大黄游离蒽醌固体分散体的制备及溶出研究

刘久青 李茂星*

现代药理学研究表明，大黄游离蒽醌（free anthraquinones of rheum，FAQR）大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚等几乎无泻下作用[1,2]。具有明显的抑制幽门螺杆菌[3]，保护胃黏膜，抑制胃溃疡的功能[4]。近年来被广泛地应用于胃溃疡、慢性肾功能衰竭、糖尿病肾病、尿毒症等[5]。但FAQR的水溶性差，不易被机体摄取吸收，故其生物利用度低。将难溶性药物制成固体分散体，是增加药物分散度、溶解度、溶出速率、提高药物生物利用度的一种有效方法[6]。本文以PVP为载体，采用溶剂熔融法制备FAQR-PVP固体分散体，并研究其溶出特性，现报道如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器

8453型紫外分光光度计（惠普公司，美国）；Bruker ISS66v/S红外光谱仪（ Bruker公司，德国）；药物释放测定仪（江苏无锡化工机械厂）；旋转蒸发仪（上海医用分析仪器厂）。BP210S电子分析天平（赛多利斯有限公司）。

1.2 材料

大黄药材购于甘肃兰州；大黄酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110796-200518）；聚乙烯吡咯烷酮（PVPK30），20021213，杭州中美华东制药有限公司，人工胃液，甲醇（分析纯），所用其他化学试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 FAQR的提取与精制[7]

大黄500g用50%乙醇2000mL 回流3次，每次1h，合并乙醇提取液，减压回收乙醇。按20倍体积趁热加入1体积的浓HCl，搅拌，放置30min，用乙醚提取糖浆状物，放出糖浆状物后用与乙醚等体积的5%KOH提取，放出碱液，挥去残余乙醚，用浓HCl调碱提取液到pH 2～3，生成黄色沉淀，抽滤，水洗至中性，干燥得总游离蒽醌。烘干备用。

2.2 含量测定

加碱显红色是蒽醌类化合物的共有特性，取一定浓度大黄酚标准品及提取所得FAQR的无水乙醇溶液适量，加5%NaOH-2%NH3•H2O碱液，样品均成红色，在400～800nm波长范围内进行扫描，见图1，结果表明大黄酚和FAQR在505nm波长处有相同的吸收峰和最大吸收波长，且吸收度稳定，故选用大黄酚为标准品，以加碱显色法来测定样品中游离蒽醌的含量。

精称大黄酚标准品5.0mg，用无水乙醇定容至100mL，得标准溶液（50μg/mL）备用。分别取标准溶液 0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL于10mL容量瓶中，分别以无水乙醇加至3.0mL，再加入混合碱液（5%NaOH-2%NH3H2O）7.0mL显色，测定吸收度并与浓度作线性回归分析，得回归方程为A=0.02525C+0.0045，R=0.9998），表明FAQR在2.5～15.0μg/mL浓度范围内线性关系良好。

图1 大黄酚和游离蒽醌（FAQR）吸收光谱图（5%NaOH-2%NH3•H2O显色）

2.3 固体分散体的制备

精密称取一定量的FAQR，加入适量无水乙醇溶解，按1∶2、1∶4、1∶8、1∶12比例称取PVP作为载体，也用无水乙醇溶解后混合，置于旋转蒸发仪中，减压除去乙醇，迅速移至-20℃冰箱中，继续冷却30min，取出剥离研细过60目筛，避光保存。

2.4 固体分散体中FAQR溶解性能的研究

2.4.1 固体分散体中FAQR溶解度的测定

取100mL具塞的三角烧瓶两只，各加水50mL，加入一定量的样品，25℃下磁力搅拌1h，使成过饱和溶液，过滤，取续滤液1mL，适当稀释后按标准曲线项下的测定方法测定吸收度，计算样品及样品中游离蒽醌的溶解度。

2.4.2 体外溶出速率的测定

参考药典的溶出度桨法[6]设定实验条件。搅拌速度为100r/min，人工胃液900mL（经脱气处理），预热37℃并保温。精密称取各试样适量（相当于FAQR 50mg），均匀撒入搅拌着的溶液中，当药物粉末接触溶液时，分别于1、2、5、8、10、15、20、30、50min计时。通过玻璃微孔滤膜管滤过（0.8μ m），定位吸取滤液1.0mL（随即补加1.0mL同温介质）置50mL容量瓶中，放至室温，适当稀释后按2.2项条件测定含量，计算累积释放百分率，求算体外溶出参数T50（药物溶出50%所需时间）、Td（药物溶出63.2%所需时间）。绘制溶出曲线，结果见表1、图2。

表1 样品的溶解度及体外溶出参数值

2.5 红外光谱扫描

红外扫描结果（图3）：固体分散物与PVPK30在红外光谱指纹区和其他区基本相似，固体分散体中FAQR和PVPK30载体分子间未发生化学反应。

图2 样品体外溶出速率图

图3 样品红外扫描图

3 讨 论

由于PVP具有较高的熔点（275℃），故采用溶剂法制备CsA固体分散体。PVP是一种无定形物，在蒸去溶剂后，仍以无定形状态存在；其在提高CsA可润湿性和保证药物的高度分散性的同时，在溶剂蒸发的过程中，由于氢键作用、络合作用使粘度增大，抑制药物晶核的形成及成长。因此以PVP为载体制备CsA固体分散体的增溶效果明显。CsA∶PVPK30比例为1∶4的固体分散体具有良好的体外速释作用。

[1]陈琼华.大黄的实验研究和临床应用[J].新医药学杂志,1974(5):34-40.

[2]楼之岑.大黄研究的回顾与前瞻[J].北京医科大学学报,1993,25(5 Suppl):1-3.

[3]赵瑞芝,欧润妹,章新生,等.不同提取方法对大黄游离蒽醌含量及其抑菌活性影响的研究[J].中国药学杂志,2001,36(7):483-485.

[4]董慧,陆付耳.大黄素治疗消化系统疾病的研究进展[J].中国中西医结合消化杂志,2004,12(3):191-194.

[5]刘凯,郑海生.大黄酸的药理作用研究述略[J].中医药刊,2004,22(9):1732-1735.

[6]李宝红,张立坚,东野广智,等.半边旗二萜类化合物5-Fu聚乙二醇固体分散体的研究[J]. 中药材,2004,27(1):45-47.

[7]刘翠哲,刘喜纲,王汝兴.大黄中总蒽醌的提取工艺研究进展[J].天津药学,2004,16(4):40-42.