血清RBP、CysC测定在肝、肾疾病诊断中的应用

王永卿，李春芸，杨 瑶

（海口市人民医院，海南 海口 570208）

近年来，研究表明血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)和血清视黄醇结合蛋白(RBP)能较好地反映肾小球滤过率，能早期监测肾小球功能轻微受损情况。血清CysC和RBP的浓度与肾脏疾病严重程度呈显著正相关；RBP还是反映肝合成功能受损的一个敏感的指标。

1 材料与方法

1.1 实验对象

1.1.1 病例组 收集我院2009年11月1日至2010年3月31日肾内科、消化内科、内分泌科的住院病人和门诊病人130例。按照第二届全国肾脏病学术会议肾脏疾病的临床分类法将肾病组分为肾小球肾炎30例，糖尿病肾病14例，慢性肾功能衰竭10例。按照肝脏疾病的病变程度将肝病组分为急性肝炎21例，肝硬化42例，肝恶性肿瘤13例。

1.1.2 健康对照组 收集同期我院健康体检者37例，年龄21-78岁，平均40岁，其中女20例，男17例。经B超、心电图和临床各项检查无肝病、肾病、冠心病、肿瘤、糖尿病等病史和疾病。

1.2 实验原理 利用抗原血清视黄醇结合蛋白（RBP）和胱抑素C（Cys C）和特异性抗体（羊抗人RBP、CYS C血清）相结合，形成不溶性免疫复合物，使反应液产生混浊，其浊度高低（即透光度减少、吸光度增加）反映血清样品中RBP、Cys C的含量。通过与校准品吸光度比较，算出血清中RBP和Cys C的浓度。

1.3 实验仪器 日立HI7600全自动生化分析仪。

1.4 实验试剂 RBP试剂为上海北加生化试剂有限公司试剂盒，产品标准编号：YZB/沪4301-40-2009；Cys C试剂为宁波美康生物技术有限公司试剂盒，产品标准编号：YZB/国1390-2006.

1.5 实验方法 免疫比浊法（二点终点法）。待测血清，加试剂R1后，37℃孵育5 min，读测第1点（A1），加入试剂R2，37 ℃孵育5 min，读测第2点（A2），待测血清A=A2-A1。

1.6 结果计算 待测样本RBP/Cys C浓度（mg/L）=[样本吸光度(A2-A1)/校准品吸光度（A2-A1）]×RBP/Cys C校准浓度（mg/L）。

1.7 统计分析 采用Microsoft Excel2009和SPSS13.0进行数据统计分析。浓度用（±s）表示，显著性检验用方差分析。

2 结果

对照组血清RBP含量为（49.7±13.2）mg/L，肾小球肾炎血清RBP含量为（95.1±32.8）mg/L，慢性肾功能衰竭血清RBP含量为（78.2±37.7）mg/L，糖尿病肾病血清RBP含量为（82.8±36.1）mg/L，肾病组总的血清RBP含量为（88.8±34.1）mg/L，肾病组与对照组比较P均＜0.01，差异有统计学意义，肾病组内比较P＞0.05，差异无统计学意义。结果见表1。

肝病组肝炎血清RBP含量为（25.8±10.2）mg/L，肝硬化血清RBP含量为（16.9±11.40）mg/L，肝恶性肿瘤血清RBP含量为（20.3±10.0）mg/L，肝病组总的血清RBP含量为（19.7±11.4）mg/L，肝病组与对照组比较P均＜0.01，差异有统计学意义，肝病组内比较P＞0.05，差异无统计学意义。结果见表2。

表1 肾病患者血清RBP与对照组比较（±s）

表1 肾病患者血清RBP与对照组比较（±s）

组别 例数RBP值(mg/L)P对照组肾病组(总)慢性肾功能衰竭糖尿病肾病慢性肾小球肾炎375410143049.7±13.288.8±34.178.2±37.782.8±36.195.1±32.8-＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01

表2 肝病患者血清RBP与对照组比较（±s）

表2 肝病患者血清RBP与对照组比较（±s）

组别对照组肝病组(总)肝炎肝硬化肝恶性肿瘤例数3776214213 RBP值(mg/L)49.7±13.219.7±11.425.8±10.216.9±11.420.3±10.0 P-＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01

对照组血清Cys C含量为（0.92±0.61）mg/L；肾病组肾小球肾炎血清Cys C含量为（3.78±3.36）mg/L，糖尿病肾病血清Cys C含量为（2.63±1.19）mg/L，慢性肾功能衰竭血清Cys C含量为（2.89±1.20）mg/L，肾病组总的血清Cys C含量为（3.30±2.00）mg/L，肾病组与对照组比较P均＜0.01，差异有统计学意义，肾病组内比较P＞0.05，差异无统计学意义。结果见表3。

表3 肾病患者血清Cys C与对照组比较（±s）

表3 肾病患者血清Cys C与对照组比较（±s）

组别 例数Cys C值(mg/L)P对照组肾病(总)慢性肾功能衰竭糖尿病肾病慢性肾小球肾炎37541014300.92±0.613.30±2.003.78±3.362.63±1.192.89±1.40-＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01

肝病组肝炎血清Cys C含量为（1.14±0.05）mg/L，肝硬化血清Cys C含量为（0.99±0.04）mg/L，肝恶性肿瘤血清Cys C含量为（0.92±0.05）mg/L，肝病组总的血清Cys C含量为（0.92±0.25）mg/L，肝病组内比较P＞0.05，差异无统计学意义，肝病组与对照组比较P均＞0.05，差异无统计学意义。结果见表4。

表4 肝病患者血清RBP与对照组比较（±s）

表4 肝病患者血清RBP与对照组比较（±s）

组别 例数RBP值(mg/L)P对照组肝病组(总)肝炎肝硬化肝恶性肿瘤37762142130.92±0.610.92±0.251.14±0.050.99±0.040.92±0.05-＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05

3 诊断试验

由于肾病组内和肝病组血清RBP和Cys C均无显著性差异，故我们在讨论诊断试验时，只分对照组和肾病组、肝病组。

3.1 正常对照37人，血清RBP结果增高9人，占24.3%，结果降低2人，占5.4%，结果在正常范围内26人，占70.2%；血清Cys C结果增高2人，占5.4%，结果在正常范围35人，占94.6%。

肾病组54例，RBP结果增高42例，占77.8%，结果降低4例，占7.4%；结果在正常参考范围内8例，占14.8%；Cys C结果增高47例，占87.0%，结果在正常范围7例，占13.0%。肾病RBP、Cys C同时阳性41例，占75.9% 同时阴性6例，占11.1%。

肝病组76例，RBP结果降低57例，占75.0%，结果在正常范围18例，占23.7%。Cys C检测结果在肝病组与正常对照组无显著差异。结果见表5。

表5 各组检测结果[例(%)]

3.2 肾病组12例RBP不升高者原因分析

3.2.1 结果降低4人，其中Cys C升高的3人，肝功能异常（有1人转氨酶升高，2人血清蛋白降低），另外1人RBP、Cys C结果均降低，肝功能均正常。

3.2.2 结果在正常参考范围内8人，其中2人转氨酶升高，6人血清蛋白降低。结果见表6。

表6 肾病组RBP不升高者原因分析（例）

由以上分析可知肝功能损伤，特别是肝脏合成功能损伤是引起肾脏疾病病人血清RBP结果不升高的主要原因。

4 讨论

Cys C是体内有核细胞产生的一种血浆内源性小分子微量蛋白，生产较稳定，不受个体、肌肉量、性别、年龄、肾前因素和慢性炎症的影响。相对分子质量低，能自由滤过肾小球，在近端肾小管上皮细胞被分解代谢，不被肾小管重吸收和分泌，血液中的浓度主要由肾小球滤过率(GFR)决定，能理想地反映GFR。

RBP是由肝脏合成的转运视黄醇(维生素A)的蛋白，体内90%的RBP与视黄醇结合为holo-RBP，85%holo RBP可与TTR结合成大分子，不被肾小球滤过，而剩下的15%可部分经肾小球滤过。因此，肾脏滤过功能受损害时，RBP浓度水平会显著升高。

本实验表明，血清CysC和RBP的浓度与肾脏疾病呈显著正相关，能早期监测肾小球功能轻微受损情况。从表5可以看出，单项检测最高阳性率为87%，两项联合检测阳性率达88.9%。同时我们发现肾脏疾病合并有肝功受损特别肝脏合成功能低下者血清RBP不升高，所以在分析结果时必须综合考虑。

在肝病诊断方面，通过本实验，我们发现Cys C在肝病诊断方面并无临床意义，这与一些报道说肝硬化病人Cys C血清含量升高不相符；由于RBP是由肝脏合成的，所以，所有类型的肝病病人血清RBP都显著降低（肝病合并肾病时RBP要依据病情综合分析），RBP是反映肝合成功能受损的一个敏感的指标。

综上所述，测定血清RBP一个项目可以诊断肝肾两种疾病，但同时患有这两种疾病时血清RBP含量依病情变化而变化。测定血清Cys C可诊断肾脏疾病，特异性较强，RBP和Cys C同时测定可提高肾脏疾病的诊断率。

[1]Berggard I.Stuides on the plasma protein in normal human urine[J].Clin Chim Acta,1961,6:413.

[2]Kanai M,Paz A,Cadman DS,et al.Retinol-binding protein for vitamin A in human plasma[J].J Chin Invest,1968,47:2025.

[3]Vahlquist A,Rask L,Peterson P,et al.The retinol-binding protein[J].Scan J Clin Lab Invest Suppl,1980,154:45.

[4]Bernard AM,Vyskocil AA,Mahieu P,et al.Assessment of urinary retinol-binding protein as an index of proximal tubular injury[J].Clin Chem,1987,33:775.

[5]Smith FR,Gondmon DS.The effects of disease of the liver,thyroid and kidneys on the transport of vitamin A in human plasma[J].J Clin Invest,1971,25:2426.

[6]Bankson DD,Rifai N,Silverman LM.Immunoturbidimetric measurement of serum retinol-binding protein in renal and hepatic disease[J].Ann Clin Biochem,1988,25:246.

[7]Winkler MF,Gerrior SA,Pomp A,et al.Use of retinol-binding protein and prealbumin as indicators of response to nutrition therapy[J].JAm Diet Assoc,1989,89:684.

[8]范列英,沈新义,耿培兰,等.视黄醇结合蛋白的放射免疫分析[J].中华核医学杂志,1994,14（1）:46-47.

[9]谢鑫友,朱永良,林 洁.视黄醇结合蛋白的快速酶联免疫法测定[J].上海免疫学杂志.1998,18（6）:363-364.

[10]韩振武,赵 然,邵树茂,等.血清胱抑素C用以评估肾小球率过滤的价值[J].中国误诊学杂志,2007,7(18):4222.

[11]侯 巍,杨述红,宣 萍.视黄醇结合蛋白测定的临床意义[J].中国实验诊断学,2002,6(5):348.