β-七叶皂甙钠对高血压并发脑出血患者血清水通道蛋白水平的影响

鲁红霞,姜荣建

(1.四川省成都市郫县中医院内二科 611730;2.四川省人民医院心内科,成都610072)

高血压性脑出血(hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH)是高血压患者最严重的并发症之一,多见于50～60岁的老年人,近年来其发病年龄呈年轻化趋势。HICH病理变化中脑水肿既是脑出血后脑组织继发性改变之一,也是导致脑组织二次损伤的关键因素[1]。水通道蛋白(aquaporins,AQPs)是一族广泛存在于原核和真核生物细胞膜上的、选择性高效转运水分子的特异孔道蛋白。研究表明,水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP-1)和水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP-4)参与了多种神经系统疾病引起的脑水肿发生过程[2]。β-七叶皂甙钠具有多种药理作用,本研究观察分析β-七叶皂甙钠对高血压并发脑出血内科治疗患者血清AQP-1和AQP-4水平变化的影响,探讨AQPs在高血压并发脑出血后的变化以及β-七叶皂甙钠的神经保护作用机制。

1 临床资料

1.1 一般资料 分析2006年 1月至 2008年6月在本院内科住院治疗的高血压并发脑出血患者37例的临床资料,所有患者均符合1995年第4届全国脑血管会议制定的高血压标准,分析对象排除继发性高血压,肝肾功能检查基本正常,无脑血管、血液、肿瘤等其他系统疾病。37例患者均进行了常规内科治疗,其中19例患者使用了β-七叶皂甙钠归于辅助治疗组(辅助组),余18例患者为常规组。常规组中男8例,女10例,年龄42～76岁,平均(62.3±8.3)岁;辅助组中男11例,女8例,年龄40～77岁,平均(61.6±8.1)岁。两组患者年龄、性别、入院时血压、神经功能缺损评分及入院病程(发病至入院)等差异无统计学意义(表 1)。

1.2 治疗方法 37例患者入院后均给予常规降低颅内压、控制血压、控制血糖、应用抗生素及营养支持等治疗。随机分组,19例患者(辅助组)使用了β-七叶皂甙钠(山东绿叶制药有限公司生产,批号200402132)20mg,加入0.9%氯化钠250mL中静脉滴注,每日1次,使用 10～ 14d。治疗后3、7、14、21d检测两组患者血清AQP-1和AQP-4水平,同时进行神经功能缺损评分量表(national institute of health stroke scale,NIHSS)评分。

1.3 检测指标及方法 采集患者第3、7、14、21天空腹静脉血,获取血清置-70℃低温冰箱保存,集中测定血清AQP-1和AQP-4水平。(1)血清AQP-1和AQP-4水平检测:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测AQP-1和 AQP-4水平,AQP-1和AQP-4检测试剂盒购自深圳晶美生物工程有限公司。(2)NIHSS评分:依照美国国立卫生院NIHSS评分标准,详细记录患者意识水平、颅神经、肢体运动、感觉以及语言等指标,分别于治疗后第 3、7、14、21天各评估一次。

1.4 统计学方法 使用SPSS12.0软件及Med Calc软件进行统计处理,计量资料以表示,组间比较用配对t检验,P＜0.05为差异有统计学意义。受试者工作特性曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)采用Med Calc软件进行处理。

表1 两组患者基本临床资料

表2 两组患者治疗后不同时间的血清AQP-1和AQP-4水平(μ g/L)

2 结 果

2.1 血清AQP-1和AQP-4水平检测结果 治疗后第3、7和14天辅助组AQP-1水平显著低于常规组(P＜0.01),第21天两组差异无统计学意义(P＞0.05)。治疗后第3、7天辅助组AQP-4水平显著低于常规组(P＜0.01),第 14、21天两组差异无统计学意义(P＞0.05)。两组患者血清AQP-1和AQP-4水平在高血压性脑出血发生后出现了显著升高,随病程进展及患者病情恢复逐渐降低,其下降过程中辅助组较常规组下降趋势明显,这可能与β-七叶皂甙钠的抗水肿作用有关(表2)。

2.2 NIHSS评分结果 两组患者在病程第 3、7和14天NIHSS评分差异无统计学意义(P＞0.05),病程第21天辅助组NIHSS评分显著低于常规组(P＜0.05)。表明β-七叶皂甙钠可能通过下调患者血清AQP-1和AQP-4水平发挥其神经保护作用而改善脑出血预后,降低了辅助组患者NIHSS评分(表3)。

2.3 血清AQP-1和AQP-4水平与NIHSS评分相关分析血清AQP-1和AQP-4水平与NIHSS相关系数分别为0.656和0.587(P＜0.01),表明血清 AQP-1和AQP-4水平可代表脑损伤程度,检测AQP-1和AQP-4水平可对HICH患者的预后进行一定程度的预测。

表3 两组患者治疗后不同时间NIHSS评分结果

表4 血清AQP-1及AQP-4水平AUC统计结果

2.4 血清AQP-1和AQP-4水平ROC曲线特征分析 ROC分析表明,AQP-1曲线下面积为0.621,AQP-4曲线下面积为0.582。AQP-1和 AQP-4 ROC配对比较,AUC相差值为0.039±0.011,95%可信区间为0.018～0.060,z statistic参数为3.708,P＜0.01,说明β-七叶皂甙钠对血清 AQP-1和AQP-4水平均有显著影响,但对AQP-1水平的影响显著大于对AQP-4的影响,即β-七叶皂甙钠可能主要通过对AQP-1的影响达到其神经保护作用(表4)。

3 讨 论

AQPs作为膜主体内在蛋白(major infrinsic pro-tein,MIP)家族成员,具有增加细胞膜水通透力的功能,可以提供快速液体转运的途径。AQPs功能不受温度和脂质膜成分影响,而且不存在开放和关闭的功能状态,只要有渗透压梯度就有水分子顺渗透压梯度通过水孔通道[3]。AQP-1作为原生型水通道,在全身分布极为广泛,分布于循环系统、泌尿系统、消化系统、神经系统及运动系统,参与人体内多种生理功能的调节,对维持人体正常生理状态具有重要作用[4],AQP-1表达异常或调节失控与某些疾病的发生密切相关[5]。AQP-4为四异聚体蛋白,AQP-4与脑的血液灌注及水肿的形成和消退有着密切的关系,对调节体内水代谢和维持中枢神经系统水代谢的平衡有重要的意义。AQP-4参与脑出血、脑水肿的形成,在维持大脑平衡中起重要作用,AQP-4水平降低均可以延缓或阻止脑水肿形成。本研究中,治疗后第 3、7、14天辅助组 AQP-1水平显著低于常规组,第 3、7天辅助组 AQP-4水平显著低于常规组。提示辅助组和常规组患者血清AQP-1和AQP-4水平在高血压性脑出血发生后出现了显著升高,随病程进展及患者病情恢复逐渐降低,辅助组下降趋势较明显。治疗后第21天两组AQP-1水平差异无统计学意义,治疗后第 14、21天两组AQP-4水平差异无统计学意义,说明随患者病情稳定,AQP水平逐渐稳定。有文献支持本研究观察结果,陈现红等[6]发现高血压性脑出血患者出血后 AQP-4、MM P-2及MMP-9早期上调表达。周圣军等[7]发现血肿周围组织脑水肿的形成和发展与AQP-4的异常表达密切相关。

本研究结果表明,两组患者血清AQP-1和AQP-4水平均随治疗时间延长逐渐呈下降趋势,但辅助组下降较明显,这可能与β-七叶皂甙钠的抗水肿及抗炎作用有关。急性脑出血血肿形成后,在血肿周围会形成低密度的水肿带,并且随着出血时间的延长,水肿范围也逐渐扩大,最终导致脑组织受压形成高颅内压甚至脑疝,造成二次损伤。因此,在维持血压稳定的前提下,加用β-七叶皂甙钠治疗对进一步减轻脑水肿有良好效果。这也符合脑出血治疗原则:控制颅内压增高、减轻脑水肿、调整血压、防止再出血和减轻血肿造成的继发性损害。曾建中等[8]将脑出血患者加用β-七叶皂甙钠注射液治疗,发现β-七叶皂甙钠对组织损伤有抗炎、抗渗出及消水肿作用,血肿吸收和神经功能改善。最为重要的是患者神经功能的恢复,本研究中辅助组第21天NIHSS评分显著低于常规组,表明β-七叶皂甙钠可能通过显著下调AQP-1和AQP-4水平,发挥其神经保护作用而改善 NIHSS评分,改善了脑出血预后。为分析何种AQP在β-七叶皂甙钠的作用机制中可能更发挥作用,本科采用ROC分析方法探讨AQP-1和AQP-4以辅助组为阳性值进行的统计分析,结果表明,AQP-1曲线下面积显著高于AQP-4,z statistic参数为 3.708,P＜0.01,说明β-七叶皂甙钠对AQP-1水平的影响显著大于对 AQP-4的影响,即β-七叶皂甙钠可能主要通过对AQP-1的影响达到其神经保护作用。

β-七叶皂甙钠是含多酯键三萜皂苷的钠盐,在抗炎、抗渗出和消肿方面作用尤为显著,它既能增加体内前列腺素PGF2分泌,抑制前列腺素E释放量,还能促进肾上腺皮质分泌皮质类固醇,对抗组胺和缓激肽等炎性介质作用,因而具有明显的抗炎、抗渗出、消肿胀、减轻水肿作用,并且还具有很强的稳定血管内皮细胞和清除自由基及恢复毛细血管的正常通透性、改善微循环、保护神经组织及促进脑功能恢复的作用[9]。本研究结果提示AQP-1和AQP-4参与了脑出血水肿的形成,可通过下调AQP-1和AQP-4达到控制HICH发生后脑水肿发生、避免继发性损伤、改善患者预后的目的。

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[6]陈现红,陆兵勋,赵涛,等.AQP-4、MMP-2及 MMP-9 mRNA在高血压脑出血中的早期表达[J].中华神经医学杂志,2006,5(5):480.

[7]周圣军,蔺志清,张作洪,等.AQP-4在高血压脑出血周围水肿组织中表达的临床研究[J].中国临床神经外科杂志,2008,13(8):468.

[8]曾建中,王鹏.β-七叶皂甙钠治疗脑出血疗效观察[J].脑与神经疾病杂志,2008,16(3):188.

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