骨髓铁染色三种复染剂的方法学比较

张姝 刘咏酶 黄健

(贵阳医学院医学检验系临床检验教研室,贵州贵阳 550004)

骨髓铁染色三种复染剂的方法学比较

张姝 刘咏酶 黄健

(贵阳医学院医学检验系临床检验教研室,贵州贵阳 550004)

目的探讨不同的复染试剂对骨髓铁染色效果的影响。方法每例患者收集三张骨髓涂片,分别用瑞氏、沙黄、核固红三种复染剂进行铁染色,观察骨髓小粒及幼红细胞中铁的分布情况。结果三种染色方法进行比较,细胞外铁的阳性率相同,细胞内铁染色结果无显著性差异。结论三种复染方法中推荐采用瑞氏复染,因其铁颗粒较易观察,且染色时间较短、操作简便。

复染试剂 铁染色

骨髓铁染色是评估铁缺乏最实用的方法,临床常被用作鉴别贫血类型。铁染色对诊断缺铁与非缺铁、铁负荷增加及铁利用障碍等贫血具有重要价值[1]。临床上常用核固红作为铁染色的复染试剂,而对其他复染试剂的相关报道较少见。为了探讨不同的复染试剂对骨髓铁染色效果的影响,现将我院2007年11～12月的30份骨髓标本分别采用核固红、瑞氏和沙黄三种不同的染液进行复染结果报告如下。

1 对象与方法

1.1 对象 2007年11～12月在我院就诊的30例血液病患者的骨髓标本,男15例,女15例,年龄9～76岁,平均40.5岁。

1.2 方法

1.2.1 先将载玻片去铁处理,分别采集患者骨髓液,制备三张骨髓涂片,用酸性的亚铁氰化钾染色,然后再用核固红、瑞氏和沙黄三种不同的复染剂进行复染,最后用显微镜观察骨髓内铁和外铁,将三种方法所得的结果分组记录,诊断标准参考《临床血液学和血液学检验》[2]。

1.2.2 干燥骨髓涂片用甲醇固定10 min,待干;玻片上滴酸性亚铁氰化钾20滴,37℃染色30 min;用蒸馏水冲洗后分别用瑞氏染液、沙黄染液和核固红染液复染;流水冲洗,待干,镜检。

1.3 统计学方法 采用t检验

2 结果

2.1 30例骨髓标本分别用瑞氏、沙黄和核固红三种复染试剂进行复染后细胞外铁的染色结果基本相同(表1)。

表1 三种复染方法细胞外铁染色结果比较(例)

2.2 30例骨髓标本细胞内铁阳性率通过t检验进行比较,P值均＞0.05,故三种方法的细胞内铁染色结果差异均无显著性意义(表2)

表2 三种复染方法细胞内铁染色结果比较

3 讨论

骨髓内外铁染色是进行贫血分类的常用组织化学染色方法,是评估铁缺乏最实用的方法,储存铁(主要位于骨髓组织,又称细胞外铁)、幼红细胞铁(又称细胞内铁),由于二者可通过染色识别,故被称为可染铁,临床上常被用作鉴别贫血类型[3];缺铁性贫血时骨髓外铁阴性、内铁阳性率低,而巨幼细胞性贫血时外铁阳性、内铁阳性率高[4];铁染色对贫血的鉴别诊断有非常重要的作用。因此,选择比较好的染色方法,对结果观察有一定的影响。

本组资料表明,使用三种复染液细胞外铁结果相同,细胞内铁阳性率差异无显著意义。目前临床上采用的复染液为核固红,使用核固红复染液在有些情况下铁颗粒较小不易辨认,就会使阳性率降低,并且核固红复染所需时间长,在气温较低时需要更长的时间,这样就会耽误诊断;本研究使用沙黄进行复染,发现沙黄染液效果与核固红大致相同,但沙黄复染的时间较难控制,复染一般只需2～3 min,需严格控制时间,否则时间稍长就会导致细胞结构不明显,影响观察结果。另外,使用瑞氏染液进行复染,这种方法所需要的时间较短,操作简便,提高了工作效率,根据实验观察,使用瑞氏染液可将细胞胞核、胞浆染得非常清晰,细胞很容易区别开,特别是在观察细胞内铁时,幼红就非常明显,蓝色铁颗粒容易辨认。此外,临床上如果使用铁染色和常规瑞氏染色瑞氏复染,可以将两者合二为一,这样可大大提高工作效率。

[1]周建中.巨幼细胞贫血与再生障碍性贫血铁染色特征[J].国际输血及血液学杂志,2007,30(1):20-21.

[2]谭齐贤,张树干.临床血液学和血液检验[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2006:58.

[3]张英波,万树栋.铁染色在鉴别几种形态相似贫血中的应用[J].实用医技杂志,2007,14(6):718.

[4]郝影兰,卢玉霞.骨髓铁染色在疾病诊断中的应用[J].中国临床医药杂志,2005,4(3):66-67.

Complex reagent Stained Iron stain reagent

张姝(1980-),女,本科,硕士,助教,从事临床检验工作

R472,R446.1

B

1002-6975(2010)02-0164-02

2009-08-19)