黄芪抗氧化部位及其与三七总皂甙配伍组分对动脉粥样硬化的改善

徐姜波, 王 拓, 翁新楚

(上海大学生命科学学院,上海 200444)

黄芪抗氧化部位及其与三七总皂甙配伍组分对动脉粥样硬化的改善

徐姜波, 王 拓, 翁新楚

(上海大学生命科学学院,上海 200444)

用油脂稳定性指数 (oil stability index,OSI)法筛选确定了黄芪乙酸乙酯抗氧化活性部位,并以高酯饲料喂养鹌鹑造动脉粥样硬化 (atherosclerosis,AS)模型,考察黄芪抗氧化活性组分及其与三七总皂甙 (PNS)配伍组分对实验性动脉粥样硬化的影响.给药 8周,检测血清总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C)、总抗氧化能力 (T-AOC)、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)含量.结果表明,黄芪抗氧化活性组分及其与 PNS的配伍组分可显著降低 (P<0.1)血清 TC,TG,LDL-C,TC/HDL-C系数和MDA,升高血清HDL-C及 T-AOC,SOD水平,对高脂胆固醇鹌鹑动脉粥样硬化具有很好的改善作用.

鹌鹑;动脉粥样硬化;黄芪;油脂稳定性指数 (oil stability index,OSI)法;抗氧化

Abstract:Antioxidant part of Astragali Radix was determined with an oil stability index(OSI)method.An experimental atherosclerosis in quailswas established to observe the effects of the antioxidant part of Astragali Radix and its combination with Panax notoginseng saponins(PNS).After 8 weeks of feeding with the antioxidant part of Astragali Radix and its combination with PNS,the total cholesterol(TC),triglyceride(TG),low density lipoprotein (LDL-C),high density lipoprotein (HDL-C),total antioxidant capacity(T-AOC),superoxide dismutase(SOD),and malondialdehyde(MDA)in serum were measured.The results show that,compared w ith atherosclerosis(AS)model quails,the serum TG,TC,LDL-C,MDA are obviously lower(P<0.1)while T-AOC,SOD are totally opposite,indicating that the antioxidant part of Astragali Radix and its combination with PNS have good effects in anti-AS.

Key words:quail;atherosclerosis(AS);Astragali Radix;oil stability index(OSI);antioxidant

动脉粥样硬化 (atherosclerosis,AS)是心血管疾 病 (cardiovascular disease,CD)——心脏病、高血压、高脂血症等的主要病因.目前研究认为,在 AS众多危险因素中,脂质发生过氧化修饰被认为是导致 AS的关键因素[1],而过氧化修饰在一定程度上能被抗氧化剂所抑制[2],如 VE、VC[3]、多酚[4]、胡萝卜素类、黄酮类等.中草药中大多富含抗氧化性较强的天然抗氧化成分,具有明显降低和稳定 AS病症的作用,对并发症的防治有积极意义.经证实,三七[5]、人参、大蒜、水蛭、甘草、山楂、当归等对 AS均有显著疗效.所以,从天然药物中寻求高效、低毒的抗AS药物已受到国内外科学研究者的重视.

黄芪是豆科植物蒙古黄芪 (Astragalus mongholicus Bge.)或膜荚黄芪 (Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.)的干燥根[6].黄芪具有保护心血管系统、抗心率失常、扩张冠状动脉和外周血管、降低血压、降低血小板粘附力、减少血栓形成、降血脂、抗衰老、抗缺氧、抗辐射等作用.

1 材料和方法

1.1 药品与试剂

甘肃产内蒙黄芪,购于上海德华国药;三七总皂甙 (Panax notoginseng saponins,PNS)购于云南金不换集团;胆固醇 (AR)购于中国医药集团上海化学试剂公司;肉用仔鸡饲料购于上海新杨饲料有限公司;洛伐他汀购于浙江海正药业股份有限公司;猪油由上海大学生命科学学院油脂实验室自制;血清 TC,TG,T-AOC,MDA,HDL-C/LDL-C测定试剂盒购于南京建成生物工程研究所.高脂饲料配方为胆固醇1.5%,花生油 4%,猪油 16%,基础饲料78.5%.

1.2 主要仪器设备

RE-85Z旋转蒸发仪,脂类氧化稳定性快速自动测定仪,752分光光度仪.

1.3 黄芪氧化活性部位筛选

黄芪石油醚、乙酸乙脂、95%乙醇依次提取部分对猪油抗氧化作用进行测定,添加量分别为猪油重量的 0.05%和 0.10%,并以同浓度 VC作参照.

1.4 动物分组

健康日本种雄性鹌鹑同窝孵出,30 d龄,体重(90±10)g,购于上海荣华肉鹌鹑公司.80只鹌鹑随机分成 8组,分别为正常组、高脂组、高脂 +黄芪提取物(A)40 mg/(kg·d)、高脂 +黄芪提取物 (A)80 mg/(kg·d)、高脂 +黄芪提取物 (A)120 mg/(kg·d)、高脂 +PNS(B)80 mg/(kg·d)、高脂 +黄芪提取物 (A)40 mg/(kg·d)+PNS(B)40 mg/(kg·d)、高脂 +洛伐他汀 (Lov)8 mg/(kg·d).每只鹌鹑早晚各喂食1次,每次 10 g,自由饮水,室温 20～25℃,每日光照 12 h,给药 8周,处死前禁食 12 h.

1.5 血清指标测定

实验 8周后,鹌鹑全部处死,严格按照试剂盒说明步骤测定血脂 4项 (TC,TG,LDL-C,HDL-C)及T-AOC,MDA,SOD指标.

1.6 统计学处理

数据用x—±s表示,用方差分析(F检验).各均数间两两比较用 Student-Newmarn-Keuls(SNK)法进行.

2 结 果

2.1 不同溶剂对黄芪提取率比较

黄芪粉末过 60目筛,称取 200 g装入索氏提取器,依次采用石油醚、乙酸乙脂、95%乙醇作为提取溶剂进行梯度提取,各提取 10 h,分别减压浓缩至浸膏,50℃真空干燥,计算各提取得率,结果如表 1所示.

表 1 不同极性溶剂对黄芪提取率(n=3)Table 1 Extraction ration of d ifferent solvents(n=3)

2.2 黄芪抗氧化部位筛选

取猪油 5 g置于反应管中,测定诱导时间 IP,并计算抗氧化保护系数 (Pf),Pf=IP样品/IP空白.测定条件为温度 100℃,空气流量 20 L/h.黄芪不同溶剂不同比例添加到猪油中,测定结果如表 2所示.

表 2 黄芪不同溶剂不同比例添加量对猪油诱导期的影响(n=2)Table 2 Effects of extraction s by d ifferen t solven ts on the IP of lard(n=2)

通常以抗氧化保护系数 (Pf)来表示抗氧化性的强弱.Pf≤1表示物质没有抗氧化活性,Pf>1表示有抗氧化活性.由表 2可知,黄芪乙酸乙酯部位抗氧化活性优于石油醚和 95%乙醇提取部位,其含量在0.10%的时候,抗氧化活力等同于 0.05%的VC活力.

2.3 黄芪乙酸乙脂抗氧化筛选部位及其配伍对高脂饮食鹌鹑血脂各指标的影响

鹌鹑模型组血清 TC,TG,LDL-C含量都明显高于对照组(P<0.01),而HDL-C含量则低于对照组 (P<0.01),由此可见高脂高胆固醇鹌鹑造模成功.给药 8周后,经测定,黄芪乙酸乙酯提取物 (A)40,80,120 mg组,TG,TC,LDL-C水平较高脂组均显著下降,且与浓度有较好的相关性,HDL-C含量则明显上升.各给药组 TG与阳性对照 Lov组比较无显著性差异 (P<0.05).同时,其与 PNS(B)配伍组也表现出较好的改善效果.TC/HDL-C为评判 AS危险关键指数.由表 3可看出,各给药组与高脂组 TC/HDL-C指数均有极显著性差异 (P<0.01),且黄芪组降低 TC/HDL-C系数优于 PNS及配伍组,这说明黄芪乙酸乙酯提取物与PNS配伍组对AS有较好的改善作用.

表3 黄芪抗氧化部位对高脂饮食鹌鹑血脂四项含量的影响(x—±s,n=10)Table 3 Effects of an tiox idan t par t of Astragali Radix and its com b ination w ith PNS on blood lip ids and cholesterol in exper imental atherosclerosis quails(x—±s,n=10)mmol·L-1

2.4 黄芪抗氧化组分及其配伍对高脂饮食鹌鹑血清 T-AOC,SOD及MDA含量的影响

灌胃给药 8周后,高脂模型组鹌鹑血清 T-AOC,SOD较对照组明显降低 (P<0.01),而MDA含量显著升高 (P<0.01).各给药组与高脂组比较,血清 TAOC,SOD活力明显升高,同时MDA含量降低,有显著性差异(P<0.01),这说明黄芪抗氧化部位组分及其与 PNS的配伍组分可提高机体抗氧化能力,抑制过氧化,具体如表 4所示.

表 4 PNS对高脂饮食鹌鹑血清 T-AOC,SOD及MDA含量的影响(x—±s,n=10)Table 4 Effects of antioxidant par t of Astragali Radix and its com bination w ith PNS on serum T-AOC,SOD,MDA in exper imental atherosclerosis quails(x—±s,n=10)

3 结 束 语

通过喂食高脂、高胆固醇饲料,成功诱导鹌鹑AS病变,各指标显示造模成功;同时以黄芪抗氧化活性提取物及其与 PNS配伍组分通过灌胃给药,进行药物干涉治疗.结果表明,各给定药物能有效调节血脂,抑制 AS的发生与发展,主要表现为降低血清TC,TG,LDL-C含量,升高 HDL-C水平及 TC/HDL-C的比值;同时血清 T-AOC,SOD显著升高,血清MDA显著降低,这表明其抗氧化活性成分能够保护机体免受氧化损伤.

黄芪抗氧化部位提取物对于高脂、高胆固醇鹌鹑动脉粥样硬化具有很好的改善作用.但其抗氧化活性部位提取率低,故仍需进一步研究其延缓AS发展、抵抗 AS损伤的机制,以提高其利用率.

[1] HARKEW ICZ R,HARTV IGSEN K,ALMAZAN F,et al.Cholesteryl ester hydroperoxides are biologically active components of minimally oxidized low density lipop rotein[J].Biol Chem,2008,283(16):10241-10251.

[2] JACOB R F,MASON R P.Lipid peroxidation induces cholesterol domain formation in model membranes[J].Biol Chem,2005,280(47):39380-39387.

[3] KNEKT P,RITZ J,PEREIRA M A,et al.Antioxidant vitamins and coronary heart disease risk: a pooled analysisof 9 cohorts[J].American Journal of Clinical Nutrition,2004,80(6):1508-1520.

[4] LAU F C,SHUKIT H B,JOSEPH J A.The beneficial effects of fruitpolyphenolson brain aging[J].Neurobiol Aging,2005,26(1):128-132.

[5] ZHANG H G,L I X H,YANG Z C.Effects of Panax notoginseng saponins on myocardial GsαmRNA expression and ATPase activity after severe scald in rats[J].Burns,2003,29(6):541-645.

[6] 江苏新医学院.中药大辞典 (下册)[M].上海:上海科学技术出版社,1999:4151-4153.

[7] 顾卫红.中药对药的配伍法则浅析 [J].中医药学刊,2005,23(5):915-916.

[8] 王巍,景厚德.鹌鹁动脉粥样硬化模型的建立 [J].中华心血管杂志,1984,12(3):222-224.

[9] 唐晓旭.血脂检测的临床意义浅识[J].实用中医内科杂志,2008,22(4):62.

[10] 房利民.血脂检测对于冠心病患者的临床应用价值[J].临床和实验医学杂志,2008,7(2):80-82.

(编辑:刘志强)

Effects of An tiox idant Par t of Astragali Radix and Its Com bination w ith Panax notoginseng sapon in s on Atherosclerosis

XU Jiang-bo, WANG Tuo, WENG Xin-chu
(School of Life Sciences,ShanghaiUniversity,Shanghai 200444,China)

R 965.1

A

1007-2861(2010)03-0327-04

10.3969/j.issn.1007-2861.2010.03.022

2009-01-03

翁新楚 (1962～),男,教授,博士生导师,研究方向为脂类化学.E-mail:wxch@staff.shu.edu.cn