南五味子不同生长期鞣质含量的测定

湘潭职业技术学院李君李俊雅吴梅青

南五味子不同生长期鞣质含量的测定

湘潭职业技术学院李君李俊雅吴梅青

南五味子来源于木兰科植物科植物华中五味子Schisandra sphenantheraRehd.etWils.的干燥成熟果实。本品能益气生津、敛肺滋肾、止泻、涩精、安神，可治疗久咳虚喘、津少口干、久泻、健忘失眠等症，是中医临床常用的名贵传统药物之一。本文以南五味子中鞣质含量变化为依据，用紫外-可见分光光度法结合干酪素法测定不同生长期南五味子中鞣质的含量。

一、仪器与试药

Aglient8455型紫外-可见分光光度计，HS6150D超声提取仪（昆山市超声仪器有限公司），电子天平（BS224S，北京赛多利斯仪器系统有限公司）。南五味子样品由贵州GAP基地提供，经河南中医学院生药教研室陈随清教授鉴定为木兰科植物华中五味子的果实。没食子酸对照品（中国药品生物制品检定所），干酪素（北京双旋微生物培养基制品厂），无水碳酸钠。

二、方法与结果（本实验应避光操作）

1.对照品溶液的制备。精密称取没食子酸对照品50mg，置100ml棕色容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每ml含没食子酸0.05mg）。

2.标准曲线的制备。精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，分别置25ml棕色瓶中，各加入磷钼钨酸试液1ml，再分别加入11.5ml、11ml、10ml、9ml、8ml、7ml，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法在760nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

y=69.9041X-0.0057，r=0.9994。

3.供试品溶液的制备。取南五味子粉末约2g，精密称定，置250ml棕色量瓶中，加水150ml，放置过夜，超声处理10分钟，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，静置（使固体物沉淀），滤过，弃去初滤液50ml，精密量取续滤液20ml，置100ml棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。

4.测定法：总酚。精密量取供试品溶液2ml，置25ml棕色瓶容量中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加入磷钼钨酸试液1ml”起，加水10ml，依次测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量（mg），计算，即得。

不被吸附的多酚。精密量取供试品溶液25ml，加至已盛有干酪素0.6g的100ml具塞锥形瓶中，密塞，置30℃水浴中保温1小时，时时振摇，取出，放冷，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml棕色量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加入磷钼钨酸试液1ml”起，加水10ml，依次测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量（mg），计算，即得。按下式计算鞣质的含量：

鞣质含量=总酚量-不被吸附的多酚量。

5.精密度试验。精密量取没食子酸对照品溶液2.0ml，置25ml棕色瓶容量中，加入磷钼钨酸试液1ml，加水10ml，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法在760nm的波长处测定吸光度，连续测定5次，测得RSD值为0.29%，表明样品的精密度良好。

6.稳定性试验。精密量取没食子酸对照品溶液2.0ml，置25ml棕色瓶容量中，加入磷钼钨酸试液1ml，加水10ml，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，分别在5min，10min，15min，30min，45min，60min放置时间点，测定其吸光度，测得RSD值为1.28%，表明样品的稳定性良好。

7.重复性试验。取南五味子粉末约2g，精密称定，按2.3项下方法制备样品液，用第4节方法进行分析，测定样品中鞣质的含量，测得RSD值为0.64%，表明样品的重复性良好。

8.加样回收率试验。取南五味子粉末约2g，精密称定，按第3节方法制备样品液，加入一定量的没食子酸对照品，进行紫外-可见分析，计算加样回收率，测得RSD值为1.36%，表明样品的加样回收率良好。

三、测定结果

以紫外-可见分光光度法结合干酪素法分别测定生长期为9月15日，9月25日，10月5日，10月15日，10月25日，11月5日的南五味子样品。结果见表1。

表1 贵州GAP基地南五味子不同生长鞣质的含量

四、讨论

1.以紫外-可见分光光度法结合干酪素法测定不同生长期南五味子鞣质含量的变化趋势是相同的，在青果时鞣质的含量最高，随着南五味子果实的成熟，鞣质含量的含量逐渐降低。

2.紫外-可见分光光度法结合干酪素法测定南五味子中鞣质的含量与2000版《中华人民共和国药典》中皮粉法相比，具有样品取样量少，快速，灵敏等特点。但影响其准确性的主要因素是干酪素中微量杂质的含量