冀南地区益母草不同采摘期及不同部位中盐酸水苏碱含量的比较

马登斌 张文彦 王晓敏 马 静

邯郸市中医院，河北 邯郸 056001

益母草为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt的新鲜或干燥地上部分。鲜品春季幼苗期至初夏花前期采割；干品夏季茎叶茂盛、花未开或初开采割，2005版中国药典一部把益母草分为春季采摘的为鲜益母草，夏季采摘的为干益母草。具活血调经，利尿消肿的功效。用于月经不调，痛经，经闭，恶露不尽，水肿尿少；急性肾炎水肿等症。近几年来文献中有关用HPLC法或ELSD-HPLC法测定益母草中盐酸水苏碱的报道也不少，但未发现针对益母草不同采摘期、不同部位中盐酸水苏碱含量测定的报道。本文就冀南地区紫花益母草在春、夏两季采摘期及其不同部位中盐酸水苏碱含量进行比较，为我们合理用药提供参考依据。

1 仪器与试药

日本岛津LC2010AT液相色谱仪；ELDS-300S蒸发光散射检测器；日本岛津AUW120D电子天平；盐酸水苏碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110712-200306）；益母草样品春（鲜益母草）、夏（干益母草）两季山上采摘，除去泥土后，洗净，晒干，按全草、茎、叶、根分类，并研成细粉。水为纯化水，乙腈为色谱醇；乙醇为分析醇。

2 试验方法与结果

2.1 色谱条件及系统性试验 色谱柱：采用Gentamysil RP18（5u，250×4.6mm），流动相：乙腈-水（90：10）为流动相，流速：0.8min/mL，Model 300S ELSD检测器，漂移管温度：70℃、气体：空气流速：1.2L/min，柱温：室温；进样量：样品溶液10μl、对照品溶液10μl、20μl。

2.2 对照品溶液的制备 精密称定盐酸水苏碱对照品0.01511g，置25ml容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 供试品溶液的制备 取供试品细粉（过二号筛）约0.3g，精密称定，置锥形瓶中，加乙醇50ml，加热回流1.5小时，放冷，滤过，滤渣及容器用乙醇50ml分次洗涤，滤过，合并滤液，蒸干，残渣加乙醇溶解，转移置25ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液1ml，置10ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，用0.45um的微孔滤膜滤过。

2.4 线性关系考察 精密量取对照品溶液10ul、20ul、30ul、50ul注入液相色谱仪中进行测定，以峰面积对数值（Y）与进样量ug对数值（X）线行回归，得回归方程为Y=2.5682X+2.9583；r=0.9994，盐酸水苏碱在6.04～30.02ug的范围内线性关系良好。

2.5 稳定性实验 按“2.3”项下方法制备供试品溶液，分别在0，1，2，5，10h测定，每次进样10ul，测定盐酸水苏碱的峰面积，RSD值为0.69%。表明样品溶液稳定。

2.6 精密度试验 按“2.3”项下方法制备供试品溶液，连续进样5次，每次10ul，测定盐酸水苏碱的峰面积，RSD值为0.74%，表明仪器精密度良好。

2.7 加样回收率实验 取已知含量的益母草全草6份各约0.15g，精密称定，分别加入对照品溶液2ml，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，分别取上述溶液10ul注入液相色谱仪，测得盐酸水苏碱的峰面积，计算峰面积的对数值，依据回归方程，计算回收率。盐酸水苏碱平均回收率为98.27%，RSD值为1.83%，结果表明该方法准确度好。结果见表1。

2.8 样品含量测定 取春（鲜益母草）、夏（干益母草）两季益母草全草、根、叶、茎细粉，按上述供试品溶液制备方法制备，精密量取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪测定，测得盐酸水苏碱的峰面积，计算峰面积的对数值，依据回归方程，计算各样品所含盐酸水苏碱的含量。结果见表2。

表1 回收率测定结果

表2 样品测定结果

图1

3 讨论

3.1 益母草的有效活性成分之一是盐酸水苏碱，收载于2005年版《中国药典》一部，其含量测定项下执行标准为薄层扫描法，该法操作繁琐，结果误差偏大；笔者参考文献采用高效液相色谱法测定盐酸水苏碱的含量，也非常不理想，实验中发现盐酸水苏碱的紫外吸收峰处于末端吸收，用紫外检测器根本就检测不到峰，换了很多型号的柱子也是如此，考虑到蒸发光散射检测器是通用型检测器，不受波长、试剂的干扰，调整合理参数，实验结果发现用该法测定，灵敏度高，峰形好，重现性好，测定结果准确稳定。见图1。

3.2 药典规定益母草的药用部位是地上部分，通过对春（鲜益母草）、夏（干益母草）两季、不同部位（全草、根、叶、茎）中盐酸水苏碱含量的测定，实验结果发现，不论春、夏季的益母草叶中盐酸水苏碱的量都高于茎中盐酸水苏碱的量，春（鲜益母草）中各部位盐酸水苏碱的量都高于夏（干益母草）中各部位盐酸水苏碱的量，另外，夏（干益母草）根中几乎不含盐酸水苏碱，而春（鲜益母草）根中含盐酸水苏碱的量却很高，所以建议我们医药工作者在使用益母草时春（鲜益母草）全草都可用，夏（干益母草）用地上部分就可以，如果两者比较的话，用春（鲜益母草）更好。

[1] 中华人民共和国药典委员会编.中华人民共和国药典[S].北京：化学工业出版社，2005：203.

[2] 冯旭等.HPLC-ELSD测定益母草中盐酸水苏碱的含量[J].广西中医药杂志，2007，30（6）：54.

[3] 林冬杰，张会球.HPLC-ELSD测定益母草流浸膏中盐酸水苏碱的含量[J].亚太传统医药，2009，5（2）：45.