手机传播乙型肝炎病毒的可能性分析

李延强

急、慢性活动性肝炎患者的血液中含有肝炎病毒，如果不彻底清除手机上被污染的肝炎病毒，手机就可能成为肝炎的传染源。

为了解由此引起的乙型肝炎病毒（HBV）感染的可能性，我们进行了相关调查及实验，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 2006至2008年在同一城市中随机抽取具有口腔门诊的三级医院、二级医院、一级医院各5所，现场调查记录口腔门诊中目前采用 的手机消毒与灭菌方式。每所医院随机抽取1个诊室内用于修复、牙周治疗、牙体及牙髓治疗后污染的手机。随机抽取诊室内消毒与灭菌后、在有效期内、使用前的手机。

1.1.2 含鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的上海麻鸭血清，核酸杂交DHBV DNA阳性（+++），-70℃保存，由中国医学科学院医药生物技术研究所病毒室提供。梅里斯区种鸭场动物饲养场1日龄鸭，DHBV DNA检测均为阴性。安徽庐江鸭DHBVLJ76株全基因克隆质粒（DHBV DNA探针）由中国医学科学院医药生物技术研究所提供。HBsAg ELISA检测试剂盒为北京四环生物工程有限公司产品。酶标仪：BIO-RAD 450型、DG3022型。

1.2 方法

1.2.1 手机HBV污染情况检测

用BIO-RAD 450型酶标仪ELISA方法检测每支手机洗脱液中HBsAg抗原性。检测结果：S/N≥2.1判断为阳性。通过HBsAg抗原性存在与否间接判断HBV污染情况。

1.2.2 手机DHBV污染情况

用DHBV DNA强阳性鸭血清201滴染手机顶端，将手机37℃恒温干燥30min。将手机顶端浸没于2mL无菌PBS液中，振荡洗脱40s。将1/2份洗脱液直接进行DHBV DNA水平检测，剩余1/2洗脱液分为3等份，每份经胫静脉注射传染鸭，雏鸭体温为（39±0.5）℃。本研究中共用DHBV DNA检测阴性的7支手机洗脱液接种7组鸭，每组3只雏鸭。转染后10d取血清检测DHBV DNA水平。将样本点膜，用32P标记DHBV DNA探针进行直接斑点杂交，放射自显影膜片斑点，用DG3022型酶标仪测定吸光度（A值，λ：490nm），以杂交斑点A值作为DHBV DNA测定水平。取每组3只雏鸭血清DHBV DNA的平均A值作为该组结果。阳性对照组为DHBV DNA强阳性鸭血清。无菌PBS为阴性对照。

2 结 果

2.1 手机消毒与灭菌方式

为了解近年来手机消毒与灭菌方式的变化情况，2006至2008年，对口腔医疗机构手机消毒与灭菌方式进行了3次调查，结果显示，采用灭菌方式处理使用后手机的比例显著上升，尤其是采用压力蒸汽灭菌的比例上升明显（P＜0.01），采用擦拭消毒法的比例显著下降（P＜0.01），结果见表1。

表1 手机消毒与灭菌处理方式的变化情况

2.2 使用后手机HBsAg的检测结果

随机抽取使用后未经过任何处理的手机121支，检测其洗脱液中HBsAg抗原性，S/N≥2.1的仅有2件。抽取的手机（使用后），无论是用于修复，还是用于牙周、牙体及牙髓治疗，均存在严重的血液污染现象。检测结果显示，使用后的手机存在HBsAg污染，但是污染率远远低于文献报道的结果。

检测经压力蒸汽灭菌、消毒剂浸泡、表面擦拭消毒等方式处理后的784支手机洗脱液中HBsAg的抗原性，结果显示，S/N均＜2.1，见表2。

表2 不同消毒灭菌方法处理后手机洗脱液中HBsAg的抗原性

HBsAg阳性对照平均S/N值范围为208.0～244.1，HBsAg阴性对照平均A值范围为0.003～0.020，试剂盒灵敏度：1g/L

2.3 手机DHBV污染情况

经DHBV DNA强阳性鸭血清污染的手机，37℃恒温干燥处理30min后，置无菌PBS液中振荡洗脱40s。对每支手机的1/2洗脱液直接进行DHBV DNA斑点杂交检测，结果均为阴性；将剩余的1/2洗脱液再3等份后分别转染3只鸭，在转染后10d取血清进行DHBV DNA斑点杂交检测，结果均为阳性，3组鸭血清平均A值超过阳性对照组A值，说明经过鸭体内复制后，病毒含量增加，结果见表3。

表3 污染手机洗脱液中DHBVDNA检测结果

3 讨 论

HBV以血液传播为主。在临床上，HBV主要通过被体液污染的诊疗器械传播。口腔科器械体液污染机会较多、程度较严重，且由于手机的结构特殊，灭菌难度相对较大，因此，口腔科属于医源性感染危险性较高的科室之一[1]。保证口腔器械临床使用的安全性，预防HBV感染是口腔临床医学工作的重点之一。

我们对不同规模的口腔医疗机构目前设备配备情况进行了相关调查。结果显示，口腔专科医院的器械数量能够满足消毒与灭菌时器械周转的基本需要；综合医院口腔门诊、口腔科及口腔诊所，治疗台及手机的数量随口腔诊室规模的大小，在配备数量上相差较大。

手机的消毒与灭菌是控制医源性感染的关键因素之一。目前，欧美发达国家中90%～95%使用压力蒸汽灭菌法对手机进行灭菌。为此，我们于2006年开始对某市所有口腔医疗机构开展医院感染专业知识、消毒与灭菌技术培训，并对培训前后口腔医疗机构手机消毒与灭菌方式进行调查。结果表明，采用压力蒸汽灭菌法的比例显著上升，从2008年的27.06%上升至2008年的84.51%，接近欧美发达国家水平；采取擦拭消毒的比例从2006年的60%以上，下降到2008年的10%左右。这一结果说明，专业技术培训在预防控制医院感染工作中具有非常重要的作用。

采用ELISA方法对手机是否存在HBsAg进行检测，结果表明，手机上唾液、血液等体液污染极为严重，但对121支污染的手机检测结果中，仅有2支HBsAg阳性。即使是采用表面擦拭法处理后、手机腔隙内并未得到有效处理的手机，其机头洗脱液HBsAg检测仍为阴性。这些检测数据也正是目前一些口腔医疗机构采用表面擦拭方法处理污染手机的理由及依据。

采用DHBV进行实验，用DHBV人工污染手机后，用其洗脱液转染鸭。结果显示，将DHBV DNA检测阴性的手机洗脱液接种1日龄鸭，7组中有6组A值超过阴性对照，其中3组A值超过转染前血清的A值。结果表明，在污染剂量低于目前检测方法可检出的最低剂量下限值的情况下，即常规检测结果阴性的情况下，并不能排除感染的可能性。污染剂量尽管很低，但感染机会仍然存在[2-4]。

压力蒸汽灭菌可杀灭一切活的微生物，包括抗性最强的细菌芽孢；能够完全灭活各类病毒，包括HBV。因此，预防控制医源性HBV感染的有效手段是对所有接触破损黏膜或进入无菌组织的口腔器械进行灭菌处理，目前在我国首选的灭菌方式是压力蒸汽灭菌。

[1]陈兰羽,章晓鹰,陈建杰.HLA复合体与乙型肝炎病毒感染预后及治疗关系的研究进展[J].国外医学流行病学传染病学分册,2004,31:37-39.

[2]邓小虹,孙正,苏静.牙科手机消毒与灭菌现状调查[J].中华预防医学杂志,2004,38:365-368.

[3]陈智.乙型肝炎病毒cccDNA研究现状[J].中华传染病学杂志,2003,21:8-10.

[4]邓小虹,武迎宏,罗薇,等.口腔器械灭菌方法探讨[J].中华医院感染学杂志,2003,13:34-37.