survivin与宫颈鳞癌新辅助化疗和放疗敏感性的相关性研究

高碧燕 张 明 杨 毅 吴星娆 金丛国

新辅助化疗和放射治疗是治疗局部晚期宫颈癌有效方法,一般先化疗 1～2个周期后再行放射治疗。但由于肿瘤细胞对化疗和放疗的敏感性不同,如何预测宫颈癌对新辅助化疗和放疗敏感性,正确选择化疗、放疗等有效治疗手段,把握最佳治疗时机,使患者得到更好的个体化治疗是临床研究的重点。本研究旨在探讨化疗前后 survivin表达与宫颈鳞癌新辅助化疗和放疗敏感性的关系。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取 2005年 1月 ～2009年 5月我院收治的 32例宫颈鳞癌患者,入组标准:因为各种原因不能或不愿手术治疗;WBC≥4×109/L,PL≥80×109/L;肝肾功能正常;KPS评分≥70分;从未接受过放化疗及手术治疗。年龄为 31～73岁,平均年龄为 45.2岁,＜45岁 18例;≥45岁 14例;按 FIGO分期标准,Ⅰb期 2例;Ⅱa期 1例;Ⅱb期 22例,Ⅲb期 7例;高分化 2例,中分化 17例,低分化 13例。

1.2 survivin的检测

采用 SABC法检测 survivin的表达,检测标本为新辅助化疗前后的宫颈癌组织活检标本,实验步骤操作按试剂盒说明进行。

1.3 新辅助化疗

新辅助化疗采用腹壁下动脉插管法,于髂前上棘与耻骨联线中外 1/3处局麻,切开一长约 4～5 cm切口,于腹膜外脂肪中找到腹壁下动脉游离、剪断、结扎远端,用硬膜外导管从近端向上插入 22～24 cm达腹主动脉分叉处(相当第 4腰椎上缘水平),以 0.5%肝素充满导管后封管。术后行腹部 X线透视确认导管方向和高度。缓慢给药 DDP 30 mg+BLM 15mg,每天1次,连用 5天为 1个疗程,灌注药物时双大腿根部用气压止血带阻断血流 15m in/次,以保证药物高浓度注入。化疗结束后 2周,再次取材送检并评价疗效。

1.4 放射治疗

采用直线加速器 6MV-X前后全盆腔大野和四野照射。上界:第 4～5腰椎水平;下界:耻骨联合上缘下4～5 cm;左右界:股骨头中线。大野照射 DT26～30 Gy然后改为四野照射 DT20～24 Gy,四野照射只在大野中央挡 3～4 cm宽(长同原大野长度)铅块。四野照射的同时开始行腔内治疗,采用192Ir后装机腔内放疗,A点 6 Gy/次,1次 /周,总剂量 36～42 Gy/6～7次;治疗结束后再次评价疗效。

1.5 评价指标

Survivin阳性结果判定:胞质或胞核呈黄色至棕黄色者为阳性表达细胞,参照 Lgaws等方法,每张切片在400倍显微镜下取 5～10个视野,每个视野计数 100～200个细胞,共计 1000个细胞,计算阳性细胞的百分数。将阳性细胞数按其数量及显色强度分为 3级:表达弱阳性(+),即阳性细胞数 ＜10%,显色度为淡黄色或仅个别细胞呈黄至棕黄色;表达强阳性(+++),即阳性细胞数 ＞60%,多数细胞呈黄色至棕黄色;表达中度阳性(++),即阳性细胞数在 10%～60%。凡胞质或胞核显色度上背景无明显差异者为阴性(-)[1]。

疗效评价:以直接观察和测量子宫颈病灶的大小来判断近期疗效,按照 WHO疗效评价标准进行评价:即完全缓解 (CR)、部分缓解(PR)、稳定(NC)、进展(PD)。CR为高度敏感,PR为低度敏感,NC或 PD为不敏感。

1.6 统计学分析

采用 SPSS11.5统计软件,采用 χ2检验和确切概率法进行统计学分析;着色指数为计量资料,采用 t检验进行比较分析。

2 结果

2.1 化疗前后 survivin阳性表达率与宫颈鳞癌临床病理特征的关系

化疗前后 survivin阳性表达率分别为 68.8%(22/32)和 56.3%(18/32),差异无统计学意义 (P=0.302)。不同年龄、临床分期、病理分级患者,化疗前与化疗后 survivin阳性表达率,差异也均无统计学意义(P＞0.05),见表 1。

表1 化疗前后survivin阳性表达与临床病理特征的关系(例,%)

2.2 化疗前 survivin表达与疗效的关系(表 2)

NACT与 NACT+RT对化疗前 survivin阳性表达患者总体疗效比较,差异均有统计学意义(P=0.030,0.009);survivin(+)组和(++)组 NACT与 NACT+RT的疗效比较,差异均有统计学意义(P≤0.05);survivin(-)组和(+++)组 NACT与 NACT+RT的疗效比较,差异均无统计学意义(P≥0.05);随着 survivin表达强度增强,NACT和 NACT+RT的 CR率有逐渐下降的趋势。

表2 化疗前 survivin表达与疗效的关系(例)

3 讨论

survivin是 1种凋亡抑制基因,survivin能抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,参与调节细胞的有丝分裂并可能参与血管的形成,与肿瘤的发生、发展和预后密切相关,高表达可以促进细胞增殖。

目前,有关 Survivin的研究结论不尽相同,可能与检测方法和判定标准有关。徐咏莲等[2]研究发现:宫颈癌 survivin阳性率 69.6%(39/56),正常宫颈组织仅为 16.7%(3/18),survivin表达与患者年龄、临床分期和淋巴结转移有关,但与宫颈癌组织细胞类型及分化程度无明显相关性。郭敏敏等[3]报道 Survivin在宫颈鳞癌中的阳性表达率为 56.67%(17/30),在宫颈腺癌的阳性表达率为 80.00%(24/30),差异有统计学意义;Survivin阳性表达与患者年龄、肿瘤大小、病理分级及临床分期无相关性;与病理类型、淋巴结转移相关。

唐郢等[4]研究发现:survivin表达为独立宫颈鳞癌的预后影响因素,survivin表达预示着宫颈鳞癌患者有不良预后。该研究中 84.81%(67/79)的患者接受了放疗或化疗,所有患者的平均生存时间(68.32±4.63)个月;其中 survivin阳性患者的平均生存时间是(64.48±6.23)个月,阴性患者的平均生存时间是(78.25±5.4)个月,两者无显著差异;提示 survivin基因阳性表达预示宫颈鳞癌对放、化疗抵抗。张振宇等[5]报道动脉灌注化疗前 survivin的阳性表达率为85%(17/20),蛋白表达量的平均值为 1.1656±0.0024。化疗后的阳性表达率为 65%(13/20)蛋白表达量的平均值为 1.1591±0.0022。治疗后 survivin的阳性表达率及蛋白表达量均明显下降,差异具有显著性。Chakravarti等[6]研究也表明,survivin基因可以提高肿瘤细胞对放射治疗及化疗杀伤作用的抵抗能力。

本组结果提示:survivin阴性表达患者对放化疗高度敏感,采用NACT或NACT+RT都可以获得很好的近期疗效,尤其是 NACT+RT的完全缓解率达 100%;而 survivin弱阳性和中度阳性表达患者对放化疗呈中等度敏感,但采用 NACT+RT比单纯 NACT更能够获得满意的近期疗效,NACT+RT的完全缓解率也可以达到 100%;survivin强阳性表达患者对放化疗不敏感,虽然 NACT+RT较单纯 NACT近期完全缓解率增高的趋势,但无论采用单纯 NACT还是 NACT+RT都难以获得较为满意的近期疗效。

复习文献并结合本研究结果我们认为:①宫颈鳞癌新辅助化疗前 survivin阳性表达强度与化疗和放疗敏感性呈负相关,治疗前 survivin阳性表达强度愈强、完全缓解率愈低,治疗前检测患者 survivin表达可以为预测化疗和放疗敏感性提供客观依据。②化疗和放疗对宫颈鳞癌均有明显疗效,对放化疗中等敏感的患者 NACT+RT综合治疗较单纯 NACT近期疗效更好。③本研究由于化疗仅 1个周期,化放疗间隔时间短(仅 2周),化疗药物对肿瘤细胞的杀灭作用可能还没有充分发生。同时本研究实验病例数较少,各分层研究例数不甚均衡。上述原因都可能导致实验数据和分析的误差增大,我们将在将来的实验中调整治疗方案,延长观察时间,扩大病例数做进一步研究。

[1] 张保华,卢 实,王泽华.宫颈癌组织中 survivin基因的表达及其临床意义〔J〕.实用医学杂志,2004,20(4):384.

[2] 徐咏莲,刘少阳,江大琼.宫颈癌中 survivin、ki67、cyclinB 1的表达及临床意义〔J〕.现代妇产科进展,2004,13(3):184.

[3] 郭敏敏,张小玲,盛修贵.Survivin基因在宫颈鳞癌和腺癌中的表达及其临床意义〔J〕.中华肿瘤防治杂志,2007,14(4):294.

[4] 唐 郢,周 琦,叶学正,等.Survivin、p53表达与宫颈鳞癌预后的关系〔J〕.肿瘤学杂志,2007,13(2):123.

[5] 张振宇,浦 红,杨 凯,等.探讨 survivin蛋白在宫颈癌组织中化疗前后的表达、细胞凋亡及临床意义〔J〕.实用医技杂志,2008,15(22):3014.

[6] Chak ravarti A,Zhai GG,Zhang M,et al.Survivin enhances radiation resistance in primary human glioblastoma cellsvia caspase-independent mechanisms〔J〕.Oncogene,2004,23(45):7494.