中等强度跑台运动对去卵巢大鼠肝脏脂类水平的影响

段玉双 卜淑敏 杨少锋 郝利科 王颖捷 陈永杰

首都体育学院（北京 100088）

绝经后女性由于卵巢功能衰竭易发生肥胖，尤其是以腹部脂肪堆积为主。肥胖导致肝脂堆积，而脂肪肝是隐源性肝硬化的诱因，甚至可发展为肝癌［1］。目前防治绝经性肥胖症发生的主要方法有激素替代疗法、限制饮食和运动，但激素替代疗法可能增加患子宫内膜癌和乳腺癌等的风险［2］，限制饮食会影响肌肉等其它瘦组织的正常营养供应，甚至导致强烈饥饿感，不易坚持。而运动因既能改善机体状态，又无副作用而备受青睐。大鼠去卵巢后，进食量增加而能量消耗减少，结果使体重、腹部脂肪和肝脏脂类水平增加，是目前国内外普遍使用的模拟绝经性肥胖综合症的理想动物模型［3，4］。有研究表明［5，6］，抗阻力运动和限制饮食联合干预能显著抑制去卵巢大鼠肝脏脂类水平增加，但单独运动能否抑制去卵巢大鼠肝脏脂肪堆积，目前尚无报道。本实验采用去卵巢肥胖大鼠模型［7］，观察单独进行中等强度跑台运动对去卵巢大鼠肝脏甘油三酯（triglyeride，TG）和总胆固醇（total cholesterol，TC）含量的影响，为防治绝经性肥胖症及其相关疾病的发生提供参考。

1 材料和方法

1.1 主要试剂和仪器

17β-雌二醇，Sigma产品；水合氯醛注射液，由北京大学医学部实验动物科学部提供；DSPT-202小动物跑台，杭州段氏制造厂生产；LG10-3A离心机，北京离心机厂；胆固醇、甘油三酯试剂盒，北京中生北控生物科技股份有限公司产品；721分光光度计，上海光华光学仪器厂；JA2003天平，上品仪器公司。

1.2 实验动物手术和分组

健康3月龄雌性SD大鼠 80只，体重230±10g。购自并饲养于北京大学医学部实验动物科学部［合格证号：SCKK（京）2006-0008］。适应饲养 1周后，按体重随机分为假手术组（20只）和手术组（60只）。手术前两组大鼠均禁食12～18h，腹腔注射水合氯醛（0.3m l/100g）麻醉，假手术组不切除卵巢，只将卵巢旁与卵巢等大的脂肪组织切除，手术组均从背部切除双侧卵巢。恢复1周后，按体重将手术组大鼠又随机分为去卵巢静止、去卵巢运动和雌激素3个组，每组20只。有12只大鼠在实验过程中先后因手术感染而死亡，最后纳入实验的动物数见表1。

1.3 运动训练安排和17β-雌二醇注射方案

跑台运动训练和17β-雌二醇配制及注射方案均参考我们前期研究并适当调整［8］。手术后第2周，去卵巢运动组大鼠在小动物跑台上开始适应训练1周，跑速从第1天的15min、0坡度逐渐增加到第5天的45min、5°坡度。正式运动训练方案为跑速18m/min、时间45min、坡度5°，每周5次。雌激素组每周颈部皮下注射2次17β-雌二醇，每次注射剂量为25μg/kg体重。所有处理均在每天上午进行。每周称体重1次，根据体重调整17β-雌二醇的注射剂量。假手术组和去卵巢静止组每天只在笼中自由活动。

1.4 标本采集和处理

分别于去卵巢后7周和14周时各处死一半动物。取材前大鼠均禁食12～14h，称体重后迅速剖开腹腔，收集子宫和腹腔内脂肪并称重。迅速将同一部位的一块肝脏切成小块分装入Ependof离心管后－80℃冷冻保存。

1.5 指标检测

用精密天平称取适量的冷冻肝组织，加入0.9%生理盐水匀浆制成10%的匀浆液。加入3.75倍体积的氯仿－甲醇混合液（2:1），混悬10min。再加入1.25倍的氯仿混合1min。离心（3000r/min）10min。弃上层液，收集下层液体，干燥。吹干后用甲醇定容，按照试剂盒说明书提供的实验步骤分别测定TG和TC含量，结果以每克肝组织中TC和TG的含量（mg/g）表示。

1.6 统计学分析

采用SPSS16.0统计软件进行分析。实验数据采用均数±标准差表示，组间比较采用One-Way ANOVA，P<0.05为差异有显著性，P<0.01为差异有极显著性。

2 结果

2.1 体重和体脂

表1显示，去卵巢后7周和14周时，去卵巢静止组体重、体脂和体脂含量均显著高于假手术组，而去卵巢运动组和雌激素组体重、体脂和体脂含量均显著低于去卵巢静止组。此外，去卵巢14周时，去卵巢运动组体重显著高于雌激素组。

表1 各组大鼠体重和体脂含量比较

2.2 肝脏TC和TG

表2显示，去卵巢后7周时，去卵巢静止组TG含量显著高于假手术组，TC含量无显著变化，去卵巢运动组TC和TG含量显著低于去卵巢静止组，而雌激素组TG含量显著低于去卵巢静止组，TC含量无显著变化。去卵巢后14周时，去卵巢静止组TC和TG含量仍显著高于假手术组，去卵巢运动组和雌激素组TC和TG含量均显著低于去卵巢静止组。

表2 各组大鼠肝脏TC和TG含量比较

3 讨论

绝经性肥胖是绝经后妇女经常面临的一种代谢综合症，是由于体内性激素水平减少，导致糖、脂肪代谢紊乱，使脂肪在体内和肝脏堆积［1］。目前多采用去卵巢大鼠模型模拟绝经后妇女肥胖的状态进行实验研究［9，10］。本实验中，大鼠去卵巢7周时，肝脏TG显著增加且一直持续到14周，此增加可被补充的外源性E2逆转，此结果与Paquette等人［10］报道的结果相似，再次验证了去卵巢能诱导大鼠脂肪肝形成。

降低体重是目前治疗肥胖患者肝脂紊乱和非酒精性脂肪肝疾病的常用方法。有氧运动能减肥这已是不争的事实。本实验中，在跑台运动分别处理5周或12周时，去卵巢运动组体重和体脂含量均显著低于去卵巢静止组，说明运动能持续抑制由于E2减少而引起的体重增加和腹部脂肪堆积，这与我们先前报道的结果一致［7］。此外，虽然本实验中去卵巢运动组体重和体脂仍然显著高于假手术组，但是体脂含量与假手术组相比没有显著差异，说明运动可以通过改善机体瘦组织和脂肪的比例，从而达到优化机体体成分的效应。相比之下，E2降低去卵巢大鼠体重的效果虽然大于运动，但其降低体脂含量的程度与运动相比没有显著差异，说明E2在降低体脂含量的同时也降低了瘦体重量。可见，运动比E2能有效改善去卵巢大鼠的体成分。

肝脏是脂质代谢的重要器官，而脂肪肝的发生与肝脏TC的输出相对不足或绝对不足导致肝脏脂质大量堆积有关。文献报道，单独限制饮食虽能降低去卵巢大鼠体重，但并不能降低去卵巢大鼠肝脂水平，而限制饮食与运动联合处理则能显著降低去卵巢大鼠肝脏TG含量［5］。本实验结果显示，跑台运动单独干预5周就能显著降低去卵巢大鼠肝脏TG水平并一直持续到实验结束（运动处理12周），而且其对TC的调节作用较E2快。提示单纯运动处理就能显著改善由E2缺乏所导致的肝脂代谢紊乱和肝脂蓄积，阻止去卵巢诱导的脂肪肝的形成，这与Johnson等人［11］在人体实验中得出的结果相似。此外Johnson等人甚至得出即使在不改变体重的情况下适当运动仍能显著减少肥胖患者肝脂水平的结论［11］。

4 总结

本实验结果表明，去卵巢能导致大鼠体脂和肝脂水平显著增加，而中等强度跑台运动能显著抑制去卵巢大鼠体脂和肝脂的增加。

［1］ Schneider JG，Tompkins C，Blumenthal RS，et al.The metabolic syndrome in women.Cardiol Rev，2006，333：208-14.

［2］ Chen WY.Exogenous and endogenous hormones and breast cancer.Best Pract Res Clin Endocrinol Metab，2008，22（4）：573-85.

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［5］Corriveau P，Paquette A，Brochu M，et al.Resistance training prevents liver fat accumulation in ovariectomized rats.Maturitas，2008，59（3）：259-67.

［6］Pighon A，Paquette A，Barsalani R，et al.Substituting food restriction by resistance training prevents liver and body fat regain in ovariectomized rats.Climacteric，2009，12（2）：153-64.

［7］张灏，卜淑敏，朱一力，等.跑台运动对去卵巢大鼠体重、腹腔内脂肪重量以及血清瘦素和脂联素含量的影响.中国运动医学杂志，2009，28（2）：175-178.

［8］李亚义，张凡，卜淑敏.中等强度运动和雌激素对去势雌性大鼠骨代谢的影响. 中国热带医学，2009，9（5）：836-837.

［9］Barsalani R，Pighon A，Rabasa-Lhoret R，et al.Liver of ovariectomized rats is resistant to resorption of lipids.Physiol Behav，2008，95：216-221.

［10］Paquette A，Chapados NA，Bergeron R，et al.Fatty acid oxidation is decreased in the liver of ovariectomized rats.Horm Metab Res，2009，41（7）：511-5.

［11］ Johnson NA，Sachinwalla T，Walton DW，et al.Aerobic exercise training reduces hepatic and visceral lipids in obese individuals w ithout weight loss. Hepatology，2009，50（4）：1105-1112.