TP-ELISA联合PCR法在梅毒血清学检验上的应用

姜 丹

南京爱尔眼科医院（210000）

当前应用在梅毒血清学上的检验方法主要有梅毒酶联免疫吸附试验法（TP-ELISA法）、梅毒胶体金法（SYP法）、梅毒螺旋体制动试验法（TPI法）、甲苯胺红不加热血清试验法（TRUST法）、荧光密螺旋体抗体吸收试验法（FTA- ABS法）、梅毒螺旋体血凝试验（TPHA法）、梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验法（TPPA法）和聚合酶反应法（PCR法）等十余种，在临床实验室使用的方法一般是TP-ELI SA、TRUST和PCR法，而临床检验室则使用的较少。因为检验的方法较多，各种方法在临床方面的应有价值有一定特殊性，如何将这些方法运用于临床梅毒的检测，这是在临床实验室当中急切需要解决的重要问题[1]。本次研究对所采用的循证检验方法进行了深入的探讨，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

依据梅毒诊断的标准，确定梅毒潜伏的早期患者共计19例，Ⅰ期梅毒为10例，Ⅱ期梅毒共计23例，Ⅲ期梅毒共计4例，在经过临床治愈以后，进行梅毒复查的病例总计12例，进行健康体检者人数共计30例。

TP-ELISA 试剂是厦门新创生产，TRUST 试剂是上海荣盛生产，而PCR 试剂是由中山医科大学达安基因诊断中心生产。

1.2 方法

采用TP-ELISA、TRUST和PCR[2]3种方法对上面的71 例标本根据试剂盒上的相关说明书操作，进行平行的检测。3种方法产生的敏感度、阳性率与特异性的相关计算将分别进行。最后采用的是χ2检验来进行各组之间的显著性检验，这种检验方法能够充分显示出之间的显著性。

2 结 果

98 例血清标本采用TP-ELISA、TRUST与PCR 方法来进行检测，其结果见表1。本实验结果可以发现，使用TP-ELISA、TRUST和PCR 3种方法来检测梅毒的敏感度，其中TRUST 是最低，PCR最高，其特异性TRUST最低，而TP-ELISA与PCR则全部达到了100%。TRUST 和本次实验所相关联的疾病具有明显交叉反应，产生假阳性，显示其特异性较差，而对早期梅毒、Ⅰ期与Ⅲ期梅毒反而出现了假阴性，显示其敏感度比较差。

3 讨 论

现代临床在实验检测方面具有很多特点，如多参数分析、自动化、高质量控制、流水线检测、床边检测、微量标本检测等方便快速，但是我们要看到现代临床试验在诊断方面仍然面临一些挑战。当前国际医学界正在关注的热点是循证医学，随着循证医学的逐渐兴盛，在临床医学的研究及实践方面发生了很大的转变，这也促使临床治疗模式发生了改变。循证医学的应用面已经扩大到医疗卫生的各个层面之中，产生了很多分类，如循证检验医学、循证内科、循证诊断、循证决策和循证外科等。实行循证检验医学所采用的5个主要步骤是：①明白要进行分析的临床疑问是什么，在循证医学的范围之内要明确临床中具体的疑问点。②围绕着具体的疑问来实行系统查阅相关的文献资料与最新证据，在进行文献资料的查找时，要注意紧紧围绕着具体的疑问来展开，这样能够将查找范围进一步缩小，提高针对性。③对相关的数据要实行批判性的评价，对于有用性和可靠性的关键参数要进行认真的分析，在对相关数据进行批判性的分析时，要强调上面的谈到的有用性与可靠性，以便寻找出最佳的证据。④将已经作出相关评价的结论运用到临床实践当中去。在对相关数据进行批判性的评价后，要看这一评价运用到临床中去的时候，能否起到有效的作用，这也是进行实验的最终目的。⑤对实验的临床实践实行认真细致评价。实验的批判性评价在作出以后，要进行临床方面的大面积推广，因此必须要对临床的实践效果进行认真细致的评价，这样能够保证临床上的实用价值，保证在实际应用中的安全性[3]。

循证检验医学将运用于临床医学检测的经验进一步上升到了科学的高度，并且能够解决现代检验、诊断等所面临的多种困难与挑战。所以，临床检验医学的研究方面一定要做到科学化，统计的方法一定要正确，只有这样才能够为临床疾病在诊治和后期的预防上提供科学有效的证据。检验医学与临床医学都应该遵守客观规律和科学的事实证据，两者要有机结合在一起，才能进一步推动实验诊断的发展。目前，检验医学的发展十分迅速，最新的检测仪器、指标与项目等都不断出现。新的实验方面的检查要进行充分评价，并进一步确定其可靠性，这样才能够进一步推动医疗决策的制定和今后经济效益的着力点，以期待进一步运用到医疗实践当中。比如说现在使用的全自动生化分析仪和全自动血液分析仪，这两种仪器取代了以前的手工操作，并将很多种检测项目所使用的检测方法也进行了进一步的改进，这使得检验的最终结果更为准确、可靠。血凝仪的推广使用，使内源凝血系统、外源凝血系统与各种凝血因子的实际情况检测变得更为简便与快捷。另外PCR技术的使用，使得结核病原体的检测，从原先的40d逐渐减少到了当前的几个小时，这些先进的技术在经过了循证以后渐渐推广到临床之中，这对临床方面的作用是非常具备推广价值的[4]。

表1 98 份血清标本3种方法检测结果（例）

[1]李成辉,贾乃光.浅论循证医学[J].中日友好医院学报,2004,18(2):123-124.

[2]张世英,洪帮兴,司徒潮满等.荧光定量PCR技术在霍乱弧菌检测中的应用[J].中国公共卫生,2004,19(3):345-346.

[3]刘媛.浅析新形势下循证检验医学的现实意义[J].西南军医,2006,8(2):63-64.

[4]王兰.如何解决临床检验工作中的常见问题[J].实用医技杂志,2006,13(23):4196-4197.