杨 梅 ,汪立琴 ,陈 童 ,郭志勤 ,郝 根 ,莎 拉 ,郭 立
(1.大连市金州区动物卫生监督管理局,辽宁 大连 116100;2.新疆畜牧科学院农业部家畜繁育生物技术重点开放实验室,新疆 乌鲁木齐 830000;3.新疆畜牧科学院畜牧研究所,新疆 乌鲁木齐 830000)
当前,绵羊同期发情大多采用经孕激素处理的阴道栓(CIDR、海绵栓)或注射PGF2α结合PMSG的方法。该方法存在繁琐、费时、成本高,且阴道栓易造成绵羊生殖道感染等问题。为此,我们在绵羊的繁殖季节,结合胚胎移植的同时,采用GnRH+PGF2α对受体绵羊进行同期发情处理试验。
1.1.1 受体羊 选择2~4岁,健康、膘情中等经产绵羊为受体羊。
1.1.2 试验药品 注射用促排卵素3号(杭州动物药品厂,批号:050403);氯前列烯醇(齐鲁动物保健品厂)。胚胎解冻液、胚胎移植液(实验室配制)。
1.1.3 器械 外科手术器械,手术保定架,体式显微镜,加热板,检卵针,移植管等。
1.1.4 试情公羊 体格健壮,体重在70 kg以上的性欲较好的公羊为试情羊。
1.1.5 胚胎 为OPS玻璃化冷冻萨福克羊胚胎。
1.2.1 受体羊同期发情 采用注射促排卵素3号和PG对受体绵羊进行发情处理。受体绵羊在饲养管理条件、体况基本相同的情况下,随即分为3个试验组。受体羊从11月6~8日注射促排卵3号,每只羊注射剂量为5 μg,第9天注射氯前列烯醇。根据PG剂量不同,试验分3个组。1组PG剂量0.161 mg/只,2组PG剂量0.2146 mg/只,3组PG剂量0.322 mg/只。24 h后,将试情公羊系试情布打入受体羊群,每日早晚两次试情,观察并记录受体羊发情时间。
1.2.2 胚胎解冻 将OPS管从液氮中取出,迅速浸入含有0.35 mol/L蔗糖溶液的培养皿中,回收胚胎并迅速移入新鲜的0.20 mol/L蔗糖溶液中平衡5 min,最后在MPBS中平衡5min,洗净后稍做培养,准备移植。
1.2.3 胚胎移植 采用手术法移植。受体羊在手术前24 h禁食,羊麻醉后保定在手术架上,在乳房的前上方腹中线处刮毛、消毒,用手术刀切开一个约5 cm的切口,用食指和中指从腹腔中夹出子宫和卵巢,检查、记录受体羊卵巢上黄体发育情况。将黄体发育良好一侧的子宫角取出体外,用12#针头在子宫角戳一口,用移植管吸1~2枚优质胚胎于开口处移入子宫角内,上涂抹油制剂青霉素,将子宫还原腹腔并缝合创口。
采用SPSS软件进行统计分析。
采用促排卵3号+PG诱导繁殖季节绵羊同期发情的试验结果表明,在注射PG后的72 h内,3组羊均表现发情,发情率为100%;发情集中在48 h,分别为68.57%、57.58%和61.29%,3组间无显著差异(P>0.05)(表 1)。
表1 不同试验组同期发情效果
根据受体羊发情后胚胎移植时的黄体观察,3组的发情羊的排卵率均在90%以上,组间无显著差异(P>0.05);第1组的平均黄体为2.77±1.29个/只,与第2、3组平均黄体数比较,差异极显著(P<0.01)(表2)。
表2 不同试验组排卵数比较
根据受体羊排卵和黄体发育情况,对86只受体羊的黄体侧子宫角,移入两枚经玻璃化冷冻-解冻后的胚胎,其总受胎率为38.37%,产羔率为112.12%,组间无差异(P>0.05)(表3)。
本试验得出,采用促排卵3号+PG在繁殖季节诱导绵羊同期发情的方法是有效的,72 h内发情率达100%,排卵羊在90%以上,平均为93.94%(93/99);3种不同PG剂量试验组之间,发情率无显著差异,发情集中在PG注射后48 h。从表2、3结果可看出,低剂量PG诱导同期发情,排卵率高,黄体发育好,受胎率亦高。
上述结果说明,在绵羊繁殖季节,由于羊都处在发情周期,卵巢具备充分活性,所以采用促排卵3号+PG诱导绵羊同期发情方法是可行的。而且,每只羊仅需促排卵3号5μg和PG 0.161 mg,成本低、方法简便,利于推广应用。
[1] 王光亚.山羊胚胎工程[M].杨凌:天则出版社,1993.
[2] 郭志勤.家畜胚胎工程 [M].北京:中国科学技术出版社1998.
[3] 杨梅.利用CIDR+PMSG对乏情期绵羊同期发情处理的研究[J].草食家畜,2004.3.