赵秀峰,常 超,信栓力,田 莉,朱元州
姜黄素(Curcumine)是从姜黄属中药姜黄、郁金等的块茎中提取出来的一种酚性色素,味辛、苦,性温、无毒,具有破血行气,通经止痛等作用,且毒性低。现代药理学研究显示姜黄素具有抗炎、抗氧化、清除自由基、抗肿瘤、降脂、抗微生物,对消化系统和心血管系统的作用等已引起临床重视[1-3]。本实验研究探讨姜黄素在心肌细胞缺血再灌注损伤中的保护作用。
1.1 主要仪器及试剂 仪器:恒温水浴箱(武汉科学仪器厂),流式细胞仪(美国Becton-Dickinson公司)微型动物呼吸机(浙江大学医学仪器厂),ACEO I半自动生化分析仪,离心机(LXJ-11,上海医用分析仪器厂)。姜黄素购自湖北省中医院。
1.2 实验动物及分组 选用健康雄性SD大鼠60只,体重250 g~300 g,3个月~4个月龄,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。随机分为缺血再灌注(IR)组、姜黄素(CUR)组、空白对照(CON)组。
1.3 实验方法
1.3.1 动物模型的制备 SD大鼠行腹腔内注射10%乌拉坦(1 mL/100 g)腹腔麻醉后,行气管插管后,接上微型小动物呼吸机。于左侧第2肋~5肋间开胸,以左心耳下缘进针,经左冠状动脉前降支后,于肺动脉圆锥支下缘出针,用5号线结扎。线两段共同穿过聚乙烯小管,用止血镍夹夹紧小管造成心肌缺血,放松使心肌复灌,从而制作缺血再灌注模型。IR组:缺血30 min再灌注120 min。CU R组:缺血前30 min尾静脉推注姜黄素(20 mg/kg),余同IR组。CON组行开胸上微呼吸机后,不做特殊处理。
1.3.2 血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)检测 各亚组于麻醉后及缺血再灌注结束后,分别取股静脉血,离心后分离血浆,用半自动生化分析仪测定含量。
1.4 统计学处理 采用SPSS 10.0软件进行分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用成组t检验。P<0.05为有统计学意义。
2.1 各组CK浓度比较(见表1) 麻醉后,3组大鼠血清中CK浓度无统计学意义(P>0.05),再灌注2 h后,与 IR组相比,CUR组血清肌酸激酶明显降低(P<0.05)。
表1 各组CK浓度比较(±s) ng/L
表1 各组CK浓度比较(±s) ng/L
组别 麻醉后 再灌注2 h后CON 组 16.1±3.5 -CU R组 16.3±3.3 101.7±10.5 IR组 15.9±3.1 136.2±12.2 P>0.05 <0.05
2.2 各组LDH浓度比较(见表2) 麻醉后,3组大鼠血清中LDH浓度无统计学意义(P>0.05),再灌注2 h后,与 IR组相比,姜黄素组血清 LDH明显降低(P<0.05)。
表2 各组LDH浓度比较(±s) U/L
表2 各组LDH浓度比较(±s) U/L
组别 麻醉后 再灌注2 h后CON组 1.57±0.21 -CUR组 1.55±0.26 9.70±0.31 IR组 1.54±0.22 18.30±0.37 P>0.05 <0.05
CUR作为姜黄的主要活性成分,具有抗诱变、细胞毒性及抗氧化、抗菌抗病素作用。也是咖喱、芥末的主要黄色色素,来源相对广泛,价格低廉且不良反应较小,本研究用姜黄素提纯制剂预处理缺血再灌注的心肌时发现,相对于缺血再灌注组,姜黄素能降低血浆中LDH、CK的浓度,从分子生物学上来说能够减轻心肌细胞在缺血再灌注中的损伤,考虑姜黄素具有一定的心肌保护作用;但是这种作用除了基于姜黄素的双重抗氧化作用机制,减轻了心肌钙超载、抑制了自由基[4-6],通过抑制脂质过氧化而对心肌缺血性损伤有保护作用[7]。在缺血再灌注中是否激活了其他保护性的基因序列而启动了相应的保护反应,具体不是很清楚。姜黄素作为抗心肌缺血再灌注损伤的药物之一,在发挥心肌保护作用过程中的可调节环节值得进一步探讨和研究,为临床提供了一条可能的新途径。
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[6] Das KS,Das CK.Curcumin(diferulylmethane),a singlet oxygen(102)quencher[J].Biochem Biohphys Res Commun,2002,295(1):62-66.
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