紫外分光光度法测定牛黄上清胶囊中胆酸的含量

陈 琦

吉林省长春中医药大学附属医院(130021)

牛黄上清胶囊是由人工牛黄、薄荷、菊花等19味中药组成的中药复方制剂，具有清热泻火、散风止痛的功效。临床上用于治疗热毒内盛、风火上攻所致的头痛眩晕、目赤耳鸣、咽喉肿痛、口舌生疮、牙龈肿痛、大便燥结[1]。具有服用剂量少，疗效肯定等优点。本品的质量标准收载于《中华人民共和国药典》(2005版)[1]中。本品中人工牛黄含有效成份胆酸，其含量的测定是控制人工牛黄质量的一个重要指标，但是均未收录牛黄上清胶囊中胆酸的含量测定方法，只含胆酸的定性鉴别。为能更好地控制本制剂质量，本文采用紫外分光光度法测定牛黄上清胶囊中胆酸的含量。

1 仪器与试剂

德国赛多利斯仪器有限公司BP211D型十万分之一电子天平，美国瓦里安公司紫外可见分光光度计(Cary 50 UV-Vis)，电热恒温水浴锅(江苏南通县通海电器厂)等；胆酸标准品(中国药品生物制品检定所)批号为0078-9312，牛黄上清胶囊(A药业，批号为090813、090821、090830)，硫酸溶液(取水65mL，加浓硫酸50mL，摇匀，即得)。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1 标准溶液的制备

精密称取胆酸标准品25mg，置25mL量瓶中，加60%冰醋酸使溶解，并加至刻度，摇匀。精密吸取5mL，置另一25mL量瓶中，加60%冰醋酸至刻度，摇匀，备用。

2.1.2 样品溶液制备

取牛黄上清胶囊10粒，精密称定，求得平均装量，取内容物研细，精密称取约相当于5粒内容物的重量，置25mL量瓶中，加60%冰醋酸适量，置70℃水浴中不断振摇，加热20min，取出，放冷，过滤，加60%冰醋酸至刻度，摇匀，备用。

表1 精密度考察

表2 重现性考察

表3 回收率实验结果 mg

表4 牛黄上清片中每片胆酸的含量

2.2 测定波长的选择

精密吸取胆酸标准液1mL，置具塞刻度试管中，加硫酸溶液14.0mL，摇匀，置70℃水浴中加热10min，取出放冷，以相应的试剂为空白，扫描，200～800nm波长范围内测定吸收光谱。结果胆酸对照品溶液在385nm波长处有最大吸收峰，故以385nm为测定波长。

2.3 标准曲线的制备

精密吸取胆酸标准液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分别置具塞刻度试管中，加60%醋酸到l.0mL，再加硫酸溶液14.0mL，摇匀，置70℃水浴中加热10min，取出放冷，照分光光度法(附录Ⅴ)在385nm波长处测定吸收度A，以A为纵座标，浓度C为横座标，绘制标准曲线，得回归方程为Y = 1.7993 X + 0.0135，r = 0.9996。结果表明，胆酸浓度在0.0386～0.1980mg/mL范围内浓度与吸收度有良好的线性关系。

2.4 精密度实验

取胆酸对照品溶液，按上述的方法重复测定6次吸光度的RSD为0.20%，见表1。

2.5 重现性试验

分别精密吸取胆酸标准液0.6mL 6份，按标准曲线项下操作，测得吸光度的RSD为0.23%，加表2。

2.6 溶液的稳定性试验

取标准曲线项下的胆酸溶液，按上述条件每间隔20min测定一次吸收度，结果表明在5h内吸收值稳定。

2.7 回收率测定

精密称取样品细粉约5粒重量及胆酸标准品约0.3mg，置25mL量瓶中，按样品溶液制备项下操作，所得滤液按标准曲线项下测定，结果见表3。

2.8 样品测定

取3批样品，按样品溶液制备项下操作，平行制备3份，所得滤液按标准曲线项下测定吸收度，并根据回归方程计算每粒牛黄上清胶囊中胆酸含量(mg)，见表4。

3 讨 论

按方法同时制备空白样品溶液，在200～800nm的波长范围内扫描，无紫外吸收，不干扰胆酸的含量测定，故选择385nm波长作为胆酸的含量测定的检测波长。

牛黄上清胶囊的原标准中无胆酸的含量测定，为更好控制该品种的质量，经多次测定，牛黄上清胶囊中胆酸的含量限度为不低于0.34mg/片。

通过上述方法学考察，建立了牛黄上清胶囊中胆酸的含量测定方法，使其质量标准更趋严谨科学完整，并且该方法简便快捷，结果准确，重现性好，回收率高，能有效控制牛黄上清胶囊的质量。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典.一部[M].北京:化学工业出版社,2005.