超声波辅助提取枫香叶总黄酮工艺研究

晏 丽，高中松

（吉首大学城乡资源与规划学院，湖南张家界427000）

枫香（Liquidambar formosana Hance）为金缕梅科枫香亚科枫香属的高大落叶乔木，别名为枫木、黑饭木、香枫等，是我国重要的乡土树种，也是亚热带地区的优良速生落叶阔叶树种[1]，主要分布于我国黄河流域及其以南地带，主产于江苏、浙江、安徽、湖南、湖北、江西、福建、台湾、广西等省（区）[2]。枫香全株均可入药[3]，但近年，许多学者对其栽培技术及园林应用进行了研究，对其药用价值的开发利用较少，尤其是对其黄酮类化合物药用价值的研究目前尚处于空白。黄酮类化合物广泛存在于植物界，在花类药材中种类及含量尤其丰富，生理活性多样，引起国内外的广泛重视[4]。近年来，超声技术广泛应用于黄酮类化合物的提取研究，如对大蒜黄酮、茉莉花黄酮、洋葱黄酮、石榴黄酮等的提取[5-10]。超声技术应用于提取枫香叶中黄酮类物质的研究尚未见报道。

本研究利用超声技术，以枫香叶为原料，乙醇水溶液为溶剂，考察乙醇浓度、提取时间和料液比对总黄酮提取率的影响，通过正交试验对提取工艺进行优化，用紫外分光光度法测定提取物中总黄酮的含量。枫香叶总黄酮的提取，可为枫香资源的高效开发和综合利用提供参考依据。

1 材料和方法

1.1 材料

枫香叶采自吉首大学张家界校园，采集时间：为2009年7月7日。主要试剂：乙醇（分析纯）、总黄酮对照品芦丁（中国药品生物制品检定所）。主要仪器：SB5200DT型超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）、SHZ-D循环水式真空泵（河南省巩义市英峪予华仪器厂）、UV757CRT紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）、HH-6数显恒温水浴锅（江苏省金坛市富华仪器有限公司）、DHG-9240A型电热恒温鼓风干燥箱。

1.2 方法

1.2.1 绘制标准工作曲线 用十万分之一天平精密称取烘干2 h的芦丁对照品13.4 mg，用60%乙醇溶解，定容于50 mL容量瓶中，摇匀，得到0.268 mg/mL的标准母液。精密吸取该标准溶液0，1，2，4，6，8 mL，分别置于 25 mL容量瓶中，加5%亚硝酸钠0.7 mL，混匀，放置5 min，加10%硝酸铝0.7 mL，混匀，放置6 min，加5%氢氧化钠5 mL，用30%乙醇定容至刻度，摇匀，放置10 min后比色，用紫外分光光度计在200～800 nm范围进行光谱扫描，得到标样的光谱图。由光谱图可知，在507 nm处有最大吸收峰，得到质量浓度X与吸光度Y的标准曲线为Y=0.011 3X+0.007 4，R2=0.999 5（图 1）。

1.2.2 提取枫香叶总黄酮的正交试验 采用超声波提取法，以乙醇浓度（A）、提取时间（B）、料液比（C）3个提取因素为考察对象（表1），按L9（34）正交表设计试验方案进行正交试验，按标准曲线的测定方法测定提取液的吸光度，并根据线性回归方程计算总黄酮提取率，以总黄酮得率为考察指标，确定提取枫香叶总黄酮的最佳工艺。

表1 正交试验因素与水平

2 结果与讨论

每次称取0.1 g枫香叶干燥粉，选取乙醇浓度、料液比和提取时间3个因素进行正交试验，结果如表2所示。对结果进行方差分析（表3）。试验结果表明，乙醇浓度和提取时间对枫香叶总黄酮的提取效果有显著影响，料液比对总黄酮提取的影响较小，3个因素对总黄酮提取率的影响大小依次为：乙醇浓度＞提取时间＞料液比，提取枫香叶总黄酮的最佳工艺条件为A3B2C1，即乙醇浓度80%，提取时间60 min，料液比1∶10。

表2 正交试验结果

表3 方差分析

3 结论

以乙醇溶液为提取剂，用超声波法进行枫香叶总黄酮的提取，试验结果表明，影响超声波法提取枫香叶总黄酮的主次因素为：乙醇浓度＞提取时间＞料液比。最佳提取工艺为A3B2C1，即乙醇浓度80%，提取时间60 min，料液比1∶10。与传统浸提法相比，超声波法的提取时间较短，从节约能源和技术经济性的角度来看，超声波提取法优于传统浸提法。因此，超声波提取枫香叶总黄酮具有提取速度快、节约能源等优势，是一种比较理想的方法。

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