600例幽门螺杆菌感染者的耐药性分析

秘春燕

（山西省中西医结合医院，山西 太原030013）

幽门螺杆菌（Hp）为微需氧菌，是一端有鞭毛的螺旋形革兰阴性菌。已有研究证实，该菌与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关性淋巴瘤（MALT）及胃癌密切相关［1-2］。临床上由于根除Hp的指征掌握不严格，Hp根除在消化不良治疗中的不恰当应用，广泛使用抗生素，使得Hp的耐药率逐年上升，因此Hp耐药性的研究在临床诊断和治疗中有重大意义。为了选择最佳的治疗方法和减少继发性耐药的产生，我们将600例患者的Hp药敏试验分析如下，以期为临床正确用药提供指导。

1 资料与方法

1.1 临床资料

Hp菌株均来源于我院2006年6月-2007年12月胃镜室送检的快速尿素酶试验Hp阳性患者的胃窦部活检黏膜标本720份，分离成功600株。其中男348例，女 252例；年龄 12岁～88岁，平均（49.36±5.62）岁；其中慢性浅表性胃炎273例，十二指肠球炎56例，胃溃疡113例，十二指肠球部溃疡95例，胃癌32例，复合性溃疡18例，胃息肉13例。

1.2 方 法

1.2.1 标本采集与培养 对Hp快速尿素酶试验阳性的患者再取胃黏膜标本2块，放入Hp运送培养基，24 h内转种于Hp分离培养基，在微氧环境恒温培养箱37℃培养3 d～7 d。菌落经革兰染色、尿素酶试验、过氧化氢酶和过氧化物酶试验鉴定为Hp菌株。于保存培养基内-80℃保存备用。

1.2.2 药敏试验 参照WHO推荐的K-B法进行检测。将通过鉴定的Hp菌株经2～3代培养后以布氏肉汤稀释至1×1012CFU/L浓度的悬液，取100 μL上述悬液滴于直径90 mm，厚度为（4±0.5）mm的血琼脂平皿上，用L型玻棒涂布均匀后贴药敏纸片，37℃、湿度>90%、微需氧袋内培养72 h后，记录抑菌环直径，其判断标准根据中国药品生物制品检定所抗菌药物细菌耐药性监测中心印发的 《抗菌药物敏感实验判断标准》［3］。药敏纸片左氧氟沙星、克拉霉素、阿莫西林、四环素、呋喃唑酮、甲硝唑，由OXID公司提供，在效期内使用。

2 结果

2.1 6种抗生素药敏试验结果比较

结果见表1。

表1 6种抗生素药敏试验结果比较 ［株（%）］

由表1可以看出，Hp对阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星、四环素、呋喃唑酮的耐药率分别为 4.0%、32.0%、10.0%、24.0%、6.0%和 0%； 高敏率分别为 56.0%、38.0%、52.0%、40.0%、54.0%和66.0%。结果显示本地区幽门螺杆菌对呋喃唑酮、阿莫西林、四环素、克拉霉素的敏感性较高；对甲硝唑、左氧氟沙星的耐药率较高，这可能与本地区其他疾病较多使用左氧氟沙星有关。

2.2 患者性别、年龄对Hp耐药率的影响

Hp耐药率在性别方面除女性患者Hp对甲硝唑耐药率显著高于男性（P<0.05）外，其余抗生素的耐药率比较差异均无统计学意义（P＞0.05），结果见表2。

表2 患者性别、年龄对HP耐药率的影响 （株）

3 讨 论

幽门螺杆菌是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃癌和黏膜相关淋巴组织淋巴瘤的重要病因。根除Hp是防治上述各种疾病发生、发展以及复发的重要途径，用于Hp根除治疗的抗生素目前主要有甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、四环素、呋喃唑酮等。随着Hp根除治疗的普及，Hp对抗生素的耐药情况日益严重，而Hp对抗生素耐药是导致Hp根除治疗失败的主要原因，而且Hp的耐药率在不同国家或地区不尽相同。Hp耐药性分为原发性耐药和继发性（获得性）耐药，原发性耐药是由于遗传性发生改变及经过选择过程产生的，原发性耐药与同类药物交叉耐药有关，有明显的地域差异并随时间而改变；继发性耐药多为抗菌药物诱导，过多的用药，药物选择性压力，使耐药细菌占优势。在治疗失败时大约有1/3～1/2的菌株可对其产生耐药性。继发性耐药会影响再次治疗，并给抗菌药物的选择带来相当困难［4-5］。Hp感染实验室的诊断方法众多，有分离培养、形态学、血清学、脲酶依赖性试验、分子生物学等方法。由于作为微需氧菌，培养条件较为严格，其它污染菌的过度增殖及其它污染物会抑制Hp的生长，应用杀灭或抑制Hp的药物同样会抑制细菌生长，导致细菌培养不能获得理想结果，成为实验室分离培养诊断中敏感度比较低的一种。对所分离培养的菌株进行药物敏感试验，根据药敏结果指导临床治疗，对避免使用已经产生耐药的抗生素，提高Hp治疗根除率，有重要的意义［6］。

Hp对甲硝唑的耐药率为20%～80%（平均30%～40%），对克拉霉素的耐药率为1%～20%，Hp对甲硝唑和克拉霉素的耐药率正呈世界范围上升趋势［4］。治疗方案的不规范、病人依从性差和抗生素的滥用，导致Hp的耐药现象日趋严重。Hp的体外诱导耐药试验和耐药率监测表明，甲硝唑耐药率为49.7%，而在呋喃唑酮耐药试验中，没有一株Hp产生耐药［5］，和我们的研究结果大体一致，提示Hp不容易对呋喃唑酮产生耐药性。现已有多项研究表明左氧氟沙星可安全、有效地初次和补救治疗幽门螺杆菌，但对于左氧氟沙星耐药情况鲜见报道。

我们通过幽门螺杆菌培养及药物敏感试验，发现Hp对阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星、四环素、呋喃唑酮的耐药率分别为4.0%、32.0%、10.0%、24.0%、6.0%和0%；高敏率分别为56.0%、38.0%、52.0%、40.0%、54.0%和66.0%。本组资料结果显示，本地区幽门螺杆菌对呋喃唑酮、阿莫西林、四环素、克拉霉素的敏感性较高；对甲硝唑、左氧氟沙星的耐药率较高，这可能与本地区其他疾病较多使用左氧氟沙星有关。因此，本地区根除Hp方案中应首选呋喃唑酮、阿莫西林、四环素、克拉霉素等。

有研究报道，抗生素耐药还与性别和年龄有关，女性与耐药明显相关，抗生素不耐药随年龄增加而增加，而70岁后则明显下降［7］。本研究结果表明女性患者Hp对甲硝唑耐药率高于男性（P<0.05），其余抗生素在性别方面的耐药率比较差异无统计学意义（P>0.05）；并没有发现年龄与抗生素耐药率之间有必然的联系（P>0.05）；各抗生素耐药与疾病种类亦无关。

随着抗生素长期广泛应用，必然产生Hp耐药株，其耐药性逐渐增强。为了减少Hp耐药菌株的产生，在临床上选择抗生素时，应根据患者的不同年龄和不同体质选择不同的药物。严格掌握Hp根除治疗的适应证；联合用药，避免单一抗生素的使用，尽可能选择耐药率较低的抗生素组合进行治疗；避免使用对Hp耐药的抗生素，有条件时最好能在治疗前先做药物敏感试验；治疗规范化，普及和推广正规的治疗方案，选择合理的剂量和疗程等，对提高根除率，降低复发率，减少耐药菌株的产生有着十分重要的意义［8］。

［1］康白.微生态学原理［M］.2 版.大连：大连出版社，2002：126.

［2］胡文华.幽门螺杆菌菌株的7种药物体外药敏试验研究［J］.第三军医大学学报，1996，18（2）：457-458.

［3］梁晓，刘文忠，陆红，等.幽门螺杆菌体外诱导耐药试验和耐药率监测［J］.中华消化杂志，2003，23（3）：146-149.

［4］王世岭，杨珺，周亮，等.酪酸梭菌、双歧杆菌胶囊对健康受试者肠道菌群的影响［J］.中国临床药理学杂志，2005，21（6）：449.

［5］成虹，胡伏莲.北京地区幽门螺杆菌耐药情况及其变化趋势［J］.中华医学杂志，2005，85（1）：2 754-2 757.

［6］姚创利，朱建伟，李建平.2005年西安地区幽门螺杆菌耐药性分析［J］.实用医技杂志，2006，13（4）：3 590-3 591.

［7］张晓光，胡品津，陈为，等.广东地区幽门螺杆菌耐药的调查［J］.胃肠病学，2001，6（suppl）：A66.

［8］许珂，魏萍.益生菌作用机制的研究进展［J］.中国微生态学杂志，2009，21（1）：90.