果来看,污染最为严重的是Cu(Pi=25.86),其次是Pb(Pi=5.33),Cr和Zn也处于重度污染(Pi值分别为1.19和1.50).这说明珠江口海域近年来受到重金属污染的程度已非常严重.除Cd处于中度污染水平,其它重金属在刀额新对虾体内都处于重度污染水平.由于甲壳类是重要的海产品,深受人们的喜爱,因此甲壳类重金属超出食用标准的现象应当引起高度重视,因为重金属都有随着食物链的传递、转移而出现生物放大的特性,一旦被人类食用了受污染的海洋生物,就会引起一系列的生态病[20].Ni因国标中没有给出限量标准,但由于虾体内也积累一定浓度,故仍然要加强环境管理力度,防止其进入海洋环境,危害人体健康. 双壳类 从本调查结果看来,除Zn在翡翠贻贝体内处于轻度污染(Pi=0.41)水平以外,近江牡蛎体内的Cu、Cd、Cr、Zn和Pb及翡翠贻贝体内的Cu、Cd、Cr和Pb都处于重度污染水平,这说明双壳类生活的环境介质中这些重金属含量较高,从而导致生物体内含量也很高.双壳类体内积累的各种重金属含量都比鱼类高,这与双壳类的滤食食性有关,双壳类生活在受污染的河口区及沿岸带,在大量滤食食物颗粒的过程中也被动地积累了包括重金属在内的环境污染物.同是双壳类生物,牡蛎体内Zn的积累量最高,而贻贝的积累量很低,这是由于牡蛎能够积累高浓度的Zn,而贻贝则会排出大量的Zn,因此牡蛎是Zn的强的净积累者,贻贝是Zn的弱积累者或者是不完全调节者. 头足类 从测定结果来看,Zn在火枪乌贼体内的含量低于其余几种所测重金属,而且低于其余生物体内Zn的含量.与其余生物相比,火枪乌贼体内另外7种重金属的含量相对较低,在14种所测生物中其富集能力居于第10位.但除Zn为轻度污染(0.2≤Pi≤0.6)以外,其余金属在火枪乌贼体内均处于重度污染水平(Pi>1.0).这也从另一个方面佐证了珠江口的污染形势极其严重.本研究中,头足类和双壳类体内的Cd都达到重污染水平,超出食用标准.近江牡砺的Cd最高超标竟达89.59倍,这种生物是具有极高营养价值的海珍品,又是很好的滋补品,为人们的喜食产品,应该引起当地政府和消费者的警惕,有必要对其重金属污染现状和在消费市场上的流通进行更加详细地调查,以免对当地消费人群的健康造成损害. 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School of Life Science, Key Laboratory of Ecology and Environmental Science in Guangdong Higher Education, South China Normal University, Guangzhou 510631,China; 2. Department of Biology,Guangdong Education Institute,Guangzhou 510303, China;3. Administrative Office of Zhuhai Qi’ao-Dangan Island Provincial Nature Reserve, Zhuhai, Guangdong 519000,China) The contents of heavy metals in 14 species of common aquatic,including fishes, shrimps, bivalves and cephalopods collected from Lingding Yang in the Pearl River estuary of South China Ocean were investigated. The contents of cadmium (Cd), copper (Cu), zinc (Zn), lead (Pb), chromium (Cr) and nickel (Ni) in all aquatic were measured with a FAS. The standard reference materials “Standard Oyster Tissue (1566a)” were also digested and analyzed with a FAS for quality control. Metal pollution index was used to compare the otherness between different organisms, and the “Evaluation standards of trace metal elements in aquatic organisms” and the “Limiting standard of noxious and nocuous matters for aquatic products” were introduced to evaluate the pollution levels and edible security. The results showed that there was an aggravating trend in metal pollution at the Pearl River estuary. Aquatic all heavy metal contamination in different degree, even reached seriously polluted.Trace metals in many sea foods greatly exceeded the edible standard. For example, highest concentration of Cr and Pb inCollichthysluciduswere 23.93 and 48.05 times higher than the edible standard, respectively,Pb inSauridaelongatewas 52.66 times higher than the standard,and Cu and Cd inCrassostrearivulariswere 740.27 and 89.59 times higher than the standard, respectively. A significant difference was found in enrichment ability between different organisms. The results indicated that the pollution of heavy metals in Pearl River estuary has actually threatened the health of consumers. 2009-11-17 广东省科技计划资助项目(2009B030600006);珠海市科技计划资助项目(PC20081050) 秦春艳(1981—),女,河南上蔡县人,华南师范大学2005级硕士研究生;方展强(1953—),男,广东普宁人,华南师范大学教授,主要研究方向:水生动物生态与环境监控,Email:fangzhq@scnu.edu.cn. *通讯作者 1000-5463(2010)03-0104-06 Q89 A2 结果与讨论