液基细胞学离心沉淀涂片法与传统巴氏直接涂片法应用于宫颈疾病筛查的比较

陈建华，邹华英

子宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，又是一种可以通过防癌筛查得以早发现、早治疗、甚至彻底治愈的疾病。宫颈癌前病变(CIN)发展为宫颈癌有一个较长的过程(5～8年)[1]，因此早期筛查、防患于未然是防治宫颈癌的关键[2]，传统的宫颈癌筛查采用巴氏涂片技术，存在涂片质量满意度低、宫颈病变检出率较低的缺点，而液基细胞学(TCT)技术[3]能有效克服这些缺点。本院采用的液基细胞离心沉淀制片法具有不需制片机、费用低、操作简单、阳性检出率高的优点，在实际工作中取得了很好的效果，具有很好的推广价值，适宜于各级医院、社区妇科进行防癌普查。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 2008年4月至2010年4月我院妇产科送检的1224例标本，每例标本一式两份，一份直接涂片，一份加入液基细胞学固定液中，用作离心沉淀涂片。

1.2 实验器材 离心沉淀法采用武汉天之瑞科技有限公司液基耗材、普通低速离心机、显微镜。

1.3 实验方法

1.3.1 传统巴氏涂片法 用竹板轻轻刮取宫颈表面的分泌物和细胞，将刮出物均匀涂抹在玻片上，经95%酒精固定15min后，巴氏染色。玻片烘干后，以树脂封片。

1.3.2 液基细胞学离心沉淀法：用宫颈管细胞刷伸入宫颈外口和宫颈管内旋转5～6周，收集宫颈外口和宫颈管内的脱落细胞，将收集的细胞置于液基保存液中。混匀后，取10ml放入离心管，低速(800r/min)离心10min后，弃上清液，加样枪吸取沉淀物样本，涂片，薄片烘干，95%乙醇浸泡固定，洗涤、染色。玻片烘干后，以树脂封片。

1.4 细胞学诊断 细胞学诊断采用TBS(The Bethesda System)分类标准[4](2001年版)，分为8组：(1)无上皮内病变或恶性病变(NILM)；(2)非典型鳞状上皮----不明意义 (ASC-US)；(3)非典型鳞状上皮----不排除高级别鳞状上皮内病变 (ASC-H)；(4)低级别鳞状上皮内病变(L-SIL)，包括HPV感染；(5)高级别鳞状上皮内病变(H-SIL)；(6)鳞状上皮细胞癌(SCC)；(7)非典型腺细胞(AGC)；(8)腺细胞癌(ADC)，包括宫颈腺上皮细胞癌和子宫内膜细胞癌。

1.5 宫颈组织活检 当细胞学检查回报结果为ASC-H以上病变的患者，均在阴道镜下行多点活检，进行病理组织学检查，并计算两种制片方法检测结果与病理检查结果的符合率。

1.6 统计学方法 计数资料，率的比较采用χ2检验，以P＜0.05表示差异有显著性意义。

2 结果

2.1 1224份标本采用两种制片方法的标本满意度比较，见表1。

表1 巴氏直接涂片法和离心沉淀涂片法的标本满意度比较[例(%)]

2.2 两种制片方法的宫颈上皮异常阳性率的比较,见表2。

2.3 巴氏直接涂片法和离心沉淀涂片法的宫颈细胞学结果与组织学结果对照情况，见表3：对于ASC-H或L-SIL，离心沉淀制片法与组织活检病理结果的符合率显著高于巴氏直接涂片法(P＜0.01)。

3 讨论

表2 巴氏直接涂片法和离心沉淀涂片法宫颈上皮异常情况比较 [例(%)]

统计结果显示，同样采用液基细胞学TBS诊断标准，离心沉淀制片法在标本满意度、宫颈上皮异常阳性率及与组织活检病理诊断结果的总相符程度方面均明显优于巴氏直接涂片法 (P＜0.05或P＜0.01)，表明自1954年应用至今的巴氏染色涂片法存在假阴性过高、异常情况漏检严重等缺点，其产生的原因经分析，主要有下列几点：(1)标本收集和固定不及时，不规范，造成镜下细胞形态模糊，胞浆与核结构不清，难以判断准确。在一些医院，往往是由非实验专业的妇科医生直接涂片和进行固定，存在不规范操作。而液基细胞技术用特制的取样器取样后，将标本立即洗入细胞保存液中，这样保证了细胞的及时固定，同时保留了取样器上几乎所有细胞。(2)取样器上的病变细胞没有被转移到载玻片上，有研究表明巴氏直接涂片有80%以上的细胞随样器丢弃[5]。尽管临床医生取的标本常常较多，但涂在载玻上的往往是很少的一部分。这样大部分的标本被丢弃，有时有价值的病变标本就是这样被漏掉了，而离心沉淀法则通过离心混匀方式把有价值的病变细胞均匀地混入了所得细胞标本中，这样涂片时较易检查到病变细胞。(3)巴氏直接涂片富含大量影响观察的血液、黏液和纤维杂质等无诊断意义成分，造成涂片时细胞重叠，分布厚薄不一，常造成异常细胞被覆盖，从而漏诊。而液基保存液中则含有去除黏液和红细胞的试剂成分，大大减少这些干扰因素。

表3 两种制片法宫颈细胞学结果与组织活检结果符合率比较 [例]

综上所述，液基细胞学离心沉淀制片法由于固定效果好保持了细胞结构，离心混匀减少了涂片时标本细胞抽样误差，去除了多种干扰因素使得涂片均匀，容易观察，从而提高了异常情况的阳性检出率。因此，在宫颈细胞病变筛查时，离心沉淀涂片法要比传统巴氏直接涂片法优越得多，值得大力推广。

[1]郎景和.子宫颈上皮内瘤变的诊断与治疗[J].中华妇产科杂志,2001,36(5):261-263.

[2]马博文.子宫颈细胞病理学诊断图谱[M].北京:人民卫生出版社,2008:6-7.

[3]Anonymous.The 1988 Bethesda System for reporting cervical/vaginal cytologic diagnoses.National Cancer Institute Workshop[J].JAMA,1989,262(7):931-934.

[4]黄受方,张长淮,余小蒙.子宫颈细胞学Bethesda报告系统[M].北京:诊断病理学杂志社,2004:24-25.

[5]梅 平,刘艳辉,庄恒国,等.1747例宫颈阴道病变筛查结果分析[J].临床与实验病理学杂志,2005,21(1):70-72.