地中海水牛人工授精效果研究

覃广胜,杨炳壮,谭正准,李 辉,黄 健,梁贤威

(中国农业科学院广西水牛研究所,广西南宁530001)

意大利地中海水牛是目前世界上河流型水牛中产奶性能最好的品种之一,其平均一个泌乳期产奶量可达到2168 kg,有部分高产牛群可达到一个泌乳期4000～5000 kg,奶质优良,被公认为乳用水牛中的一个非常优秀的品种。广西水牛研究所是我国唯一研究水牛的科研机构,目前拥有2个河流型水牛品种(摩拉和尼里/拉菲水牛)。2007年7月,在科技部国际科技合作项目和农业部948项目的资助下,我所国内首次引进意大利地中海的优秀奶水牛冻精,并采用人工授精技术,分别与我国现有的摩拉水牛、尼里/拉菲水牛以及本地水牛进行杂交组合研究。引进冻精目的是通过对其杂交后代的选育,培育水牛新品系,建立良种水牛核心种群,为我国开展水牛杂交改良提供充足的种源;另一方面,通过对其杂交后代的生产性能测定,筛选出最佳的杂交组合,用于我国本地水牛的杂交改良,促进我国奶水牛业快速发展。本试验旨在初步了解地中海水牛冻精在我国人工授精的效果,以探讨意大利地中海水牛在我国生长适应情况,为下一步规模应用地中海水牛冻精改良我国本地水牛奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验牛群 选取广西水牛研究所隔离试验牛场中经检验合格的牛群作为试验牛,其中有摩拉水牛30头,尼里水牛25头,本地水牛40头,年龄2.5～9岁之间,体重350～650 kg。

1.1.2 冻精 从意大利人工授精中心(COFA)引进的意大利地中海水牛细管冻精,每细管冻精有效精子数1000万以上,精子活力解冻后0.4以上。

1.2 试验方法

1.2.1 发情观察与监测 每天专人认真观察和记录牛群中摩拉、尼里和本地水牛的自然发情情况,并用结扎的试情公牛做为辅助发情观察;同时从发现发情开始,每天利用B超诊断仪(日本Honda HS-101V)监测卵巢上卵泡发育情况,确定优势卵泡在哪一侧,从早、中、晚每隔4～6 h监测水牛排卵情况,并根据水牛发情行为、粘液情况以及排卵情况选择确定最适配种时间。

1.2.2 冻精解冻方法 把地中海水牛冻精迅速从液氮罐取出后,放置空气中停留5～8 s,然后迅速放到37.5～39℃的温水中解冻,在解冻时间10～15 s,显微镜检查精子活力,解冻后精子活力在0.40以上。

1.2.3 人工授精方法 采用直肠把握子宫角深部输精法。

1.2.4 妊娠检查 在配种后40 d用B超诊断仪(日本Honda HS-101V)进行早期妊娠诊断,确定是否怀孕。

1.2.5 试验记录 记录水牛发情时间、发情表现、排卵时间、卵泡发育情况和怀孕情况等。

1.2.6 数据统计 以水牛品种作为处理因素,配种牛头数与怀孕头数作为结果,应用SAS8.0进行卡方独立性检验,P>0.1认为是差异不显著。

2 结果与分析

2.1 不同品种水牛对人工授精效果的影响

表1 不同品种水牛人工授精效果的比较

从表1可以看出,利用地中海水牛冻精进行人工授精,品种间人工授精受胎率差异不显著(P>0.1);总平均受胎率为58.82%。从初步试验结果来看,利用引进的地中海水牛冻精进行人工授精,其的受胎率效果还是较好的。

2.2 不同年龄对人工授精效果的影响

表2 不同年龄对水牛受胎率的影响

由表2看出,青年母水牛人工授精配种受胎率略高于经产母牛的受胎率,但统计结果差异不显著(P>0.1)。

2.3 排卵时间对人工授精人工授精效果的影响

表3 根据排卵时间进行人工授精对水牛受胎率的影响

从表3结果发现,排卵时间对人工授精配种受胎率影响较大,以排卵后1～3 h配种的受胎率最好,明显高于排卵后4～6 h配种的受胎率(P<0.1),但与排卵前6～8 h配种的受胎率统计上没有差异(P>0.1)。

3 讨论与小结

利用意大利地中海水牛冻精与我国摩拉、尼里以及本地水牛进行人工授精效果表明,意大利地中海水牛冻精完全可与摩拉、尼里和我国本地水牛进行杂交的,且效果较好,其平均人工授精配种受胎率为58.82%,高于意大利的Zicarelli L等[1]报道利用地中海水牛人工授精配种受胎率(42.5%～51.1%),与Moioli等[2](1998)报道地中海水牛自然发情人工授精配种受胎率56%相近。

本试验中,以尼里/拉菲的人工授精配种受胎率效果最好,达到75%,但品种间人工授精配种受胎率统计上差异不显著(P>0.1),这与蔡启站[3]研究发现在摩拉、尼里/拉菲和杂交水牛3个品种中的人工授精配种受胎率差异不显著的结果相一致。

本研究结果发现,青年母水牛人工授精配种受胎率略高于经产母牛的受胎率,与蔡启站[3]报道的结果相似,在利用尼里/拉菲、摩拉和杂交水牛进行人工授精配种试验中,发现以3～8岁的水牛受胎率最高(66.5%).其次是 9～12岁者(45.6%)。13岁以上者仅为35.3% 。这可能是青年母牛的生殖道和子宫内环境相对健康干净不受病菌感染,有利于精卵受精和胚胎着床。而经产母牛常有产科疾病,且年龄大的母水牛卵巢机能活动减退,排卵延迟等原因,致使人工授精配种受胎率降低。

从本研究试验结果中可看出,排卵时间对人工授精配种受胎率影响较大。许多研究者强调由于水牛的发情症状不明显,发情时间和持续时间长短不一,因此掌握水牛排卵规律,把握水牛人工授精适时输精时间是重要的[4,5]。在本研究中用B超跟踪了15头牛25个发情周期研究中,从发情开始到排卵这阶段平均时间是40.7 h(19～96 h),与周岐生[6](40.8h)、李忠权[7](47h)等报道相近。吴师等[8]也报道了大部分水牛在发情后40h左右即进入发情的后期或末期,是比较理想的输精时间,母牛在发情后36～40 h进行人工授精,配种受胎率达69.86%;在发情后24 h以前或发情后60 h以后的配种受胎率较低,相比分别相差44.15个百分点和37.86个百分点,差异显著(P<0.05)。而水牛的适时输精在发情的后期或末期,也就是在水牛发情后36～48 h,平均40 h输精,可获得较理想的配种受胎率,从本研究结果也得到了进一步证明。

综合本研究结果看出,利用意大利地中海水牛冻精与我国摩拉、尼里以及本地水牛进行人工授精,受胎效果较好。这表明引进地中海水牛冻精开展杂交组合研究,改良我国现有的水牛品种,提高其生产性能是切实可行的。

[1]Zicarelli L,De Filippo C,Francillo M,et al.Influence of insemination technique and ovulation time on fertility percentage in sy nchronized buffaloes.Proc.[J].Fifth world buffalo congress,Caserta,Italy,13～16,October 1997:732-734.

[2]M oioli B M,Napolitano F,Puppo S,et al.Pattern of estrous,time of LH release and ovulation and effects of time of artificial insemination in Mediterranean buffalo cows[J].Anim.Sci.,1998,66:87-91.

[3]蔡启站.品种、季节、年龄及胎次对冷配水牛妊娠的影响[J].中国兽医学报,1997,(1):98-99.

[4]Ohashi O M.Estrous detection in buffalo cow[J].Buffalo J,1994;(Suppl.2):61-64.

[5]Baruselli P S.Control of follicular development applied to reproduction Biotechnologies in buffalo[J].In:Proc I Congresso Nazionale sull'allevamento del bufalo;2001.p.128-46.

[6]周歧生.我对水牛输精工作的一些心得体会[J].广西畜牧兽医,2004,20(2):61-64.

[7]李忠权.水牛繁殖季节及情期适时输精的研究[J].广西畜牧兽医,2007,23(3):116-117.

[8]吴 师,宾娟容,张玉西,等.广西水牛发情特点及适时输精的研究[J].中国草食动物,2007,27(6):34-35.