毛杨梅树皮化学成分研究

陈 健，韦 丁

（华南理工大学轻工与食品学院，广东广州510640）

毛杨梅树皮化学成分研究

陈 健，韦 丁*

（华南理工大学轻工与食品学院，广东广州510640）

目的：研究毛杨梅树皮的化学成分。方法：采用硅胶柱层析、聚酰胺柱、薄层层析等进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果：从毛杨梅树皮中分离鉴定出了4个化合物：蒲公英赛醇（A）、芦荟甙（B）、杨梅醇（C）、杨梅素（D）。结论：化合物A、B、C为首次从该植物中分离得到。

毛杨梅树皮，化学成分

毛杨梅为杨梅科杨梅属植物，产于我国四川中部以西、贵州西部和南部、广东西北部及广西等［1］。有关杨梅药用活性物质的研究，我国才刚刚起步，日本则较为深入，已从杨梅树皮和叶中分离出数种活性化学物质，并对其中的一些活性物质进行了药理学研究［2］。毛杨梅树皮内含黄酮、鞣质、有机酸等化学物质，其提取物可望开发成为新型天然抗氧化及自由基清除剂［3］。现代药理学研究表明，杨梅树皮提取物具有清除自由基、抗氧化、抗血栓、抗肿瘤、消炎抑菌、护肝等多种功效，可加工为抗心律失常、抗心肌缺血、抗高血压等新型药物［4］。为探索该药用植物的活性化学成分，且孙达旺［5］等人对乙酸乙酯部位的化学成分已有报道，本文对其氯仿部位的化学成分进行了研究。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

毛杨梅树皮 广西武鸣栲胶厂提供，经广东药学院王定勇副教授鉴定为杨梅科（Myricae）杨梅属（Myrica）毛杨梅（Myrica esculenta Buch.-Ham）树皮。

BrukerDRX-400核磁共振仪 TMS为内标ESI； WatersZMD4000质谱仪 用于测定ESI-MS；X-5显微熔点测定仪 北京泰克仪器有限公司，用于测定熔点；RE-52 AAA型旋转蒸发仪 上海嘉鹏科技有限公司；VECTOR33红外光谱仪 德国Bruker公司；薄层层析硅胶、柱层析用硅胶 青岛海洋化工厂。

1.2 实验方法

干燥的毛杨梅树皮打粉，过60目筛，称取3kg置于广口瓶中。加8L 95%乙醇室温浸提7d，过滤，重复三次，合并三次浸提液。离心，上层溶液60℃减压浓缩得棕褐色浸膏。加少量甲醇分散、加水溶解，用300mL石油醚萃取。下层同法萃取两次，将三次的上层萃取液合并，无水硫酸钠干燥。石油醚萃取液同法用氯仿萃取得氯仿浸膏。

取4.5g浸膏，少量丙酮溶解，拌硅胶，上真空液相柱，以硅胶和聚酰胺填料为固定相，分别用PE∶Acetone=20∶1、15∶1、5∶1、2∶1的混合液梯度洗脱。薄层层析检测跟踪洗脱物，合并斑点比移值相近的流分，得到了4个部分，分别上分析柱进一步纯化，结合重结晶、薄层层析技术，得到了高纯度的化合物A、B、C、D。

2 结果与分析

2.1 化合物A的鉴定结果

无色针状结晶，熔点278～279℃，在苯-乙酸乙酯-乙酸（5∶4∶1）、碘蒸气显色系统中呈深棕色。ESI-MS（m/z）：426［M+］。13C-NMR谱中给出30个碳信号，观察其化学位移可发现：一个连氧碳信号79.1，表明含有一个-OH，116.9、158.1的烯碳信号表明可能是羽扇豆烷型的9（11）位双键或蒲公英烷型的14（15）位双键。1H-NMR谱中的甲基信号0.81（6H，s）、0.91（6H，s）、0.95（6H，s）、0.99（3H，s）、1.10（3H，s）和连氧氢信号3.21（1H，m，w1/2=16Hz）及不饱和双键的氢信号5.54（1H，dd，J=8 and 3Hz），其13C NMR和1H NMR光谱数据与文献［6］一致，可确定为蒲公英赛醇，结构式见图1。

表1 化合物B的1H NMR和13C NMR数据（MeOH，400MHz，δppm）

表2 化合物C的1H NMR和13C NMR数据（MeOH，400MHz，δppm）

图1 化合物A的结构图

2.2 化合物B的鉴定结果

黄色针尖结晶，熔点148～149℃。能溶于甲醇、乙醇及水中，难溶于乙醚、苯。以吡啶-水-苯（1∶3∶1）为展开剂、0.5%乙酸镁-甲醇系统显色，斑点呈蓝色，且均一。ESI-MS（nagetive），m/z：416.9，分子式为C21H22O9，1H NMR和13C NMR见表1。其光谱数据与文献［7］基本一致，可确定为芦荟甙，结构式见图2。

2.3 化合物C的鉴定结果

白色粉末，熔点193.5～194.8℃。不溶于石油醚，溶于氯仿、乙酸乙酯、甲醇和丙酮。以石油醚-丙酮（2∶1）为展开剂、碘蒸气显色，斑点呈红综色。ESI-MS（positive），m/z：357.1。1H NMR和13C NMR见表2，与文献［8］报道的杨梅醇光谱数据一致，结构式见图3。

图2 化合物B的结构图

图3 化合物C的结构图

2.4 化合物D的鉴定结果

黄色针晶，熔点324～326℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮，微溶于水，难溶于氯仿、石油醚。FeCl3反应呈深紫色，在紫外灯下呈黄色荧光。IR max kBr，cm-1：3350（OH），1648（CO）；ESI-MS，m/z：318［M+ H］+。1H NMR数据提示，该化合物具有6个羟基和4个碳氢质子δppm：7.2（2H，s，C2-H），表明B环为3，4，5-三羟基取代，6.1（1H，d，J=2.5Hz，C8-H）和6.3（1H，d，J=2.5Hz，C6-H），表明A环为5，7-二羟基取代。综合13C-NMR和1H NMR数据，发现与文献［9］报道的杨梅素光谱数据一致。该化合物的化学结构证实为3，5，7，3′，4′，5′-六羟基黄酮，即杨梅树皮素（myricetin），结构式见图4。

图4 化合物D的结构图

3 结论

3.1 毛杨梅树皮乙醇提取物氯仿部位浸膏，经过大型硅胶柱、聚酰胺柱、分析型柱层析，再结合溶剂重结晶等方法，对其进行了分离纯化，得到了高纯度的四种化合物。

3.2 分离得到的A、B、C、D四种化合物，应用红外扫描光谱（IR）、质谱（MS）和核磁共振波谱（NMR）阐明其化学结构，鉴定这四种化合物分别为蒲公英赛醇、芦荟甙、杨梅醇、杨梅素，其中化合物A、B、C均为首次从该植物中得到。

3.3 毛杨梅在云南大理、文山、西双版纳等地区是化瘀止痛、活血止血、收敛止泻的常用药，常用来治疗跌打损伤、骨折、痢疾、胃及十二指肠溃疡，外用治创伤出血、烧伤、目翳、牙痛、湿疹、慢性疮疡等。树皮内含黄酮、鞣质、有机酸等化学物质。初步研究结果表明，毛杨梅树皮提取物可望进一步开发成为新型天然抗氧化及自由基清除剂［3］。

［1］谬松林，王定详.杨梅［M］.杭州：浙江科学技术出版社，1987：9-14.

［2］Tao J，Morikawa T，Toguchida I，et al.Inhibitors of nitric oxide production from the bark of Myrica rubra.Structures of new biphenyl type diarylheptanoid glycosedes and taraxerane type trierpene［J］.Bioorganic&Medicinal Chemistry，2002（10）：4005 -4012.

［3］陈笳鸿，汪泳梅，吴冬梅，等.毛杨梅树皮提取物抗氧化及其清除自由基活性初步研究［J］.林产化学与工业，2007，27（10）：1-7.

［4］唐霖，张莉静，王明谦.杨梅中活性成分杨梅素的研究进展［J］.中成药，2006（1）：39.

［5］孙达旺，赵祖春，罗庆云，等.毛杨梅树皮化学成分研究［J］.林产化学与工业，1982（3）.

［6］ Nobuko Sakurai，Yoshikatsu Yaguchi，Takao Inoue. Triterpenoids form Myrica rubra［J］.Phytochemistry，1987，26（1）：217-219.

［7］Manito P，Monti D，Seperanza G.J Chem soc，perkin Transl，1990（5）：1297.

［8］廖华卫，刘恩桂，王定勇.杨梅树皮的化学成分研究［J］.中南药学，2006（3）.

［9］何桂霞，裴刚，周天达，等.瑶族藤茶中杨梅素的分离与结构鉴定［J］.中国民族医药杂志，2001，6（1）：40-41.

Study on chemical constituents of bark of Myrica esculenta Buch.-Ham

CHEN Jian，WEI Ding*
（College of Light Industry and Food Science，South China University of Technology，Guangzhou 510640，China）

Objective：To study the chemical constituents of the bark of Myrica esculenta Buch.-Ham.Methods：Compounds were isolated and purified by silicon gel column，polyamide column chromatography，thin layer chromatography.Their structures were elucidated by chemical and spectral methods.Results：Four compounds were isolated from the bark of Myrica esculenta Buch.-Ham，and identified as taraxero（lA），barbaloin（B），myricano（lC）and myricetin（D）.Conclusion：Compounds A，B and C were isolated from the plant for the first time.

bark of Myrica esculenta Buch.-Ham；chemical constituents

TS201.2

A

1002-0306（2010）11-0098-03

2009-10-10 *通讯联系人

陈健（1967-），男，博士，副教授，主要从事天然产物化学和生物分离技术方面的研究工作。

国家科技支撑计划（2006BAD27B04）资助。