抗炎合剂质量控制的初步探讨

李洪兵

江苏省淮安市中医院（223002）

抗炎合剂是由金银花、连翘、丹皮、赤芍等10味药材加工而成的制剂。笔者通过查阅文献[1]，采用TLC法鉴别制剂中的连翘，采用HPLC法测定绿原酸的含量，所建立的方法快速、准确、简便、重现性好、结果满意，为有效控制该制剂的质量提供好的方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器

METTLER、TOLEDO、AG135型电子分析天平；LC-20AD高效液相色谱仪。

1.2 试药

绿原酸对照品（中国药品生物制品检定所；批号：200413）；连翘苷对照品（中国药品生物制品检定所；批号：200610 ）；连翘对照药材（中国药品生物制品检定所；批号：200506 ）；甲醇为色谱纯；三氯甲烷、冰醋酸均为分析纯；硅胶G：青岛海洋；抗炎合剂：样品均为淮安市中医院制剂；金银花、连翘、丹皮、赤芍、皂刺等均为淮安市中医院饮片。

2 定性鉴别方法和结果

取本品5mL，加甲醇10mL摇匀，作为供试品溶液。另取连翘对照药材，作为对照药材溶液，再取连翘苷对照品加甲醇制成1mg/mL的溶液，作为对照品溶液。根据该药处方组成，按比例称取除连翘的药材，按制法制成阴性对照溶液。吸取上述4种溶液各5µL点于同一以0.5%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（5∶1）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同的紫色斑点。缺连翘的阴性对照品无干扰，见图1。

图1 色谱对照图

3 含量测定

3.1 色谱条件

3.1.1 检测波长的选择

取对照品溶液和供试品溶液进行紫外扫描，测定其最大吸收波长，确定检测波长为324nm，见图2和图3。

图2

图3

3.1.2 试验条件

色谱柱：Phenomenex C18柱，250mm×4.60mm，5µm 流动相：甲醇-水-冰醋酸（20∶80 ∶1）[2]；检测波长：324nm；柱温：35℃；进样量：10µL；理论板数按绿原酸峰计算不低于2000。

3.2 对照品的制备

精密称取绿原酸对照品15.42mg置20mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成对照品浓溶液。精密吸取2mL置40mL量瓶中，加甲醇制成38.55µg/mL的溶液，作为对照品溶液。

3.3 供试品的制备

精密量取本品5mL，置25mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。

3.4 阴性对照溶液的制备

根据该药处方组成，按比例称取除金银花的药材，按制法制成阴性对照溶液。

3.5 线性关系

精密称取绿原酸对照品15.42mg，置20mL量瓶中，再精密吸取2mL置40mL量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度。精密吸取上述溶液2、5、10、20、50µL分别注入液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，进行线性回归，回归方程为Y=4.138×108X+1.580×104，r=0.9999，线性范围为0.0771～1.9275µg。

3.6 精密度

精密吸取绿原酸对照品溶液10µL注入液相色谱仪，RSD =0.1%（n=6）。

3.7 稳定性

分别取绿原酸对照品溶液在配制后0、0.5、1、2、4、6、8h进样，测得峰面积，结果表明二者均在8h内稳定，RSD为0.2%。

3.8 回收率试验

取已知含量的供试品5mL分别加入绿原酸对照品浓溶液1mL，置50mL量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，滤过，精密吸取续滤液10µL注入液相色谱仪，测定，见表1。

表1 绿原酸回收率测定结果

3.9 供试品测定

分别取对照品溶液和供试品溶液10µL进样，测得峰面积，计算得制剂中乙酰水杨酸、水杨酸的含量，测定结果见表1和图4～图6。

表2 抗炎合剂中绿原酸的含量测定结果

图4 绿原酸对照品

图5 供试品

图6 缺金银花阴性对照

4 小结与结论

抗炎合剂为淮安市中医院制剂，市场没有销售，现行标准简单，不能对其进行有效的质量控制，此方法简便，快速，准确，为提高和完善该制剂的质量标准提供了依据[3]。

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.卫生部药品标准(中药成方制剂第十一册)[S].北京:化学工业出版社,2005.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[S].北京:化学工业出版社,2005:405-406.

[3]赵志军,王连水,张楠.菊蓝抗流感片薄层鉴别及绿原酸含量测定方法[J].中成药,2005,27(9):1111-1113.