消斑膏的制备与临床疗效观察

黄寿妙，陈福军，许少微

（浙江省平阳县中医院，浙江 温州 325400）

黄褐斑是临床常见的皮肤病，好发于中青年女性，严重影响美容。我院针对黄褐斑研制的消斑膏，经临床应用，疗效满意，现将其制备和质量控制方法及临床疗效观察情况报道如下。

1 仪器与试药

LC-4A型高效液相色谱仪（日本岛津）；SPD-2AS型紫外检测器（日本岛津）；C-R3A型数据处理机。丹参酮!A对照品由温州医学院天然药物化学实验室提供；甲醇为色谱纯，水为双重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 制备

处方：丹参 200 g，桑葚子 150 g，山萸肉 200 g，熟地 120 g，僵蚕100 g，生炒白术 150 g，龟板胶 200 g，白糖 250 g，女贞子 200 g，桃仁100 g。

制备[1-3]：取处方量除龟板胶、白糖外的上述药材，加水浸泡2 h，提取3次，每次均加5倍量水煎煮1 h，合并煎液，静置过夜，滤过，再加热，使滤液浓缩约为原容积的2/5时，再加入龟板胶、白糖烊化，滤过，滤液继续浓缩至规定的相对密度，放冷，即得。

2.2 质量控制

2.2.1 色谱条件

色谱柱：Zorbax BP-ODS柱（250 mm×4.6 mm，5"m）；流动相：甲醇 -水（79 ∶21）；检测波长：270 nm；流速：1 mL/min；柱温：25 ℃；进样量：10"L。

2.2.2 溶液制备

精密称取丹参酮!A对照品适量，加甲醇制成质量浓度为10.8"g/mL的溶液，作为对照品溶液。取本品约1.0 g，精密称定，加甲醇少量使其完全溶解，并定量转移至50 mL棕色量瓶中，加甲醇稀释至刻度，称定质量（精密至0.01 g），超声处理15 min，称定质量，补加损失的质量，置冰浴中冷却2 h以上，取出后滤膜(0.45"m)滤过，弃去初滤液，取续滤液，放至室温，作为供试品溶液。按处方比例称取除丹参的其他药物适量，依照消斑膏的制备工艺和供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。

2.2.3 方法学考察

系统适用性试验：量取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照品溶液各10"L，分别注入高效液相色谱仪。结果供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上有一相同保留时间的色谱峰，而阴性对照品溶液在此保留时间无干扰（图1）。

线性关系考察：分别精密吸取 2.5，5，10，15，20，25"L 的对照品溶液，注入高效液相色谱仪，每一质量浓度进样2次，计算丹参酮!A的峰面积平均值，以峰面积平均值为纵坐标、丹参酮!A进样量为横坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=56.98X+1.578 9×104，r=0.999 8。结果表明，丹参酮!A质量浓度在0.027～0.27"g/mL范围内与峰面积线性关系良好。

图1 高效液相色谱图

稳定性试验：依上述色谱条件，每隔1 h向色谱仪注入同一供试品溶液10"L，连续5次，测定丹参酮!A的峰面积 ，结果的RSD=1.1%（n=5），表明供试品溶液在5 h内基本稳定。

精密度试验：精密量取对照品溶液10"L各5份，分别注入色谱仪，结果的 RSD=0.5%（n=5），表明仪器精密度良好。

加样回收试验：精密称取已知含量的样品6份，每份0.5 g，分别置锥形瓶中，再添加一定量的丹参酮!A对照品，每份用甲醇定容至50 mL，按上述色谱条件测定。结果见表1。

表1 加样回收试验结果（n=6）

2.2.4 样品含量测定

分别精密称取不同批次的消斑膏制剂1.0 g，按供试品溶液制备方法制备，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20"L，注入高效液相色谱仪中，按上述色谱条件测定，结果3批样品中丹参酮!A的含量分别为 0.664 7，0.653 8，0.668 8 mg/g。

2.3 临床应用

2.3.1 一般资料

选择我院皮肤科门诊黄褐斑患者150例，年龄22～45岁，平均32岁，病程6个月至12年，平均4.2年。随机分为治疗组85例和对照组65例，两组患者在年龄、一般情况和症状体征方面无统计学差异（P＞0.05），具有可比性。

2.3.2 治疗方法

治疗组口服消斑膏，每日2次，每次20～30 g，早晚空腹温服。对照组口服维生素C 0.2 g，六味地黄丸8粒，均为每日3次。两组以1个月为一疗程，连服2个月。

2.3.3 疗效标准

根据国家中医药管理局《中医病证诊断疗效标准》[2]，治愈为颜面皮肤恢复正常颜色，显效为皮损消退80%，好转为皮损消退30%，无效为皮损无明显变化或消退不足30%。以前三者之和计算总有效率。

2.3.4 治疗结果

治疗组85例中治愈30例，显效35例，好转8例，无效12例，总有效率为85.88%；对照组65例中治愈19例，显效12例，好转10例，无效24例，总有效率为63.08%。两组疗效比较具有统计学差异（P＜0.05）。

3 讨论

中医称黄褐斑为蝴蝶斑，中医学认为该病发生的原因很多，发病机理复杂，但临床观察提示该病与肝、脾、肾等脏腑功能失调有关，瘀血内阻也是主要病因之一。消斑膏方中桃仁、当归、丹参活血祛瘀，熟地、山萸肉、桑葚子、龟板胶、女贞子等补益肝肾、滋阴养血，白术健脾土利运化，僵蚕善行头面而直达病所。方中诸药制成煎膏剂以滋补为主，药性滋润，共奏调理冲任、补益肝肾、滋阴养血、消斑养颜之功效，临床应用疗效确切，值得推广应用。采用高效液相色谱法对丹参的主要成分丹参酮!A进行含量测定，方法准确方便，重现性好，且简单易行。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2005：附录 33.

[2]中国中西医结合皮肤科学会色素病学组.黄褐斑的临床诊断和疗效判定标准[J].中国皮肤性病学杂志，1999，13：209.

[3]吕圭源，王一涛.中药新产品开发学[M].北京：人民卫生出版社，1997：561-565.