促进难育奶牛受孕的技术措施

■ 李铭 吴柱月 顾国才 蒋玉秀 刘瑞鑫 罗蒙和 广西畜牧研究所 ■ 黄恒 广西牧草工作站

由各种原因引起的暂时性不育称为难育，母牛难育直接影响到繁殖效率及养牛业的经济效益[1]。2003～2007年，在生产实践中，笔者对难育奶牛采取了相应的技术措施，促进了奶牛的发情和受孕，达到了较好的效果。现报告如下。

1 引起奶牛难育的主要因素

1.1 营养

营养是导致奶牛难育的重要因素。据报道，奶牛分娩后，采食高峰落后于泌乳高峰，奶牛机体内能量出现负平衡。挤奶和哺乳会刺激奶牛抑制体内CnRH和LH的分泌。能量不足则会加重这种抑制作用，最终导致奶牛不发情和难育。能量过度也会导致繁殖力下降，在泌乳末期或干乳期，过度饲养的奶牛会出现“肥胖综合症”，容易出现代谢性、感染性、消化性疾病和繁殖障碍，使产后发情配种延迟，造成难育[1]。

蛋白质对奶牛繁殖力的影响，受蛋白质来源、奶牛年龄、日粮能量水平调节等方面的影响。研究表明，饲喂高浓度的粗蛋白可降低繁殖力，日粮中粗蛋白含量过度增加，那么配种次数就会相应增加，空怀天数也会增加，导致难育[2]。

维生素和矿物质对奶牛繁殖力的影响，主要是通过调节体内各种物质的合成和代谢过程而引起的，间接地作用于生殖系统而造成不同程度的难育[1]。

1.2 环境变化

▲ 通过使用电风扇，减少热应激，维持正常的生殖机能

季节变化对母牛繁殖力有明显的影响，春季母牛卵巢上的卵泡数量多而大，容易怀孕。炎热的夏季会导致母牛常不发情和短发情，而且夏季受胎率较低，胚胎死亡率较高。突然改变奶牛的生活环境，包括调栏、混群，会引起奶牛应激反应，影响生殖机能，从而造成难育。

1.3 疾病

引起难育的疾病包括生殖系统和全身性疾病，而以生殖系统疾病造成的难育为主。在实际工作中，生殖系统疾病主要表现为卵巢疾病和子宫炎症。卵巢疾病主要是由于奶牛营养失调和使用大量性激素引起的，如卵巢囊肿、卵巢持久黄体、卵巢静止等；子宫炎症主要是由于流产、难产时助产、供体母牛冲胚、胎衣不下等引起的。

1.4 繁殖技术

配种工作组织不当或方法不对，也是造成奶牛难育的原因之一。对奶牛发情表现观察不足或因工作疏忽大意观察不到，可造成漏配或配种不及时，直接导致受胎率下降。人工输精技术不良，精液处理不当也会导致奶牛的不孕。

2 采取的技术措施

2.1 实现能量、蛋白质的平衡

为了防止营养性难育的发生，应根据奶牛的体况制定相应的饲养管理方案，达到能量、蛋白质的平衡。根据当地的饲料来源和从外地购进的饲料情况，体况较瘦、表现营养不良的奶牛，在一定的时间内要加强营养的补给，力求营养均衡，即增加优质干草如苜蓿、柱花草和其它粗饲料如玉米青贮等的饲喂。体况较肥、表现为“肥胖综合症”的奶牛要减少能量饲料的饲喂量，特别是要减少精饲料饲喂，同时补充适量的粗饲料，并加大奶牛的运动量，每昼夜应让其自由活动18h。根据奶牛的生理状态在日粮中添加维生素ADE粉或注射补充维生素ADE，以及添加微量元素硒，有利于增加生殖道的抗感染力，提高配种时的受胎率和胚胎的成活率。钙和磷的比例保持在（1.5～2.0）：1之间[1]。

2.2 保持饲养环境的相对稳定

保持牛群饲养环境相对稳定，不能随意更换饲养场地、饲料种类和饲养管理人员。牛舍和周围环境要保持清洁，且通风要良好。在炎热季节要做好降温工作，如使用电风扇、喷淋等措施，减少牛群的热应激。要避开在炎热季节里配种；在这个阶段要做好预防接种工作，为在适宜的季节里发情配种做好准备。

2.3 子宫炎症的治疗

子宫炎症治疗的原则是抗菌消炎，促进吸收，制止感染扩散，排除分泌物，促进子宫收缩，恢复子宫机能[3]。

2.3.1 子宫冲洗疗法

通过直肠检查子宫，可以进行冲洗的，使用供体牛冲胚仪器来冲洗双侧子宫角。具体操作是采用二路式冲卵器冲洗。二路式冲卵器由带气囊的导管与单路管组成。导管用直肠把握法从子宫颈导入子宫角。导管中一路为注入和回收冲洗液用。通过气囊导管打入空气，使气囊膨胀以固定导管在子宫角内的位置和防止冲洗液倒流。气囊膨胀固定导管的位置尽量靠近子宫角的基部，以便冲洗到整个子宫角。冲洗液经单路管注入子宫角，每次30～60mL，然后将冲洗液回收。冲洗5次左右，回收液达到透明，就不必再冲洗，以免炎症扩散。为更好地冲洗子宫，可以用直肠内的手掌轻轻摆动子宫，但不要用力按摩子宫角，以免炎症扩散。

冲洗子宫时应注意：严格遵守操作规程与无菌原则[3]。冲洗液为生理盐水，温度应为45～50℃[3]，每500mL冲洗液要加入青霉素80万单位，以防止生殖道再次感染。视具体情况可以隔天1次或3～5天冲洗1次，冲洗完毕后给子宫内注入适量的抗生素，每侧20mL左右。这样冲洗后注入抗生素处理2～4次有较好疗效。

2.3.2 子宫内灌注疗法

（1）抗生素

由于子宫感染病原菌复杂，在治疗时难以对病原菌进行药物敏感试验，所以常常联合使用抗生素，如土霉素与红霉素配合，青霉素与链霉素配合等。药液使用20mL左右，用无菌输精器分别注入两侧子宫角。

（2）新宫得康

用无菌的输精器将1支新宫得康平均分成2份，分别注入两侧子宫角，7天后重复1次，3或4次可达到疗效。

（3）抗生素与新宫得康交叉使用

在使用抗生素注入子宫1天后，再用新宫得康1支注入子宫；或先使用新宫得康1支，7天后再使用抗生素。这样反复3次左右也可以取得好的疗效。

（4）露它净与新宫得康联合使用

先用无菌输精器将露它净注入双侧子宫角，让子宫内分泌物排除，3天后再用同样方法注入1支新宫得康，轻者2次可以痊愈，重者4或5次可以痊愈。

2.4 利用激素促进正常发情的技术

卵巢疾病主要为卵巢囊肿、卵巢持久黄体、卵巢静止等，表现出不发情或发情不正常，技术熟练者可以通过直肠检查和发情表象进行基本诊断。通过使用以下技术能促进奶牛的正常发情。

2.4.1 PG＋LHRH-A3肌肉注射法

▲ 患卵巢疾病的奶牛

PG即兽用前列腺素，由齐鲁动物保健品厂生产，规格0.322mg/支；LHRH-A3，由宁波激素制品有限公司生产，规格25μg/支。这种技术适用于卵巢黄体囊肿和卵巢持久黄体等卵巢疾病。给奶牛肌肉注射PG 0.644mg后24～72h内观察到发情的，可通过外观观察黏液和直肠检查卵泡发育情况，确定奶牛配种时间。配种后1h内再肌肉注射50～75μg LHRH-A3。

2.4.2 FSH+PG＋LHRH-A3肌肉注射法

促卵泡素（FSH），分国产和进口2种。国产的由中国科学院动物研究所生产，规格为10mg/瓶；进口的由加拿大Vetrephaim Canada Inc生产，规格为400 mg/瓶（内容物含有大量佐剂）。这种技术适用于卵巢囊肿、卵巢静止和卵巢持久黄体。FSH的使用量视奶牛体况而定，国产的使用3～5mg，进口的使用120～200mg，分3天做递减肌肉注射。在注射FSH的第2天注射0.644mg PG，注射完FSH的48h内仔细观察发情，有发情的检查卵泡发育情况，确定奶牛配种时间。配种后肌肉注射50～75μg LHRH-A3。

2.4.3 PMSG+PG＋LHRH-A3肌肉注射法

PMSG由军需医学科学院军事兽医研究所生产，规格为1000国际单位/支。这种方法与2.4.2相似，PMSG的用量为500～700国际单位/头。

以上3种方法可以起到治疗难育奶牛卵巢疾病，促进正常发情的作用。如果奶牛有发情但经过直肠检查卵泡发育不良，就应放弃输精，等到下个情期有发情时再做人工输精。

2.5 人工输精技术措施

2.5.1 奶牛发情观察和鉴定

每天2次（牛群从运动场回到栏舍和从栏舍去运动场）对牛群进行观察。同时每天上午1次和下午1次要在栏舍对牛的后躯做仔细的观察，重点在尾根毛是否凌乱，阴户是否肿胀，是否流有黏液及靠近阴户的尾根是否粘有黏液。有经验的技术员可以通过这些观察判断奶牛是否发情。由于难育奶牛的发情表现不正常，所以，还要通过直肠检查卵巢卵泡的发育来确定它的适时配种时间。

2.5.2 冻精解冻和检查

冻精解冻要做到快取、快投、快溶解，让冻精快速通过有害温区-30～-10℃[4]。冻精解冻温度在39～40℃间。在输精之前要对本批次的冻精做显微镜检查，质量必须达到中华人民共和国颁布的《牛冷冻精液》GB 4143-84国家标准，否则坚决不用。

2.5.3 输精前做好子宫净化

为了使子宫环境趋于理想化，有利于卵子的受精和胚胎的发育，可采用宫内药物进行净化，即在输精前1h左右每头牛用25mL生理盐水溶解160万单位青霉素和100万单位链霉素的药液，分半注入左右子宫角分叉处。

2.5.4 输精时做到无菌操作

输精器械必须保证无菌状态，输精时要保证无菌操作。在生产实践中使用“蒋氏”细管输精枪及“蒋氏”输精外套来达到器械的无菌状态。在输精枪插入奶牛阴道时使用“蒋氏”输精法操作[5]。如果在使用“蒋氏”输精法不能将奶牛的阴门打开时，可以让助手用双手将奶牛阴户向后向上拉扯，使奶牛阴道露出大面积清洁部位，再按照“蒋氏”输精法操作也可达到无菌目的。

2.5.5 正确做好直肠检查确定卵巢排卵

由于难育奶牛使用性激素促使其发情和排卵，并且多数是经产奶牛，不按常规排卵，即不能从阴户外观、黏液和时间推算来确定是否排卵。所以，要做直肠检查，触摸卵巢确定是否排卵。正确的做法是：要与第1次输精相隔10～12h，如果没有排卵再输精1次，再做直肠检查时也要相隔10～12h。连续输精3次后直肠检查仍没有排卵的放弃输精。因为3次输精后不排卵的卵泡基本成闭锁状态。

2.5.6 正确使用LHRH-A3

在奶牛输精后1h内，视奶牛发情和机体状况每次给予肌肉注射LHRH-A3 50μg或75μg不等。奶牛经过直肠检查不排卵要继续输精的，还要继续注射LHRH-A3 。

3 结语

3.1 奶牛难育是一项综合性、复杂性的难题，引起的因素包括营养、环境、季节、奶牛生物学特性、奶牛疾病以及技术人员等。使难育奶牛受孕不是一朝一夕的事情，要从多角度、多方面考虑和采取综合性的技术措施。

3.2 笔者使用的子宫冲洗方法，对慢性和隐性子宫炎有很好的清理炎症物和治疗的作用。但是这种方法需要冲胚的仪器及熟练的冲胚技术人员操作，否则适得其反，容易弄伤子宫加剧炎症。子宫冲洗时要避开奶牛持续发情时间，因为发情时子宫在性激素的作用下处于充血状态，并且输卵管和子宫角的宫管结合部也处于开放状态，这个时间冲洗易加重子宫炎症和输卵管炎[6]。

3.3 对奶牛使用亚硒酸钠、维生素E肌肉注射或日粮中添加维生素E和硒或添加维生素ADE，对预防奶牛的胎衣不下、子宫炎症有很好的作用[7]，从而可以预防奶牛的难育。

3.4 在使用激素FSH 和PMSG时，由于奶牛本身生物学特性的原因，导致一侧卵巢有多个卵泡发育，并且直肠检查时不易确定其数量，所以会出现有多胞胎流产现象的发生。一般采取的预防措施是：卵巢2侧有卵泡发育的，只往1侧子宫角输精。

[1] 穆秀明，赵月平.母牛难育的预防.黑龙江动物繁殖，2002（4）：24～25

[2] 李胜利.奶牛繁殖疾病的营养调理.见：第二届中国奶牛发展大会报告暨论文集，2006（6）：18～20，108～116

[3] 魏锁成，马瑞有.牛子宫内膜炎的致病因素及临床治疗.黄牛杂志，2006（3）：71～73

[4] 伍丽仙.提高牛人工授精受胎率技术.黄牛杂志，2006（6）：74～76

[5] 蒋如明，韦英明，林泽继.牛和水牛人工授精中蒋氏输精方法介绍.见：中国畜牧兽医学会动物繁殖分会第十三届学术研讨会论文集，2006（7）：476

[6] 张新慧、王振纲.奶牛子宫炎治疗需要注意的几个问题.见：中国畜牧兽医学会动物繁殖分会第十三届学术研讨会论文集，2006（7）：548

[7] 黄光云，王启芝，文信旺等.亚硒酸钠维生素E预防奶牛胎衣不下的效果观察.广西畜牧兽医，2007（1）：28～29