母猪早期妊娠常用诊断技术及新技术研究进展

万积成 唐晓宾 张丽丽 （北京万华生物工程有限公司 100081）

母猪的早期妊娠诊断是提高母猪繁殖效率和畜牧业生产效益的重要技术措施，尤其是配种后20d前后的早期妊娠诊断是母猪繁殖技术中十分重要的内容。通过诊断，可以尽早的确定为妊娠母猪，以便及时采取措施，如未妊娠再进行配种，使之妊娠。这对于缩短母猪的产仔间隔、减少空怀期、提高繁殖率具有重要意义，经济价值很大。本文总结归纳了母猪妊娠诊断的技术，并对各种技术的优势与弊端进行分析说明，对母猪妊娠诊断的新技术及发展方向加以展望。

1 临床诊断法

1.1 观察配种后的表现 询问畜主猪何时发情、配种、人工授精或本交、以往妊娠配种次数、本次配种次数、最后一次何时配种、最后一次配种是否再发情、配种后食欲是否增加等；看母猪的腹部下垂与否、乳房是否肿胀等。如果母猪配种21d后不再发情或者配种后性情变得温顺、安静，食欲逐渐增加，膘情好转，皮毛变得光亮紧凑，腹围增大，行动变得小心稳重，阴户下联合处逐渐收缩紧闭，明显的向上翘，配种10d后，阴道颜色变白并附有浓稠粘液，触之涩而不润，这些都是母猪已经妊娠的表现[1,2]。此法不需要任何仪器与试剂，完全靠检验者的经验来进行判断，虽然简便，但是准确率不高。

1.2 外部接触法 先进行抓痒，使其卧下。用左手挟住最后两对乳房之上的两侧腹壁，并上、下、左、右滑动。妊娠2个月时最易摸清胎儿，母猪过肥则难以奏效[1]。

1.3 直肠检查 根据猪在妊娠期子宫角、子宫颈以及子宫壁等的变化情况来进行诊断。尽管此法准确率高，但由于猪较牛体格小，很难将手伸入直肠，且保定困难，费时费力，所以此方法在实践中意义不大[1]。

1.4 掐压腰背部法 母猪配种21d后，掐第9胸椎到第2腰椎之间，用拇指和食指掐压母猪出现凹背反射而无凹屈反射，说明已经妊娠；母猪出现凹屈反射而无凹背反射，说明没有妊娠。此方法是凭借经验，准确率不高。

1.5 尿液检查法 在母猪配种10d后，取清晨尿液10ml置于玻璃杯中，加入5%～7%碘酊1ml，煮沸后，如尿液呈现红色，说明已经妊娠；出现浅黄色或褐色，且冷却后颜色很快消失，说明未妊娠[2,3]。

1.6 激素法 母猪妊娠后，卵巢上的周期黄体维持下来且分泌孕酮的功能增强，因而体内孕激素水平很高，不会被外源的雌性激素诱发发情，因此在母猪配种后通过注射各种激素：孕马血清促性腺激素、已烯雌酚、雌二醇等，注射后妊娠母猪不会表现发情，而未怀孕母猪则会表现发情征兆[4,5]。此种方法确诊率高，不会造成母猪流产，母猪产仔数及仔猪发育均正常，但是需要专业人员操作，农村散养户对药剂的使用量及注射方法都没有很好的把握，不适合小型养殖规模的农户使用。

1.7 超声波诊断法 超声波诊断法是以高频声波对动物的子宫进行探查，然后将其回波放大后以不同形式转化成不同的信号显示出来，目前应用的诊断仪主要有A超、B超、多普勒超声三种。A超在70年代备受青睐，目前应用较少。B超是目前使用最多最先进的超声波诊断仪。超声波诊断妊娠具有无损伤、安全、准确等优点，但是价格昂贵，且损坏后不易修理，需要专业人员操作，目前只能在规模化猪场应用。（1）A超：是利用超声波来检查充满积液的子宫，声波从妊娠的子宫反射回来，并被转换成声音信号或示波器屏幕上的图像，或通过二极管形成亮线。这种仪器体积较小，操作简便，几秒钟便可得出结果，适合基层猪场使用。但膀胱积液、子宫积脓和子宫内膜水肿容易造成假阳性诊断结果。另外，这种诊断仪应注意其应用的对象，一些对大家畜使用的诊断仪应用于猪时，可能会使所有的被测对象都呈阳性。（2）B超：B型超声诊断仪可通过探查胎体、胎水、胎心搏动及胎盘等来判断妊娠阶段、胎儿数、胎儿性别及胎儿状态等。具有时间早、速度快、准确率高等优点，但价格昂贵、体积大，只适用于大型猪场定期检查。（3）多普勒：该仪器可通过测定胎儿和母体血流量、胎动等做较早期诊断。当周围环境中有噪音干扰或直肠探查部位有粪便阻塞时会出现假阴性诊断。此种方法一般需要用不同妊娠期探查的录音进行比照[6]。

2 实验室诊断方法

2.1 血浆孕酮测定 未妊娠而有发情周期的母猪，在发情期的第16d左右，外周血浆孕酮浓度下降，因此可在配种后16～24d检测，若血浆孕酮含量仍很高，则为妊娠的征象。猪妊娠22d时血浆孕酮含量一般在5mg/mL以上。但此方法不利于推广的原因为采集血样困难[7]。

2.2 血浆和尿中雌激素测定 猪妊娠25～30d以后，血液和尿中雌激素含量大大高于未妊娠猪，故可用来诊断妊娠。尿中雌激素可用化学方法测定；血液内雌激素则用放射免疫法。虽然应用这些方法准确率高，但由于仪器设备费用太大，操作技术复杂，且采集血、尿样品不便，所以在实践中很难被推广[8]。妊娠30d就能从血中测出硫酸雌酮，未妊娠猪则测不出来。血液中硫酸雌酮含量最高的时间是配种后24～26d，这时测定效果最好。

2.3 阴道活组织检查 上皮细胞的层数和形态与内分泌状况有密切关系。妊娠第26d上皮细胞平行排列成两行，细胞核浓缩，染成黑色，无乳头间栓。未妊娠猪有许多层次的上皮细胞，有大量的乳头间栓，制作组织切片检查。虽然该方法准确率在90%以上，但操作复杂，检查费时，不能立即获得结果，实用性不大[1]。

2.4 血小板计数法 文献报道，血小板显著减少是早孕的一种生理反应，根据血小板是否显著减少就可对配后数小时至数天内的母畜作出超早期妊娠诊断[9,10]。该方法具有时间早、操作简单、准确率高等优点。尤其是为胚胎附植前的妊娠诊断开辟了新的途径，易于在生产实践中推广和应用。在母猪发情配种前(当天)和配种后第1～11d从耳缘静脉采血20µl，置于盛有0.4ml血小板稀释液的试管内，轻轻摇匀，待红细胞完全破坏后再用吸管吸取一滴充入血细胞计数室内，静置15min后，在高倍镜下进行血小板计数。配种后第7d是进行超早期妊娠诊断的最佳血检时间。血小板数在第7d降到最低点(250±91.13)×103mm3试验母猪经过2个月后进行实际妊娠诊断，判定与血小板计数法诊断的妊娠符合率为92.59%，未妊娠符合率83.33%，总符合率93.33%[9]。马群山等试验符合率为89.53%[10]。李玉龙等所得总符合率为93.85%[9]。

该方法虽有时间早，准确率高等优点，但应排除某些疾病所导致的血小板减少。例如，肝硬化，贫血，白血病及原发性血小板减少性紫癜等症。

3 新技术的研究

根据母猪妊娠期孕酮周期性变化的规律，利用胶体金免疫层析法原理，以孕酮作为检测目标物，以孕酮水平判断母猪是否妊娠。在母猪配种后19、20、21、22d要密切观察猪的行为表现，一旦发现猪有发情的表现应立即进行检测，试剂板出现一条红线为阴性，确定为未怀孕，要及时配种，可避免假发情情况如果没有发情表现则第23d为最后检测时间，配在试剂板出现一条红线为阴性，表示未怀孕，可避免由于乏情延误诊断，出现两条红线为阳性，可确定猪已怀孕，应进入妊娠期管理。此方法具有准确率高、操作简便、检测迅速、常温储存、携带方便、对母体和胎儿安全无害等特点，而且只取猪尿进行检测，取样方便，结果读取简单，不需要专业人员操作，因此特别适合小规模猪场和散养户使用，实用性强，推广应用前景良好。

综上所述，母猪早期妊娠诊断的方法很多，也各有利弊，各种养殖户要根据自己的养殖规模与特点选择适合自己的诊断方法。日本学者菅原七郎曾提出家畜早期妊娠诊断的5条原则[11,12]：（1）在妊娠后不久的时间内尽早地进行诊断；（2）妊娠和未妊娠母畜诊断的准确率应达到85%以上；（3）方法简便；（4）对妊娠母畜和仔畜安全无害；（5）经济实用。所以简便而有效的进行早期妊娠诊断，是畜牧工作者长期以来试图解决的问题之一，因为尽早发现空怀，尽早采取措施复配，才不致错过配种季节。对母猪而言，每耽误5.5个发情周期就少产1窝。母猪配种后20d前后的早期妊娠诊断，是母猪繁殖技术中十分重要的研究内容。因此早期妊娠诊断技术在养猪生产中具有很大的研究应用价值和推广价值。

[1]龙义勇. 几种常见猪妊娠诊断方法的利弊[J]. 养猪, 2009, 3:73.

[2]余志诚. 家养母野猪的妊娠诊断[J]. 湖北畜牧兽医, 2002, 2, 40.

[3]申子平, 董载勇. 母猪早期妊娠诊断技术[J]. 养猪, 2004, 5:20.

[4]蒋如明. 母猪妊娠诊断的方法[J]. 养猪, 2000, 12: (2).

[5]林峰, 渊锡藩. 生殖激素制剂对母猪早期妊娠诊断效果研究[J].西南农业大学学报, 2001, 23, 1: 42-44。

[6]冯现明. B型超声诊断法在母猪怀孕鉴定中的应用[J]. 中国猪业,2005(5).

[7]周乐. 家畜妊娠诊断的研究进展[J]. 国外兽医学-畜禽疾病, 1995,16(3): 1-5.

[9]张寿. 血小板计数法在高原母猪超早期妊娠诊断上的应用[J]. 辽宁畜牧兽医, 2000(5): 3-4.

[10]马群山等. 妊娠三江白猪相关性血小板早孕预测模型及分析[J].黑龙江农垦大学学报, 第12卷(2): 88～93.

[11]菅原七郎. 家畜繁殖生理の研究动向とThの应用(42)[J]. 畜产の研究, 1985, 39(6): 95.

[12]菅原七郎. 家畜繁殖生理の研究动向とThの应用(41)[J] .畜产の研究,1985,39(5): 85-88.