肝细胞癌 SCT征象与 V EGF表达关系的研究

河南省焦作市人民医院病理科(焦作 454000) 陆晓彭 春

肝细胞肝癌是目前发病率最高的恶性肿瘤之一,肿瘤细胞的生长营养的提供、转移的通路都依赖肿瘤血管的生成。肿瘤细胞能分泌多种血管活性物质,直接或间接地作用于血管间皮细胞,促进肿瘤组织的血管的生成。在评价肝癌血管生成方面,目前研究较多的即血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF),其高表达与肝癌的形态特征、复发、转移等生物学行为密切相关。我们研究了肝细胞肝癌的SCT征象,测定了 VEGF蛋白表达强度,来探讨其相关性,现分析报告如下。

材料与方法

1 病例选择 选择手术切除并经病理证实的原发性肝细胞癌 42例,共 45个癌灶。术前均行动静脉双期 SCT扫描,SCT扫描前和手术前末进行抗肿瘤治疗。 其中男 37例,女 5例,年龄 32～ 74岁,平均 48.8岁。

2 SCT检查 所有病例术前均经GEHispeedadvantageRP22螺旋 CT机行增强后动静脉双期扫描,动脉期延迟 20～ 30s,静脉期延迟 60～70s,一次屏气,范围从膈顶至肝下缘。 120 kV,220 mAs,螺距为 1～ 1.5 mm,扫描时间为 0.6～ 1.0s(每层)。对比剂总量 75～ 120 ml(1.5ml/kg体重),注射速度 2.5～ 3.0ml/s。

3 SCT表现特征 分组标准:分析评价所有病灶的 SCT表现特征,主要包括肿瘤大小、包膜形成、侵袭危险性、强化类型、肝硬化等。

3.1 癌灶大小 直径小于等于 3.0cm为小肝癌组,大于 3.0cm为大肝癌组。

3.2 包膜情况 分为包膜完整,包膜不完整和无包膜两组。

3.3 高侵袭危险性组 ①肝门淋巴结、腹腔淋巴结转移;②门脉癌栓;③主癌灶周围存在数目不等的子灶。

3.4 SCT强化类型(动脉期) ①均匀强化:病灶呈明显的均匀强化;②不均匀强化和(或)环状强化:病灶呈不均匀斑片状强化,其内见较多点线状血管影和(或)病灶呈完整或不完整环状强化,其内无或仅见少许点状强化血管影。

3.5 肝硬化 肝左右叶比例失调,尾叶增大,左叶正常、缩小或增大,增大常局限于外侧段,肝裂增宽,肝门区扩大,胆囊位置变形,肝表面凹凸不平,脾大,腹水,侧枝循环血管扩张。

4 病理学和免疫组织化学 所有病灶取材后经10%中性福尔马林液固定常规石蜡包埋,4 μm连续切片,随机取出 1张做 HE染色,Edmondson四级法进行分级,每例收集 6张,1张 HE染色,其余免疫组化备用。免疫组织化学 SP法染色步骤按试剂说明书进行,以阳性切片为阳性对照,以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照。V EGF阳性判定标准:胞浆呈棕黄色颗粒为阳性细胞,高倍镜下随机取 5个高倍视野,以平均阳性细胞数≥25%为阳性,阳性细胞数 ＜25%为阴性。

5 统计学处理 采用双盲法,由两位高年资放射科医师分别阅片,对肝细胞肝癌的螺旋 CT征象进行分析,并将结果与病理和 VEGF表达进行对照。意见不一致时,参照上级医生的意见。所有数据应用SPSS12.0统计软件包进行分析,计数资料的比较采用χ2检验,等级相关资料采用 Spearman进行相关分析,以P＜0.05为有显著性差异,P＜0.01为有极显著性差异。

结 果

1 VEGF免疫组化结果 VEGF在 HCC中表达于细胞浆内,呈片状或散在分布,以胞浆中出现粗大棕黄色颗粒为阳性表达,HCC中 VEGF蛋白阳性表达率为57.78%。

2 肝细胞肝癌 SCT征象和 VEGF蛋白表达关系

见附表。

附表 HCC的 SCT表现特征与 VEGF蛋白的表达情况及相关关系

讨 论

肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是我国发生率居于第 3位的恶性肿瘤[1],影像医学是目前发现和诊断 HCC的重要方法,其主要手段包括 CT检查、磁共振成像及超声检查等。近年来,多层快速螺旋CT扫描技术、高场强磁共振成像及超声技术的突飞猛进,探讨 HCC医学影像表现与 HCC生物学行为的关系已成为可能和必要,尤其是关于 HCC的生长、转移方式和血液供应等相关生物学特性与影像学表现特征之间的联系成为研究热点[2,3]。

肿瘤血管生成是确保肿瘤增殖、营养供应和代谢物排除的病理生理基础。以 VEGF为核心的血管生长因子在肿瘤的生长、浸润、转移中发挥着重要作用,并具有促进内皮细胞增殖、加速血管形成的作用。研究证明[4,5]:VEGF是诱导肿瘤血管形成作用最强、特异性最高的调控因子,亦为目前可知的提高血管通透性最强的因子,通过与其酪氨酸激酶受体结合发挥作用。新生的肿瘤血管不能在 CT、MR图像上直接显示,但由于肿瘤血管增生导致肿瘤组织细胞外间隙的容量、灌流和毛细血管通透性均明显增加。此外,注射对比剂后组织衰减系数取决于组织的血流量和血管外液量。因此,影像上强化的组织生理学基础与肿瘤血管新生物是可能的,也是可靠的,并可间接推测 VEGF的表达[6]。

在本研究中发现:SCT图像上 HCC肿瘤大小、侵袭危险性、强化类型分别与 VEGF表达之间有相关性,HCC包膜形成状态和癌灶周围组织有无肝硬化与VEGF蛋白表达之间无相关性。分析其原因:①HCC肿瘤体积越大,说明肿瘤细胞增殖越快,血液供应就越丰富,V EGF表达强度就越强。②本实验结果显示SCT图像上高侵袭危险性组 VEGF表达强度较强。进一步证实了 HCC高侵袭危险组随着肿瘤分化越差,越容易复发或转移。③由于肝脏双重血供及多数肝癌主要系肝动脉供血,较少或不接受门静脉供血的特点,本研究选用动脉期 HCC病灶的强化特点进行分析。研究显示,均匀强化组 VEGF表达低于不均匀、环状强化组,提示均匀强化组恶性度较低,预后较好。④本研究认为,包膜形成并非 HCC本身的组织病理学变化,而是由于肿瘤组织生长引起的纤维组织增生和肿瘤组织对周围肝组织压迫所致;其二由于分辨率的原因,SCT无法显示较薄的包膜结构而造成的,均可导致从肿瘤包膜的完整性来分析肿瘤组织的增殖和生长情况是不可靠的,而需结合肿瘤包膜内的血运情况[7]。⑤CT表现与临床症状和肝功能紊乱可以不一致,因此 CT征象仅能反映有明显表现的一部分病例。说明了 SCT上诊断肝硬化的不可靠性,肝硬化的诊断需依据临床上的指标。HCC有无肝硬化与 VEGF蛋白表达之间无相关性。 Kwak等[8]研究也认为,组织学级别及肝炎类型与 VEGF表达无关。

总之,SCT图像是组织病理学特征的直接的客观的反映,根据 SCT图像上的 HCC表现特征可以推论VEGF蛋白的表达情况,为 HCC的诊断、治疗方案的选择及预后判断提供更切实的理论依据。

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